高速逆流色譜

高速逆流色譜

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1、高速逆流色譜(high-speedcountercurrentchromatography,HSCCC)是20世紀(jì)80年代發(fā)展起來的一種連續(xù)高效的液—液分配色譜分離技術(shù),它不用任何固態(tài)的支撐物或載體。它利用兩相溶劑體系在高速旋轉(zhuǎn)的螺旋管內(nèi)建立起一種特殊的單向性流體動(dòng)力學(xué)平衡,當(dāng)其中一相作為固定相,另一相作為流動(dòng)相,在連續(xù)洗脫的過程中能保留大量固定相。由于不需要固體支撐體,物質(zhì)的分離依據(jù)其在兩相中分配系數(shù)的不同而實(shí)現(xiàn),因而避免了因不可逆吸附而引起的樣品損失、失活、變性等,不僅使樣品能夠全部回收,回收的樣品更能反映

2、其本來的特性,特別適合于天然生物活性成分的分離。而且由于被分離物質(zhì)與液態(tài)固定相之間能夠充分接觸,使得樣品的制備量大大提高,是一種理想的制備分離手段。它相對(duì)于傳統(tǒng)的固—液柱色譜技術(shù),具有適用范圍廣、操作靈活、高效、快速、制備量大、費(fèi)用低等優(yōu)點(diǎn)。目前HSCCC技術(shù)正在發(fā)展成為一種備受關(guān)注的新型分離純化技術(shù),已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥、天然產(chǎn)物、食品和化妝品等領(lǐng)域,特別在天然產(chǎn)物行業(yè)中已被認(rèn)為是一種有效的新型分離技術(shù);適合于中小分子類物質(zhì)的分離純化。我國(guó)是繼美國(guó)、日本之后最早開展逆流色譜應(yīng)用的國(guó)家,俄羅斯、法國(guó)、英國(guó)、瑞

3、士等國(guó)也都開展了此項(xiàng)研究。美國(guó)FDA及世界衛(wèi)生組織(WHO)都引用此項(xiàng)技術(shù)作為抗生素成分的分離檢定,90年代以來,高速逆流色譜被廣泛地應(yīng)用于天然藥物成分的分離制備和分析檢定中。逆流色譜原理:1. 逆流色譜是20世紀(jì)50年代源于多極萃取技術(shù)(非連續(xù)性)但是多極萃取設(shè)備龐大復(fù)雜、易碎、溶劑體系容易乳化,溶劑耗量大,分離時(shí)間長(zhǎng)。2. 20世紀(jì)70年代,出現(xiàn)了液滴逆流色譜(DCCC)特點(diǎn):(1)流體靜力學(xué)原理(Hydrostaticequilibriumsystem,HSES)  ?。?)分離時(shí)間過長(zhǎng)、連接處容易出現(xiàn)滲

4、漏等3.20世紀(jì)70年代出現(xiàn)了離心分配色譜儀(Centrifugalpartitionchromatography,CPC)特點(diǎn):(1)基于流體靜力學(xué)原理(Hydrostaticequilibriumsystem,HSES),利用公轉(zhuǎn)產(chǎn)生的單一力場(chǎng)  ?。?)連接處較多而且容易出現(xiàn)滲漏,清洗維護(hù)復(fù)雜4.20世紀(jì)80年開始出現(xiàn)了現(xiàn)在的高速逆流色譜,可稱為最先進(jìn)的逆流色譜特點(diǎn):(1)基于流體動(dòng)力學(xué)原理(Hydrodynamicequilibriumsystem,HDES) (2)通過公轉(zhuǎn)、自轉(zhuǎn)(同步行星式運(yùn)動(dòng))產(chǎn)生

