茶樹根際促生細(xì)菌的研究

茶樹根際促生細(xì)菌的研究

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1、摘要植物根際微生物是植物根際微環(huán)境中的重要生物類群,對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育具有明顯的影響,本研究利用選擇性培養(yǎng)基,對(duì)不同茶園根際微生物進(jìn)行了分離,研究了茶樹根際細(xì)菌、真菌、放線菌的數(shù)量變化:運(yùn)用選擇性培養(yǎng)基對(duì)根際固氮、解磷和解鉀細(xì)菌進(jìn)行了篩選,運(yùn)用生物學(xué)方法對(duì)具產(chǎn)植物激索潛能的促生細(xì)菌和植物病原真菌拮抗細(xì)菌進(jìn)行了篩選,對(duì)細(xì)菌分離物進(jìn)行了鑒定;對(duì)一株植物病原真菌拮抗細(xì)菌的抗菌物質(zhì)進(jìn)行了分離、純化并研究了其部分理化性質(zhì)。主要結(jié)果如下。1土壤肥沃的茶園根際細(xì)菌的數(shù)量最大,土壤貧瘠的茶園數(shù)量最?。幌嗤寥婪柿Φ牟鑸@,10年生茶園根際細(xì)菌的數(shù)量最大,4年生的次之,20年生的最?。桓H真菌的數(shù)量,土壤肥沃茶

2、園的較小,中等和貧瘠茶園的較大。根際放線菌的數(shù)量,20年生茶園的明顯高于4年和10年生茶園的,而且,土壤貧瘠茶園的數(shù)量較大。相同肥力的土壤中,固氮菌的數(shù)量隨茶齡的增加而減少,但減少的幅度以貧瘠土壤最大;解磷和解鉀細(xì)菌也顯示了隨茶齡的增加數(shù)量減少的趨勢(shì),但肥沃土壤中,茶樹達(dá)到10年時(shí)減少的幅度不明顯,20年生茶樹急劇減少;中等和貧瘠土壤中茶齡達(dá)到10時(shí)便明顯減少。相同茶齡的土壤中固氮菌的數(shù)量隨土壤肥力的降低而減少;在4年生茶園里,解磷和解鉀細(xì)菌的數(shù)量與土壤肥力關(guān)系不大:在10年生茶園里,隨肥力的降低而減少;在20年生茶園里,隨土壤肥力降低而有所增加。2從茶樹根際中獲得產(chǎn)植物激素純化細(xì)菌分離

3、物3個(gè),固氮細(xì)菌純化分離物10個(gè),解磷細(xì)菌純化分離物8個(gè),解鉀細(xì)菌純化分離物2個(gè),篩選獲得對(duì)多種植物病原真菌具有較強(qiáng)拮抗作用的細(xì)菌1株。3對(duì)分離的茶樹根際促生細(xì)菌經(jīng)培養(yǎng)特征觀察、生理生化指標(biāo)測(cè)定,鑒定結(jié)果為編號(hào)N42、N50、N80、N119的分離物屬于拜葉林克氏菌屬IV(Beijerinckia),N46、N49的分離物屬于氮單胞菌屬(Azomonas),N107、N152的分離物屬于黃色桿菌屬(Xanthobacter),N120、N115的分離物屬于固氮菌屬(Azotobacter):P54、P121、P126、P129的分離物屬于假單胞菌屬(Pseudomonas),P38、P5

4、5、P124、P127、K44、K46的分離物屬于芽孢桿菌屬(Bacillus),PG7的分離物屬于假單胞菌屬(Pseudomonas),PG20的分離物屬于土壤桿菌(Agrobacterium),編號(hào)PG36的分離物屬于芽孢桿菌屬(Bacillus);A95的拮抗細(xì)菌經(jīng)培養(yǎng)特征觀察、生理生化指標(biāo)測(cè)定、16SrDNA堿基序列測(cè)定和同源性分析,鑒定其為圓孢芽孢桿菌(Bacillusglobisporus),定名為BacillusglobisporusA95,GENEBANK注冊(cè)號(hào)為AY292989。4Bacillusgtob卸o,-usA95菌株發(fā)酵液經(jīng)硫酸銨沉淀、SephadexG-10

5、0柱層析、DEAE—SepharoseFastFlow柱層析、SephadexG一50層析、真空冷凍干燥,獲得純化抗菌蛋白,經(jīng)SDS—PAGE測(cè)定其分子量為40.7KD,經(jīng)穩(wěn)定性檢測(cè)表明該蛋白在100℃條件下煮沸55rain仍具有拮抗活性,對(duì)胰蛋白酶、蛋白酶K不敏感,對(duì)氯仿較敏感,對(duì)于較大范圍的pH值變化不敏感。關(guān)鍵詞:茶;根際微生物;根際促生細(xì)菌;抗菌蛋白;純化VStudiesOHPlantGrowth-PromotingRhizobaeteriaofTeaRhizosphereSUNhaixin(ForestryCollege,ShandongAgricultureUniversit

6、y)AbstraetRhizospheremicrobesisanimportantbiologicalgroupinrhizospheremicro—ecologywhichgreatlyimpactedonplantgrowth.Inthisstudy,rhizospheremicrobeswereisolatedthroughselectivemediura,quantityanalysisofrhizospherebacteria,fungi,actinomyeesindifferentteaplantationwereconducted.Azotobacter,Phosphob

7、acteriaandBacillusmucilaginosuswereselectedthroughselectivemedium.SomePlantGrowth—PromotingRhizobacteriaoftearhizospherewereselectedbybiologicalmethodandwereidentifiedfurther,whichweresupposedtobewiththepotentialofsecr

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