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《特發(fā)性無精子癥和嚴重少精子癥患者無精子因子檢測的臨床意義》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、南京醫(yī)科大學碩士學位論文特發(fā)性無精子癥和嚴重少精子癥患者無精子因子檢測的臨床意義姓名：宋寧宏申請學位級別：碩士專業(yè)：泌尿外科學指導教師：吳宏飛;蘇建堂20030420南京醫(yī)科大學碩士學位論文特發(fā)性無精子癥和嚴重少精子癥患者無精子因子檢測的臨床意義TheC1inicalSignificanceofhzoospermiaFactorDetectionforthePatientswithIdiopathicAzoospermiaandSevere01igozoospermia南京醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院泌尿外科教研室研究生宋寧宏導師吳宏飛蘇建堂摘要研究背景據估計全世界約有10％的育齡
2、夫婦不育，其中接近半數的原因是精子發(fā)生障礙。在排除輸精管梗阻、克氏癥和其它泌尿生殖系原因后，無精子癥和嚴重少精子癥最有可能的原因就是精子發(fā)生基因的異常。關于精子發(fā)生基因，特別應關注Y染色體長臂11間隔。Y染色體構成人類基因組的2％，由短臂(Yp)和長臂(Yq)組成。1976年Tiepolo和Zuffardi通過對男性不育癥患者Y染色體微缺失的分析，首次提出Y染色體長臂在精子發(fā)生過程中扮演著關鍵的作用。無精子癥和嚴重少精子癥的細胞遺傳學和分子生物學研究也證實：在人類Y染色體上存在著無精子因子(Azoospermiafactor，AZFo通過分子標記物來顯示Y染色體的密度，大量
3、缺失圖譜的研究至少能確定三個清楚的、非重疊的區(qū)域伴有不同程度生精障礙，位于Y染色體長臂的這三個區(qū)域分別命名為AZFa、AZFb和AZFc。據報道這三個區(qū)域的微缺失能夠干擾精子發(fā)生繼而引起男性不育。在這些區(qū)域里有數個控制精子發(fā)生的候選基因，它們在人類精子發(fā)生過程中有著重要的功能。1993年，Ma通過對男性不育癥患者的研究首先報道了在Y南京醫(yī)科大學碩士學位論文染色體上一個特殊基因家族的兩個eDNA，也就是RBM(RNAbindingmotif)基因。1995年，ReijO通過對無精子癥患者Y染色體長臂AZFc間隔的研究發(fā)現(xiàn)了DAZ(Deletedinazoospcrmia)基因
4、。RBM、DAZ分別作為AZFb和AZFc區(qū)控制精子發(fā)生的候選基因，它們編碼RNA結合蛋白，同時對結合蛋白具有調節(jié)和代謝作用J—戈一。～一，、對特發(fā)性無精子癥和少精子癥患者病因學的研究說明應該對這類病人進行Y染色體微缺失的檢測。這樣既有利于診斷，同時也可避免一些不必要的治療，因為目前的治療不可能改善精子的數量。隨著人工輔助生育技術的發(fā)展，Y染色體微缺失能夠傳遞給男性子孫，這些男性后代同樣面臨著不育的問題。實際上，Kent-FriSt的研究已經證實：Y染色體微缺失能夠通過胞漿內精子注射(Intracytoplasmicsperminjection，ICSI)傳遞給男性后代。(
5、，因此，我們應該把這種可能性告訴給不育癥夫婦，并向他們解釋進行Y染色體微缺失分析的必要性j卜2罔妁^本研究的目的是評估特發(fā)性無精子癥和嚴重少精子癥患者中Y染色體微缺失發(fā)生的頻率，并探討AZF檢測的臨床意義。材料和方法患者組：所有的患者均來自男性不育癥門診，研究的對象為男性特發(fā)性不育患者，年齡28～42歲；50例患者均通過臨床檢查排除精索靜脈曲張、附睪損傷、隱睪、阻塞性無子精癥或其它泌尿生殖系疾患；無精子癥和嚴重少精子癥(2～5×106／m1)患者的精液標本需連續(xù)三次，每次間隔三周，隨后經3天禁欲后獲得，并符合世界衛(wèi)生組織(WorldHealthOrganization，WH
6、O)的診斷標準；所有的患者都有正常的46XY核型，性激素檢測正常；此外，38例無精子癥患者石蠟包埋的睪丸組織通過病理檢查均符合精子發(fā)生不完全的診斷。對照組：50例正常男性作為對照，他們均有子女且精子計數>4xl07／ml?；蚪MDNA來自患者和正常生育者的外周血標本，通過多重聚合酶鏈反應(P01ymeraSechainreaction，PCR)技術來完成Y染色體微缺失的檢測。南京醫(yī)科火學碩十學位論文結果1．待測的100份標本，經PCR檢測均能檢出性別決定基因(Sex-determiningregiOilY，SRY)特異性片段，表明所檢測的DNA模板符合要求，整個擴增系統(tǒng)有效
7、。2，SRY基因片段擴增長度為472bp，與待測的片段(AZFa／SY84、hZFb／YRRM。、AZFc／DAZ)分剮相差146bp、328bp和122bp，四者能夠區(qū)別并以此作為內參照。3．50名正常生育男性標本均可見SRY、SY84、YRRM，(RBM。)和SY254(DAZ)擴增帶，表明無AZF因子微缺失。4．50例患者標本中均可見SRY及SY84擴增帶，表明無AZFa／SY84微缺失。5．50例患者標本中有6例(無精子癥4例；嚴重少精子癥2例)可見SRY擴增帶，但未見SY254擴增帶，表明有AZFc／DA
