資源描述：
《畢業(yè)設(shè)計（論文）-嶧城主栽石榴品種ISSR分子標記引物篩選》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學術(shù)論文-天天文庫。
1、學士學位論文嶧城主栽石榴品種ISSR分子標記引物篩選姓名學號：1指導(dǎo)教師：系別：專業(yè)：完成日期：學院學士學位論文作者聲明本人聲明：本人呈交的學位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下取得的研究成果。對前人及其他人員對本文的啟發(fā)和貢獻已在論文中作出了明確的聲明,并表示了謝意。論文中除了特別加以標注和致謝的地方外,不包含其他人和其它機構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或者撰寫過的研究成果。本人同意學校根據(jù)《中華人民共和國學位條例暫行實施辦法》等有關(guān)規(guī)定保留本人學位論文并向國家有關(guān)部門或資料庫送交論文或者電子版,允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)棗莊學院可以將本人學位論文的全部或者
2、部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索,可以采用影印、縮印或者其它復(fù)制手段和匯編學位論文（保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定）。作者簽名：日期：年月日摘要本研究以嶧城萬畝石榴園的石榴幼葉為材料,采用CTAB法提取石榴基因組DNA。利用電泳和紫外分光光度法分析其完整性、純度及濃度.利用ISSR標記技術(shù)對42個石榴品種遺傳關(guān)系進行了分析。篩選出多態(tài)性高的UBC811ISSR引物，共擴增出29條DNA條帶，其中多態(tài)性帶7條，多態(tài)性百分率為21.12%，特異條帶1條?！娟P(guān)鍵詞】石榴；ISSR；種質(zhì)資源；遺傳多樣性；親緣關(guān)系A(chǔ)bstract目錄第1章引言1
3、1.1ISSSR分子標記11.2本研究的目的與意義4第2章材料與儀器62.1材料62.2試劑72.3儀器設(shè)備8第3章實驗方法93.1CTAB法提取DNA93.2DNA濃度和純度測定方法103.2.1DNA質(zhì)量檢驗方法103.2.2DNA的濃度和純度測定方法103.3PCR擴增反應(yīng)103.4電泳與成像113.5數(shù)據(jù)獲取與分析11第4章結(jié)果與分析124.1石榴基因組DNA?的提取結(jié)果分析124.1.1DNA完整性分析及兩種提取方法的比較124.1.2DNA純度和濃度測定結(jié)果134.2ISSR擴增結(jié)果第5章結(jié)論與討論185.1討論185.
4、2結(jié)論18參考文獻19致謝22石榴葉中DNA提取和RAPD體系中引物的篩選第1章引言石榴（PunicagranatumL．）為石榴科石榴屬落葉灌木或小喬木，又名若榴、丹若、天漿、金罌、狂花等。石榴原產(chǎn)伊朗、阿富汗等中亞一帶，從西漢張騫出使西域?qū)⑼苛职彩褚胛覈?，至今已有超過2000年的栽培歷史[1]，經(jīng)長期天然雜交及基因突變，以及采用實生、分株、嫁接等多種繁殖方法，使其產(chǎn)生了復(fù)雜多樣的品種和類型，據(jù)不完全統(tǒng)計，我國現(xiàn)有石榴品種資源約200多個，分布南北各地20多個省區(qū)。各地研究者對石榴種質(zhì)資源進行調(diào)查研究時，大多都局限于某一地區(qū)，
5、各自從不同的角度對石榴進行了種下分類，導(dǎo)致品種混雜、同種異名、同名異種的現(xiàn)象出現(xiàn)[2]，長期以來，給準確進行品種資源鑒定和利用帶來了困難。我們究旨在利用ISSR標記技術(shù)，對石榴的遺傳多樣性與親緣關(guān)系進行分析，以期為石榴種下分類提供分子依據(jù)，為更有效地保護石榴資源及選育新品種提供遺傳信息。1.1ISSR分子標記ISSR(inter－simplesequencesrepeats)即簡單序列重復(fù)區(qū)間標記法，是由Zietkiewicz等1994［7］年提出的一種DNA標記技術(shù)，該技術(shù)檢測的是2個相近SSR之間的一段短DNA序列上的多態(tài)性．在
6、SSR的3’端或5’端加錨1～4個嘌呤或嘧啶堿基，并以此作為引物，通常為16～18個堿基序列，對兩側(cè)具有反向排列的SSR之間的一段DNA序列進行擴增，然后進行電泳、染色，根據(jù)譜帶的有無及相對位置，來分析不同樣品間ISSR標記的多態(tài)性．由于ISSR引物堿基數(shù)量多，退火溫度高，可重復(fù)性好，非特異性擴增少，真核生物富含SSR序列且變異最快，故ISSR擴增出的條帶多且多態(tài)性要比RAPD，SSR，RFLP等更加豐富．ISSR為顯性標記，符合孟德爾遺傳規(guī)律，并且無需克隆、制備探針、分子雜交等工作，具有簡便迅速、高效、實驗成本低等優(yōu)點．因此，IS
7、SR技術(shù)現(xiàn)已在遺傳多樣性［8］、親緣關(guān)系分析［9］、遺傳作圖［10］、品種鑒定［11］、進化［12］等研究方面被廣泛應(yīng)用．ISSR被認為是研究種群遺傳多樣性的一種非常有效的分子標記手段［13－17］19石榴葉中DNA提取和RAPD體系中引物的篩選1.2本研究的目的與意義棗莊是我國的主要石榴產(chǎn)區(qū)之一,栽培面積達1.6萬公頃，具有48多個種，被譽為“冠世榴園”。近年廣泛開展了種質(zhì)資源的調(diào)查、收集、保存和良種選育工作,并在此基礎(chǔ)上，對嶧城石榴的種、變種、品種的劃分、評價、利用等問題進行了分析研究[6]。但由于長期的引種和選擇,已很難從植物
8、的外部形態(tài)上來確定品種的來源和品種間的親緣關(guān)系，存在著同名異種或同種異名的問題[8]，這給準確進行品種資源鑒定和利用帶來了困難。近年來，ISSR技術(shù)在石榴品種鑒定中得到了廣泛的應(yīng)用，但該技術(shù)對反應(yīng)條件要求十分嚴格,不同材料需要的引物不
