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1、分類號(hào):密級(jí):學(xué)校代碼:10165學(xué)號(hào):201011182逢掌童可筢大學(xué)碩士學(xué)位論文非生物脅迫下SICMO基因在遼寧堿蓬和pC-CMO轉(zhuǎn)基因煙草中表達(dá)特性分析作者姓名:學(xué)科、專業(yè):研究方向:導(dǎo)師姓名:2013年05月一一植一嘲嗖學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明一一一本人承諾:所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下所取得的研究成果。論文中除特別加以標(biāo)注和致謝的地方外,不包含他人和其他機(jī)構(gòu)已經(jīng)撰寫或發(fā)表過的研究成果,其他同志的研究成果對(duì)本人的啟示和所提供的幫助,均已在論文中做了明確的聲明并表示謝意。學(xué)位論文作者簽名:學(xué)位論文版權(quán)的使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了
2、解遼寧師范大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,及學(xué)校有權(quán)保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交復(fù)印件或磁盤,允許論文被查閱和借閱。本文授權(quán)遼寧師范大學(xué),可以將學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)并進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文,并且本人電子文檔的內(nèi)容和紙質(zhì)論文的內(nèi)容相一致。保密的學(xué)位論文在解密后使用本授權(quán)書。學(xué)位論文作者簽名:指導(dǎo)教師簽名:簽名日期:年月日遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文摘要甜菜堿是生物體內(nèi)一類小分子滲透調(diào)節(jié)物質(zhì),在植物受到非生物脅迫時(shí)起著重要的作用。膽堿單加氧酶(cholinemonooxygenase,
3、CMO)是植物甜菜堿合成過程中的關(guān)鍵酶,了解CMO基因在植物中的表達(dá)特性對(duì)研究植物的抗逆性有著重要的作用。本研究使用半定量RT.PCR和熒光實(shí)時(shí)定量PCR的方法,分析SICMO基因及對(duì)比在鹽生植物遼寧堿蓬(SuaedaliaotungensisK.)和pC.CMO(S1CM0啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)。舛洲D(zhuǎn)基因)轉(zhuǎn)基因煙草中的表達(dá)特性,主要結(jié)果及結(jié)論如下:非脅迫條件下,研∞基因在遼寧堿蓬葉、莖、根中均有表達(dá),在莖、葉中的表達(dá)量遠(yuǎn)高于其在根中的表達(dá)。鹽、干旱、低溫、ABA脅迫條件下,SICMO基因在遼寧堿蓬葉、莖、根中的表達(dá)量基本呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),
4、脅迫解除后,其表達(dá)量基本回到未處理時(shí)水平。研C坳基因在遼寧堿蓬葉、莖、根中的表達(dá)均響應(yīng)鹽、干旱、低溫脅迫。同時(shí),研∞基因在遼寧堿蓬葉、莖、根中的表達(dá)均受ABA誘導(dǎo),田C啪基因的表達(dá)是ABA依賴的。非脅迫條件下,.研CMp基因在pC.CMO轉(zhuǎn)基因煙草葉、莖、根中均有表達(dá),在葉、莖中的表達(dá)量高于其在根中的表達(dá)。鹽、干旱、低溫脅迫條件下,.田C坳基因在pC.CMO轉(zhuǎn)基因煙草葉、莖、根中的表達(dá)量基本呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì),脅迫解除后,其表達(dá)量基本回到未處理時(shí)水平。表明pC啟動(dòng)子含有鹽、冷、干旱脅迫誘導(dǎo)啟動(dòng)元件,是誘導(dǎo)啟動(dòng)子。ABA處理后,。卯徹基
5、因在pC.CMO轉(zhuǎn)煙草葉、莖、根中的表達(dá)量基本呈現(xiàn)降低的趨勢(shì),解除ABA脅迫后,其表達(dá)量未回到非脅迫時(shí)水平。。研伽基因在pC.CMO轉(zhuǎn)基因煙草葉、莖、根中的表達(dá)不受ABA誘導(dǎo),表明pC啟動(dòng)子缺少ABA誘導(dǎo)元件,與其在遼寧堿蓬葉、莖、根中的表達(dá)方式不同。S1CMO啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)的田CMD基因在pC.CMO轉(zhuǎn)基因煙草中的表達(dá)特性與其在遼寧堿蓬中的表達(dá)特性大體相同,SICMO啟動(dòng)子可用于提高作物抗逆性的基因工程育種中。關(guān)鍵詞:非生物脅迫:.熨CMD基因;遼寧堿蓬;pC-CMO轉(zhuǎn)基因煙草;誘導(dǎo)型啟動(dòng)子非生物脅迫下SICMO基因在遼寧堿蓬和pC-CMO
6、轉(zhuǎn)基因煙草中表達(dá)特性分析ExpressionpatternsofSICMOinthehalophyteSuaedaliaotungensisK.a(chǎn)ndpC-CMOtransgenictobaccounderabioticstressesAbstractGlycinebetaineisanosmoticumplayingamajorroleinplantresistancetoosmoticstress.Becausecholinemonooxygenase(CMO)isthekeyenzymeinglycinebetainesynthes
7、is,allunderstandingofCMOexpressionpatternsinplantsisimportant.Semi-·quantitativereversetranscription—·PCRandquantitativereal-timePCRassaysrevealedthattheexpressionofSICMOinleaves,stemsandrootsofSliaotungensisandpC—CMOtransgenictobaccos.&liaotungensis,SICMOwasexpressedstro
8、nglyinstems,weaklyinleaves,andmarginallyinrootsundernormalconditions.Undersalt,lowtemperature,an