EGCG對高脂飲食誘導的肥胖HFA小鼠腸道菌群及脂質代謝的影響

EGCG對高脂飲食誘導的肥胖HFA小鼠腸道菌群及脂質代謝的影響

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1、學校代碼:10564學號:2015204702分類號:Q93密級:碩士學位論文EGCG對高脂飲食誘導的肥胖HFA小鼠腸道菌群及脂質代謝的影響胡凌指導教師:方祥教授學院名稱:食品學院專業(yè)名稱:微生物學答辯委員會主席:婁文勇教授中國·廣州2018年6月華南農(nóng)業(yè)大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學位論文是本人在導師的指導下獨立進行研究所取得的研究成果。除了文中特別加以標注引用的內(nèi)容外,本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體,均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。作者簽名:日期:學位論

2、文版權使用授權書本學位論文作者完全了解學校有關保留、使用學位論文的規(guī)定,即:研究生在校攻讀學位期間論文工作的知識產(chǎn)權單位屬華南農(nóng)業(yè)大學。學校有權保存并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版,允許學位論文被查閱或在校園網(wǎng)上發(fā)布并供校內(nèi)師生和與學校有共享協(xié)議的單位瀏覽(除在保密期內(nèi)的涉密論文外);學??梢怨紝W位論文的全部或部分內(nèi)容,可以允許采用影印、縮印或其它復制手段保存、匯編學位論文。本人電子文檔的內(nèi)容和紙質論文的內(nèi)容相一致。作者簽名:日期:導師簽名:日期:學位論文提交同意書本學位論文符合國家和華南農(nóng)業(yè)大學關于研究生學位論文的相關規(guī)定,達到學位授予要求,同意提交。

3、導師簽名:日期:學科帶頭人簽名:日期:摘要腸道菌群被認為與多種疾病發(fā)生相關,因此如何調(diào)節(jié)腸道菌群成為目前研究的一大熱點。研究發(fā)現(xiàn)影響腸道菌群構成和功能的因素有很多,如飲食、抗生素、宿主基因型、益生菌和疾病等,其中飲食對腸道菌群影響最大。本研究首先利用無菌昆明(KM)小鼠灌胃健康人糞便懸液構建人源菌群(Humanfloral-associated,HFA)小鼠模型,此模型可在一定程度上模擬人腸道菌群生態(tài)系統(tǒng),同時也避免了直接利用人進行腸道菌群研究存在的倫理學限制等問題。在此基礎上,一方面利用兩種不同飲食干涉HFA小鼠,分別在第1、2、4周收取糞便進行16SrRNA測序,發(fā)

4、現(xiàn)不同飲食對HFA小鼠菌群定植的影響。另一方面研究茶多酚的主要功能物質EGCG對肥胖及對腸道菌群的調(diào)節(jié)作用,為研究茶功能提供理論基礎。具體實驗結果如下:首先給無菌小鼠灌胃健康人糞便,利用粗飼料和純化飼料兩種飼料干預HFA小鼠腸道菌群,定植4周后,根據(jù)16sRNA測序結果,PcoA、UDPMG聚類分析發(fā)現(xiàn)粗飼料與純化飼料處理后腸道菌群發(fā)生明顯改變,人糞便和粗飼料定植不同時期各組集中在上側,純化飼料定植不同時期各組集中在下側,說明組間差異較大,說明可能飲食條件對腸道菌群結構有一定影響。同時,人糞便的離粗飼料組更近,說明可能粗飼料定植人腸道菌群與人糞便腸道菌群組成結構更為相似

5、。其次,將構建好的HFA模型隨機分為兩組:高脂組40只和普通組10只,分別喂食高脂飼料和普通飼料,8周后各處死10只,測定小鼠理化指標體重、肝重、附睪脂肪墊重量、血糖血脂含量以及肝臟和附睪脂肪墊蘇木精-伊紅(HE)染色,并對糞便細菌進行16SrRNA測序分析。將獲得的肥胖小鼠隨機分為三組,即對照組,0.2%EGCG低劑量組和0.8%EGCG高劑量組,喂食普通飼料,8周后全部處死,測定同上指標。結果表明高劑量組小鼠附睪脂肪墊重量、總膽固醇(Tch)和低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)含量均較對照組顯著降低(p<0.05),同時脂肪細胞大小較對照組也顯著減小(p<0.01),

6、除此之外EGCG干預組肝臟病變程度較對照組有明顯好轉,且呈劑量效應關系。由此證實,EGCG對肥胖HFA小鼠降脂及肝臟損傷修復有一定的作用。另外,對腸道菌群16sRNA測序,PcoA、UDPMG聚類分析發(fā)現(xiàn)高脂飲食改變了腸道菌群結構。從門水平分析,高脂組厚壁菌門占比為(82.1±3.137)%較普通組厚壁菌門(68.07±4.857)%提高了20.6%、擬桿菌門占比(10.14±2.294)%較普通組擬桿菌門的占比(23.18±4.479)%降低了60.9%。另外采用EGCG干預8周后,EGCGI也明顯改變了肥胖小鼠的腸道菌群結構。與對照組比較,高劑量EGCG處理后,Pe

7、ptostreptococcaceae科細菌及Romboutsia屬細菌較對照組顯著增加,并且EGCG處理組厚壁菌門豐度較對照組降低,擬桿菌門豐度較對照組升高。關鍵詞:EGCG;人源菌群小鼠;腸道菌群IIEffectofEGCGonGutMicrobiotaDiversityandFatDepositioninKMMiceHuLing(CollegeofFoodScience,SouthChinaAgricultureUniversity,Guangzhou510642,China)Abstract:Theintestinalflorai

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