間歇出酶對(duì)里氏木霉產(chǎn)纖維素酶的影響

間歇出酶對(duì)里氏木霉產(chǎn)纖維素酶的影響

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1、第40卷第1期南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)Vol.40,No.12016年1月JournalofNanjingForestryUniversity(NaturalSciencesEdition)Jan.,2016doi:10.3969/j.issn.1000-2006.2016.01.014間歇出酶對(duì)里氏木霉產(chǎn)纖維素酶的影響?白合超,蔣露,王步成,勇強(qiáng),余世袁(南京林業(yè)大學(xué)林木遺傳與生物技術(shù)省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,江蘇南京210037)摘要:在分批補(bǔ)料的基礎(chǔ)上,采用間歇出酶的方法,對(duì)里氏木霉產(chǎn)纖維素酶進(jìn)行了研究。結(jié)果表明:分批補(bǔ)料過(guò)程中最佳的補(bǔ)料速度為5.5g/(L·d),在此條件下

2、產(chǎn)酶第8天濾紙酶活力和β-葡萄糖苷酶活力達(dá)到14.40U/mL和1.59U/mL。在分批補(bǔ)料的基礎(chǔ)上進(jìn)行間歇出酶,與對(duì)照相比,第4、6、8天出酶模式(模式1)時(shí),總濾紙酶活力提高18.14%;第4、7天出酶模式(模式2)時(shí),總濾紙酶活力提高17.75%;第5、8天出酶模式(模式3)時(shí),總濾紙酶活力提高27.35%。研究表明,通過(guò)間歇出酶可以有效提高纖維素酶總濾紙酶的活力。關(guān)鍵詞:纖維素酶;里氏木霉;間歇出酶;濾紙酶活;分批補(bǔ)料中圖分類號(hào):TQ351;Q814文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A文章編號(hào):1000-2006(2016)01-0087-05Effectofperiodicharvestofenzy

3、meoncellulaseproductionbyTrichodermareesei?BAIHechao,JIANGLu,WANGBucheng,YONGQiang,YUShiyuan(KeyLaboratoryofForestGenetics&Biotechnology,MinistryofEducation,NanjingForestryUniversity,Nanjing210037,China)Abstract:Thispaperinvestigatedfed?batchandperiodicharvestofenzymeforcellulaseproductionbyTrich

4、odermaree?sei.Theresultsshowedthatthebestfeedingratewas5.5g/(L·d)celluloseperday,andthefilterpaperactivityandβ-glucosidasewere14.40U/mLand1.59U/mLafter8daysofcultivation.Basedonfed?batch,whenharvestingenzymeatththththththe4,6,8day,thetotalfilterpaperactivityimprovedby18.14%.Whenharvestingatthe4,7

5、day,thetotalfil?ththterpaperactivityimprovedby17.75%.Whenharvestingatthe5,8day,thetotalfilterpaperactivityimprovedby27?35%.Thispaperconcludedthatperiodicharvestofenzymecouldimprovethetotalfilterpaperactivityefficiently.Keywords:cellulase;Trichodermareesei;periodicharvestofenzyme;filterpaperenzyme

6、activity;fed?batch木質(zhì)纖維原料是世界上最豐富的可再生碳資過(guò)間歇添加底物從而達(dá)到較高底物濃度,降低了傳[6]源,如何高效利用這些豐富又廉價(jià)的可再生資源制質(zhì)阻力和降解物的抑制。機(jī)械剪切力是導(dǎo)致酶[7]備新型能源、化學(xué)品和材料等,引起了國(guó)內(nèi)外有關(guān)失活的主要原因之一,分批補(bǔ)料進(jìn)行產(chǎn)酶的發(fā)[1]學(xué)者的高度關(guān)注。利用纖維素酶水解植物纖維酵周期較長(zhǎng),長(zhǎng)時(shí)間的攪拌會(huì)導(dǎo)致酶蛋白的損失。原料成單糖,繼而發(fā)酵成酒精或單細(xì)胞蛋白,是因此筆者在實(shí)驗(yàn)室搖瓶發(fā)酵研究中,添加固體碳源[2]合理利用可再生生物質(zhì)資源的一條有效途徑。進(jìn)行分批發(fā)酵,間歇取出部分酶液后補(bǔ)加同體積的纖維素糖化是纖維原料生物煉制燃

7、料乙醇和化學(xué)液體,試圖達(dá)到提高纖維素酶生產(chǎn)的目的。品的關(guān)鍵,而纖維素糖化成本高也成為制約纖維素1材料與方法生物煉制技術(shù)商業(yè)化應(yīng)用的瓶頸之一,主要是由于[3]纖維素酶活力低、酶系結(jié)構(gòu)不合理。提高纖維1.1菌種素酶產(chǎn)率主要包括:合適的菌株、適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)培養(yǎng)里氏木霉(Trichodermareesei)RutC-30,纖維[4]基和發(fā)酵條件。盡管分批補(bǔ)料技術(shù)在產(chǎn)酶過(guò)程素酶生產(chǎn)菌株,于4℃保存在PDA(土豆葡萄糖瓊中能提供較高的酶產(chǎn)量,但是間

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