甜菜高效組培再生體系建立及遺傳轉(zhuǎn)化研究

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1、分類號(hào)Ｓ３３２．３學(xué)校代碼１０１２９Ｉ：０Ｃ６３３．６學(xué)號(hào)２０１２２０２０２９碩±學(xué)位論文甜菓高效組培再生體系建立及遺傳轉(zhuǎn)化硏究ＴｈｅＲｅｓｅａｒｃｈｏｎＥ巧ａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆＥｆｆｉｃｉｅｎｔＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎＲｅｅｎｅｒａｔｉｏｎＳｙｓｔｅｍｏｆＳｕａｒＢｅｅｔａｎｄＧｅｎｅｔｉｃＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｇｇ■口；．：．申請(qǐng)人乎斯樂＼學(xué)科口類：農(nóng)學(xué)。學(xué)科專業(yè)：作物遺傳育種ｒ躬■．－？、、．‘立？硏究方向：

2、作物種質(zhì)資源創(chuàng)新■非；指導(dǎo)教師：白晨研究員．ｎ；、．．—論女提交日期：二〇五年六月內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)聲明本人申明所呈交的學(xué)位論文是我本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包括其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包一括為獲得我?；蚱渌逃龣C(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書而使用過的材料，與我同工作的同志對(duì)本研究所做的任何寅獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。一申請(qǐng)學(xué)位論文與資料若有不實(shí)之處，本人承擔(dān)切相關(guān)責(zé)任。論文

3、作者簽名；巧樂日期；＞１Ｌ＾％內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保護(hù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)的規(guī)定，目Ｐ；研究生在攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。本人保證畢業(yè)離校后，發(fā)表論文或使用論文工作成果時(shí)署名單位為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)，且導(dǎo)師為通訊作者，通訊作者單位亦署名為內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)。學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電。子文檔，允許論文被查閱和借閱學(xué)?？晒紝W(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容（保密內(nèi)容除外），采用影印、縮印或其他手段保存論文。論

4、文作者簽名：場(chǎng)指導(dǎo)教師簽名：曰期：１盧仁ｆｔ乂摘要甜菜化一二ｔａ〇是世界上重要的糖料作物之，也是我國(guó)第大糖料作物２－３，在北方農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中占有重要地位。近年隨著甜菓機(jī)械化種植模式的推進(jìn)，甜菜生產(chǎn)中病蟲草害日漸凸顯。實(shí)踐證明，轉(zhuǎn)基因是解決作物草害和蟲害的最有效手段，因此，開展甜菜轉(zhuǎn)基因生物技術(shù)研巧勢(shì)，針對(duì)甜菜生產(chǎn)上主要蟲害及雜草為防治對(duì)象在必行，也是甜菜產(chǎn)業(yè)長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展的需求。目前，植物基因工程的遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)己基本一成形直未見報(bào)道，，但甜菜轉(zhuǎn)基因品種的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)甜菜轉(zhuǎn)基因品種未能產(chǎn)業(yè)化應(yīng)

5、用是由多種原因造成的一，其中甜菜很難建立起高效的遺傳轉(zhuǎn)化再生體系和未能找到個(gè)合適的離效的選傳轉(zhuǎn)化方法就是其中重要的兩個(gè)原因，本研巧通過對(duì)５種不同基因型甜菜的多種外植體進(jìn)行再生培養(yǎng)，研究分析影響甜菜外植體再生的因素，建立并優(yōu)化了甜菜植株再生體系對(duì)己構(gòu)建Ｂｔ基因ｃｒｌＡｃ甜菜表達(dá)載體ｐＳ陸ｔ：ｙ進(jìn)行了酶切鑒定，并通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法對(duì)甜菜進(jìn)行了遺傳轉(zhuǎn)化；研究了農(nóng)奸菌介導(dǎo)甜菜的不同轉(zhuǎn)化條件，建立甜菜轉(zhuǎn)基因體系為今后甜菜轉(zhuǎn)基因品種的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。，主要研究結(jié)果如下；１、本研究利用３０４０７、３０４２

6、７、３２４４９、３５２５０、４４３２１五種基因型不同的甜菜品系為材料，通過對(duì)五種材料外植體分化再生的組織培養(yǎng)分析研巧，篩選出高誘導(dǎo)率基因型材科１份（３５２５０）；Ｗ３５２５０作為材料，篩選出適用于此品系的最適誘導(dǎo)分化’＋ｍ＋Ｌ６－篩選培養(yǎng)基１種：ＭＳ０．５Ｌ＼ＡＡＬ５ｍＢＡ１Ｓ＋０．５ｍＬｇ／ｇ／；繼代培養(yǎng)基種Ｍｇ／＋－Ｓ＋ＯｍＭＮＭ１．Ｏｍ／Ｌ６ＢＡ生根培養(yǎng)基１種Ｍ１．。ｇ；ｇ／ＬＮ２、酶切鑒定含Ｂｔ基因ｃｒｙｌＡｃ的甜菜表達(dá)載體ｐＳ陸ｔ，證明了該載體的正確性。

7、，優(yōu)化了農(nóng)桿菌侵染甜菜的最佳條件為采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法對(duì)甜菜進(jìn)行了遺傳轉(zhuǎn)化：＝－２５ｍ一０００．５０．７最適侵染時(shí)間ｉｎ經(jīng)抗性篩選、誘導(dǎo)分化，得到，？？，：批抗性芽多２４次繼代培養(yǎng)后，最終獲得株抗性組培苗。３、利用ＰＣＲ護(hù)増技術(shù)檢測(cè)抗性植株，檢測(cè)出５株含Ｂｔ基因ｃｒｙｌＡｃ的陽(yáng)性組培苗。關(guān)鍵詞：甜菜；轉(zhuǎn)基因；遺傳轉(zhuǎn)化；Ｂｔ基因Ｔｈｅ民ｅｓｅａｒｃｈｏｎＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆＥｆｆｉｃｉｅｎｔＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎＲｅｅｎｅｒａｔｉｏｎＳｙｓｔｅｍｏｆＳｕａｒＢｅｅ

8、ｔａｎｄＧｅｎｅｔｉｃＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｇｇＡｂｓｔｒａｃｔＳｕａｒｂｅｅｔｉｓｏｎｅｏｆｉｍｐｏｒｔａｎｔｓｕｇａｒｃｒｏｐｓｉｎｔｈｅｗｏｒｌｄｗｈｉｃｈｒｏｖｉｄｅｓａｒｏｘｉｍａｔｅｌｇ：ｐｐｐｙ－Ｔｏｎｅｏｆ：Ｏ打ｅｔｈｉｒ