PLGA支架聯合BMSCs修復兔膝關節(jié)軟骨缺損的研究

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1、學校代碼１０４５９學號或申請?zhí)枺溃崳娒芗壒_邳州炎ｆ碩士學位論文ＰＬＧＡ支架聯合ＢＭＳＣｓ修復兔膝關節(jié)軟骨缺損的研究作者姓名：柳超導師姓名：曹靖教授學科門類：基礎醫(yī)學專業(yè)名稱：人體解剖與組織胚胎學培養(yǎng)院系：基礎醫(yī)學院完成時間：２０１８年１１月Athesis(dissertation)submittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMaster（doctor）Theexperimentalstudyontheeffectoflactic-co-glyc

2、olicacidstentsincombinationwithBonemarrowmesenchymalstemcellsintherepairofrabbitkneearticularcartilagedefectsBy:ChaoLiuSupervisor:Prof.JingCaoDepartmentofanatomyBasicMedicalCollegeofZhengzhouUniversity2018-11原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研宄所取得的成果。除文中己經注明引用的內容外，

3、本論文不包含任何其他個人或集體己經發(fā)表或撰寫過的科研成果ｓ對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均己在文中以明確方式標明。。本聲明的法律責任由本人承擔＞學位論文作者：日期年／月冷日ｉ－ｉ１ｔ／學位論文使用授權聲明本人在導師指導下完成的論文及相關的職務作品，知識產權歸屬鄭州大學。根據鄭州大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留或向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權鄭州大學可以將本學位論文的全部或部分編入有關數據庫進行檢索，可以采用影印、縮?。崳娀蛘咂渌?/p>

4、復制手段保存論文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表、使用學位論文一。或與該學位論文直接相關的學術論文或成果時，第署名單位仍然為鄭州大學保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。ｆ學位論文作者：日期：妒年／＞月分日４務ＡＩPLGA支架聯合BMSCs修復兔膝關節(jié)軟骨缺損的研究碩士學位申請人：柳超推薦導師：曹靖教授鄭州大學基礎醫(yī)學院人體解剖與組織胚胎學河南鄭州450001摘要背景與目的：退行性病變骨性關節(jié)炎和自身免疫性疾病類風濕性關節(jié)炎因軟骨病變嚴重影響了老年患者的生活質量；骨軟骨病、骨性關節(jié)炎、類風濕關節(jié)炎、發(fā)育障礙、膝關節(jié)感

5、染、骨腫瘤、運動性損傷或其他創(chuàng)傷等也可引起軟骨損傷、缺損；導致關節(jié)病變。因軟骨組織本身血管分布極少，缺失相應的營養(yǎng)物質，所以受損后再生能力比較差。目前，無論是臨床藥物治療，還是常規(guī)的外科手術以及新興的微創(chuàng)外科手術，均不能達到良好的修復效果，給患者的生活帶來了嚴重的影響。近年來，組織工程技術不斷發(fā)展和創(chuàng)新，為臨床治療關節(jié)軟骨損傷帶來新的思路和方法，為關節(jié)軟骨缺損患者的康復帶來的希望。有研究發(fā)現如果BMSCs附著在載體上，共同植入軟骨缺損處，種子細胞就不容易消失，且能固定在軟骨缺損處，較容易形成新的軟骨。目前人工合成的生物活性材料支架是組織

6、工程支架研中的熱點。國內外已有研究利用復合聚乳酸羥基乙酸共聚物（PLGA）支架作為修復肌腱、軟骨、韌帶缺損的載體。有研究指出PLGA支架不僅促進關節(jié)軟骨缺損再生的效果較好，還具有可塑性強，易吸收，無免疫排斥反應等優(yōu)點，比較適合作為關節(jié)軟骨缺損修復的組織工程材料。組織工程技術可能為關節(jié)損傷的修復提高新的治療方向和方法。方法：1.BMSCs的培養(yǎng)及鑒定：3%水合氯醛麻醉后，于兔脛骨處用10ml注射器取骨髓液，培養(yǎng)BMSCs并用蘇木伊紅染色方法鑒定。2.準備直徑為4mm的孔隙率92%PLGA支架。I3.隨機將40只新西蘭兔分成空白組、PLGA

7、組、PLGA/BMSCs組、BMSCs組4組，空白組為軟骨缺損模型組，不做處理。PLGA組在兔膝關節(jié)軟骨缺損處置入全層PLGA支架，BMSCs組在兔膝關節(jié)軟骨缺損處注射BMSCs，PLGA/BMSCs組在兔膝關節(jié)軟骨缺損處置入黏附BMSCs的全層PLGA支架。4.第8周和第16周時取各組兔膝關節(jié)缺損處新生組織進行行HE染色和甲苯胺藍染色，在倒置相差顯微鏡和掃描電鏡下觀察兔膝關節(jié)缺損處新生組織。5.采用RT-PCR法對第8周和第16周各組兔膝關節(jié)缺損處新生組織進行定量檢測CollagentypeII，SOX-9和Aggrecan的表達水平

8、。結果：1.術后各組動物膝關節(jié)未見炎癥反應。第8周取膝關節(jié)，肉眼可見PLGA/BMSCs組軟骨缺損部位被粉色骨新生組織填充，新生組織表面呈透明軟骨樣，新生軟骨組織表面光滑，未見明顯凹陷。術后16周觀察PLG