血管生成素-2（angiopoietin-2）調(diào)節(jié)小鼠下肢缺血血管生成的研究

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1、中圖分類號(hào)：R96碩士學(xué)位論文血管生成素-2(Angiopoietin_2)調(diào)節(jié)小鼠下肢缺血血管生成的研究院（系)、所藥學(xué)…院研究生姓名閆鍇學(xué)科、專業(yè)藥理學(xué)導(dǎo)師姓名劍波主授二〇—五年四月四川醫(yī)科大學(xué)畢業(yè)碩士研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明及發(fā)表承諾書本人聲明所呈交的學(xué)位論文（已整理成發(fā)表形式）是我個(gè)人在四川醫(yī)科大學(xué)導(dǎo)師指導(dǎo)下，由導(dǎo)師及四川醫(yī)科大學(xué)提供一切科研條件的情況下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果。論文中除了特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，不包含其他人或其它機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過(guò)的研究成果。其他同志對(duì)本研究的啟發(fā)和所做的貢獻(xiàn)均已在論文中作了明確的說(shuō)明并表示了謝意。在即將

2、畢業(yè)離校之際，本人鄭重承諾：該論文將以四川醫(yī)科大學(xué)的名義發(fā)表（論文作者為研究生及導(dǎo)師，作者所在單位為四川醫(yī)科大學(xué))，并在發(fā)表后立即將發(fā)表論文原件（期刊）寄與導(dǎo)師1冊(cè)。四川醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本人完全了解四川醫(yī)科大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，g卩：四川醫(yī)科大學(xué)有權(quán)保留并向有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交本人學(xué)位論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱，允許有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)以電子出版物形式出版發(fā)行，并對(duì)外進(jìn)行全文內(nèi)容服務(wù)。本人授權(quán)四川醫(yī)科大學(xué)可以將本人學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，進(jìn)行數(shù)字化處理匯編、通過(guò)網(wǎng)絡(luò)或其它途徑進(jìn)行交流傳播，可以公布學(xué)位

3、論文的全部或部分內(nèi)容，可以采用影印、縮印、掃描或其他復(fù)制手段保存和匯編學(xué)位論文，即四川醫(yī)科大學(xué)具有本人學(xué)位論文的數(shù)字化制品復(fù)制權(quán)、信息網(wǎng)絡(luò)傳播權(quán)和匯編權(quán)。同時(shí)授權(quán)將本學(xué)位論文收錄到《中國(guó)學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù)》和《萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)》，并通過(guò)網(wǎng)絡(luò)向社會(huì)公眾提供信息服務(wù)。保密口，在..年解密后適用本授權(quán)書。本人提交的學(xué)位論文屬不保密口學(xué)位il日期地址及郵政編碼：日期純一年廠奸曰聯(lián)系電話：聯(lián)系電話:電子信箱：四川醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文目錄1血管生成素‐2（Angiopoietin‐2）調(diào)節(jié)小鼠下肢缺血血管生成的研究…………………………………………………………11.1中文摘要…

4、……………………………………………………11.2英文摘要………………………………………………………41.3前言……………………………………………………………61.4材料與方法……………………………………………………91.5結(jié)果……………………………………………………………291.6討論……………………………………………………………381.7結(jié)論……………………………………………………………411.8參考文獻(xiàn)………………………………………………………431.9英漢縮略詞對(duì)照表……………………………………………472致謝………………………………………………………

5、……483腫瘤血管病變與血管正常化研究進(jìn)展（綜述）……………49四川醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文血管生成素-2(Angiopoietin-2)調(diào)節(jié)小鼠下肢缺血血管生成的研究摘要目的：研究血管生成素-2（Angiopoietin-2）在下肢缺血模型的實(shí)驗(yàn)小鼠中，對(duì)缺血部位血管生成的作用機(jī)制。方法：1.建立C57/BL6小鼠下肢缺血模型及腹腔給藥：麻醉實(shí)驗(yàn)小鼠后，經(jīng)股深動(dòng)脈下緣和腘動(dòng)脈上緣結(jié)扎實(shí)驗(yàn)小鼠左側(cè)股動(dòng)脈干支，并且離斷雙結(jié)之間股動(dòng)脈干支，縫合皮膚，復(fù)溫后，應(yīng)用激光多普勒儀記錄實(shí)驗(yàn)小鼠雙下肢血流灌注情況，在結(jié)扎前（pre），1d，3d，5d，8d，各記錄一次血流情況

6、。計(jì)算左腿與右腿的血流比值，即結(jié)扎側(cè)與非結(jié)扎側(cè)的比值。將實(shí)驗(yàn)小鼠分為兩組，對(duì)照組和給藥組，各組為3只實(shí)驗(yàn)小鼠，對(duì)照組經(jīng)腹腔注射給予等量的生理鹽水，給藥組腹腔注射重組人血管生成素-2（recombination-human-Ang-2），在結(jié)扎日（1d），3d，5d，各給藥一次。在第8d處死實(shí)驗(yàn)小鼠，經(jīng)下腔靜脈取抗凝血，離心，取上清液；取雙側(cè)下肢肌肉，包括內(nèi)收肌和腓腸肌。2.ELISA法檢測(cè)血清中rh-Ang-2的含量：取實(shí)驗(yàn)小鼠離心后的血清，按ELISA試劑盒操作說(shuō)明檢測(cè)血清中rh-Ang-2的含量。3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析待測(cè)組織樣品中目的基因的表達(dá)：用

7、液氮研磨實(shí)驗(yàn)小鼠肌肉組織，用trizol裂解研碎的組織，傳統(tǒng)法抽提總RNA，瓊脂糖凝膠電泳分析所提RNA質(zhì)量，逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA，實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀分析目的基因的表達(dá)，包括Ang-1，Ang-2，PDGF-BB，PDGFR-β，VEGF-A,VEGF-C。1四川醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文4.應(yīng)用免疫熒光法分析小鼠肌肉血管生成情況：取小鼠下肢肌肉，以4%多聚甲醛固定，送病理科以石蠟包埋，并制成病理切片，用anti-α-SMA做免疫熒光分析，靶向標(biāo)記血管周細(xì)胞，計(jì)算新生血管的平均管徑。5.體外血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)研究Ang-2對(duì)PDGF-BB信號(hào)通路的影響：用培養(yǎng)皿培

8、養(yǎng)人臍靜脈血管平滑肌細(xì)胞（HUVSMC），設(shè)置4各組