高速逆流色譜.PPT

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1、高速逆流色譜High-SpeedCounter-CurrentChromatography一.發(fā)展史1941年級(jí)聯(lián)鏈型萃取裝置1944年非連續(xù)式逆流分溶裝置CCD1960年高效連續(xù)混合分層裝置缺點(diǎn)設(shè)備龐大復(fù)雜溶劑易乳化溶劑耗量大分離樣品有局限性70年代YoichiroIto互不相溶的兩相溶劑螺旋形的小孔徑管子—分段割據(jù)——兩溶劑相之間的逆向?qū)α魈攸c(diǎn)：不存在固態(tài)載體樣品處理量大采用較廣泛的溶劑系統(tǒng)二.逆流分溶CCD液-液分配原理：溶質(zhì)分配系數(shù)在互相飽和的兩相溶劑中為常數(shù)CⅠ上相CⅡ下相經(jīng)8次操作后，各試管中溶質(zhì)分配結(jié)果如圖：A:K=1,B:K=3,C:

2、K=0.33三.螺旋管逆流色譜技術(shù)原理螺旋管逆流色譜的基礎(chǔ)是螺旋管內(nèi)溶劑相的特殊分布狀態(tài)和特征1.流體靜力平衡體系HSES（Hydrostaticsequilibriumsystem）每個(gè)分配單元保留了約50%固定相。流動(dòng)的移動(dòng)相造成了二相的不斷混合二相間分配2.流體動(dòng)力平衡體系HDES（Hydrodynamicsequilibriumsystem）與HSES相比，其差別是螺旋管有一自轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)兩種基本逆流色譜體系比較項(xiàng)目HSESHDES螺旋管運(yùn)動(dòng)靜止繞自身軸線運(yùn)動(dòng)功能的對(duì)稱性對(duì)稱不對(duì)稱移動(dòng)相洗脫方向從任一端引入只能從引入端分配效率較低較高固定相保留值接

3、近50%轉(zhuǎn)速、兩相界面張力有關(guān)兩相界面面積較小較大兩相混合作用緩和強(qiáng)烈有效管柱空間50%100%四.高速逆流色譜HSCCC利用單向性流體動(dòng)力平衡實(shí)現(xiàn)移動(dòng)相高速時(shí)穩(wěn)定的固定相保留（一）單向性流體動(dòng)力平衡逆流色譜在基本HDES體系中，移動(dòng)相流速↑，固定相的流失↑，分離組分峰形的分辨率↓。螺旋管的轉(zhuǎn)速加快達(dá)到臨界范圍時(shí)，兩相會(huì)沿螺旋管長(zhǎng)度完全分開(kāi)單向性流體動(dòng)力平衡體系可按二種方式實(shí)現(xiàn)逆流色譜：以首端相為固定相，從首端泵入尾端相以尾端相為固定相，從尾端泵入首端相固定相的保留是在兩個(gè)力的平衡狀態(tài)下實(shí)現(xiàn)的阿基米德螺線力——固定相移向移動(dòng)相引入端流動(dòng)相的推力——固

4、定相推向移動(dòng)相流出端（二）溶劑系統(tǒng)中兩相在轉(zhuǎn)動(dòng)管柱里的流體動(dòng)力學(xué)分布.保留情況（多層螺旋管）氯仿—醋酸—水（2：2：1）規(guī)定：以順時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)動(dòng)時(shí)，在多層螺旋管內(nèi)：靠心端——首，外圍端——尾固定相保留值（%）流通方式上相為移動(dòng)相下相為移動(dòng)相HT—78.78TH70..70—H-首端T-尾端獲得高保留值的條件是：對(duì)上述體系，以下相為移動(dòng)相，由首尾洗脫以上相為移動(dòng)相時(shí)，由尾首洗脫（三）實(shí)驗(yàn)步驟1.流程及步驟溶劑輸液泵主機(jī)檢測(cè)器記錄儀進(jìn)樣器調(diào)速器操作步驟：兩相溶劑混合用固定相注滿管柱移動(dòng)相泵入首端當(dāng)尾端出現(xiàn)移動(dòng)相時(shí)，對(duì)檢測(cè)器和記錄儀調(diào)零，走基線進(jìn)樣，收集2.

5、兩相溶劑系統(tǒng)的選擇參考文獻(xiàn)測(cè)定分配系數(shù)，一般K最佳范圍為0.5-2，允許0.2-5用薄層色譜法或紙色譜預(yù)分溶劑系統(tǒng)選擇原則：不造成樣品的分解或變性溶解度及分配系數(shù)固定相的高保留分離效果3.儀器運(yùn)行參數(shù)的確定螺旋單元數(shù)螺旋管內(nèi)徑離心力管柱材質(zhì)：聚四氯乙烯轉(zhuǎn)速流速4.樣品溶液的制備及進(jìn)樣量(1)樣品溶液的選擇(2)樣品量HSCCC法的特點(diǎn)不需載體溶劑系統(tǒng)的選擇可較廣對(duì)樣品前處理要求較低，樣品處理量較大（mg）