牛傳染性鼻氣管炎阻斷ELISA抗體檢測方法的建立與應(yīng)用

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1、學(xué)校名稱：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)分類號：學(xué)校代碼：10504密級：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文牛傳染性鼻氣管炎阻斷ELISA抗體檢測方法的建立與應(yīng)用DevelopmentandApplicationofBlockingElisaforDetectionofAntibodiesAgainstInfectiousBovineRhinotracheitisVirus研究生：王單晶學(xué)號：2011302120028指導(dǎo)教師：劉正飛教授董曉輝學(xué)位類型：獸醫(yī)碩士領(lǐng)域：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院動物醫(yī)學(xué)院中國武漢CollegeofAnimalHusbandryCollegeofAnimalVeterinary

2、MedicineofHuazhongagriculturaluniversity，WuhanChina華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明及使用授權(quán)書學(xué)位論文是否保密否如需保密，解密時間年月日?獨創(chuàng)性聲明l炒燃燮矬料本人聲明所呈交的論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成；果。盡我所知，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā){表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得華中農(nóng)業(yè)大學(xué)或其他教育機(jī)構(gòu)的學(xué)位或證書l而使用過的材料，指導(dǎo)教師對此進(jìn)行了審定。與我一同Z-作的同志對本研究所做的任}何貢獻(xiàn)均已在論文中做了明確的說明，并表示了謝意．研究生簽名：王單晶時間：Ⅵ

3、l弓年占月f弓日學(xué)位論文使用授權(quán)書本人完全了解華中農(nóng)業(yè)大學(xué)關(guān)于保存、使用學(xué)位論文的規(guī)定，即學(xué)生必須按照學(xué)校要求提交學(xué)位論文的印刷本和電子版本；學(xué)校有權(quán)保存提交論文的印刷版和電子版，并提供目錄檢索和閱覽服務(wù)，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存、匯編學(xué)位論文。本人同意華中農(nóng)業(yè)大學(xué)可以用不同方式在不同媒體上發(fā)表、傳播學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容，為存在館際合作關(guān)系的兄弟高校用戶提供文獻(xiàn)傳遞和交換服務(wù)，同時本人保留在其他媒體發(fā)表論文的權(quán)力。注；請將本表直接裝訂在學(xué)位論文的扉頁和目錄之間牛傳染性鼻氣管炎阻斷ELISA抗體檢測方法的建立與應(yīng)用IIIIIIIII目錄摘要???????????

4、??????????????????????．．iAbstract??????????????????????????????????????????iii縮略語表(Abbreviation)????????????????????????。V第一章前言??????????????????????????????11．1牛傳染性鼻氣管炎的病原學(xué)????????????????????l1．2牛傳染性鼻氣管炎的流行病學(xué)???????????????????21．3牛傳染性鼻氣管炎的臨床癥狀???????????????????21．4牛傳染性鼻氣管炎的診斷????????????

5、?????????31．5牛傳染性鼻氣管炎的防治?????????????????????41．6研究目的及意義?????????????????????????4第二章材料與方法???????????????????????????62．1實驗材料????????????????????????????62．1．1毒株、細(xì)胞、抗體及試劑盒?????????????????．62．1．2實驗儀器及耗材??????????????????????．62．13主要的實驗試劑及配制???????????????????．72．1．4實驗動物??????????????????????

6、???．92．2實驗方法????????????????????????????92．2．1病毒粒子的滅活??????????????????????．92．2．2小鼠免疫?????????????????????????．102．23免疫小鼠血清效價的測定??????????????????lO2．2．4細(xì)胞融合?????????????????????????112．2．5陽性融合細(xì)胞的篩選、克隆及建株??????????????122．2．6腹水的制備及純化?????????????????????132．2．7單克隆抗體生物學(xué)特性的鑒定????????????????1

7、42．2．8辣根過氧化物酶標(biāo)記單克隆抗體???????????????172．2．9IDEXX傳染性牛鼻氣管炎病毒gE抗體檢測試劑盒???????l82．2．10IBR阻斷ELISA抗體檢測方法的建立????????????．192．2．11IBR阻斷ELISA抗體檢測方法的臨床應(yīng)用??????????．2l第三章結(jié)果與分析??????????????????????????．223．1病毒粒子的滅活????????????????????????。223．2免疫小鼠血清效價的測定?????