5、的二維力場(chǎng),保留兩相中的其中一相作為固定相(3)通過高速旋轉(zhuǎn)提高兩相溶劑的萃取頻率,1000rpm旋轉(zhuǎn)時(shí)可達(dá)到17次/s頻率的萃取過程。5.HSCCC分離流程圖應(yīng)用領(lǐng)域:(1)天然產(chǎn)物已知有效成分的分離純化(2)化學(xué)合成物質(zhì)的分離純化(3)中藥一類、五類新藥的開發(fā)(4)中藥指紋圖譜和質(zhì)量控制研究(5)抗生素的分離純化(6)天然產(chǎn)物未知有效成分的分離純化(新化合物開發(fā))(7)海洋生物活性成分的分離純化(8)放射性同位素分離(9)多肽和蛋白質(zhì)等生物大分子分離以及手性分離等儀器特點(diǎn)TBE高速逆流色譜特點(diǎn)運(yùn)轉(zhuǎn)穩(wěn)定:多分

6、離柱國(guó)家專利技術(shù),采用了三個(gè)螺旋柱串聯(lián)連接,使在高速轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)保持最佳平衡,并有效保證設(shè)備穩(wěn)定性,使運(yùn)行噪音更小。不會(huì)出現(xiàn)在高速旋轉(zhuǎn)的情況下由于儀器本身的不穩(wěn)定而對(duì)分離體系產(chǎn)生影響。操作便捷:固定相、流動(dòng)相均為液體,有廣泛的液-液分配系統(tǒng)可供選擇,體系更換方便、快捷;具無級(jí)變頻調(diào)速功能,可輕松完成正反向轉(zhuǎn)速調(diào)整。高分離率:能把天然產(chǎn)物有效成分分離提取到99%純度。高回收率:不存在固態(tài)載體所造成的吸附損耗、樣品變性等問題,理論上樣品回收率非常高。成本降低:不用柱填料、不用更換分離柱,使用常規(guī)試劑,儀器運(yùn)行和維護(hù)成本低

7、。精確控溫:配備恒溫控制裝置專利技術(shù),具有溫控功能,精確控制分離過程的溫度,有助于摸索實(shí)驗(yàn)條件,提高實(shí)驗(yàn)重復(fù)性;樣品分離不受環(huán)境溫度的影響,可通過調(diào)節(jié)溫度改善樣品的分離度,拓寬溶劑體系的選擇范圍。1三分離柱設(shè)計(jì)采用專利的三分離柱系統(tǒng),更容易達(dá)到系統(tǒng)平衡,不會(huì)在高速旋轉(zhuǎn)的情況下由于儀器本身的不穩(wěn)定而對(duì)分離體系產(chǎn)生影響,而導(dǎo)致對(duì)樣品分離度的降低.系統(tǒng)噪音小。2雙六通閥設(shè)計(jì) 一個(gè)是進(jìn)樣六通閥,實(shí)現(xiàn)一個(gè)人獨(dú)立操作進(jìn)樣的全過程;另一個(gè)為進(jìn)出口切換六通閥,無需停機(jī)就能實(shí)現(xiàn)正反轉(zhuǎn)的切換,實(shí)現(xiàn)正相和反相的洗脫,同時(shí)該設(shè)計(jì)可以幫

8、助排除系統(tǒng)管路中的氣泡。3溫控系統(tǒng)采用專利的溫控系統(tǒng),樣品分離不受環(huán)境溫度的影響,可通過調(diào)節(jié)溫度改善樣品的分離度,拓寬溶劑體系的選擇范圍。4大β值設(shè)計(jì)采用獨(dú)特的設(shè)計(jì),設(shè)計(jì)β值接近理論最大值。5變頻調(diào)速調(diào)節(jié)速度快速精確,轉(zhuǎn)速誤差范圍小于1%。6結(jié)構(gòu)緊湊統(tǒng)一、操作便捷機(jī)電系統(tǒng)和分離柱系統(tǒng)統(tǒng)一在主機(jī)里面,面板設(shè)計(jì)操作便捷。質(zhì)量?jī)?yōu)勢(shì)——公司是國(guó)內(nèi)唯一一家大規(guī)模生產(chǎn)高速逆流色譜的廠家,有著專業(yè)研

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