BES1與ABI5相互作用參與調(diào)控擬南芥種子萌發(fā)過程的分子機理

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1、分類號：單位代碼１１：００９密級：學(xué)號：ＺＢ１１０６０３６博士學(xué)位論文ＢＥＳ１與ＡＢＩ５相互作用參與調(diào)控擬南芥種子萌發(fā)過程的分子機理Ｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆ－ＢＲＩＮＳＥＮＳＩＴＩＶＥ１ＥＭＳ－ＳＵＰＰＲＥＳＳＯＲ１ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｗｉｔｈＡＢＳＣＩＳＩＣＡＣＩＤＩＮＳＥＮＳＩＴＩＶＥ５ｉｎｔｈｅｇｒｅｕｌａｔｉｏｎｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｓｅｅｄｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｇｇ研究生：趙遊指導(dǎo)

2、教師＝毛同林教授申請學(xué)位門類級別：理學(xué)博士專業(yè)名稱：細胞生物學(xué)研究方向：植物激素信號與轉(zhuǎn)導(dǎo)所在學(xué)院：生物學(xué)院２０１８年９月ＣｈｉｎａＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙＰｈ．Ｄ．ＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＴｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆ－ＢＲＩＮＳＥＮＳＩＴＩＶＥ１ＥＭＳ－ＳＵＰＰＲＥＳＳＯＲ１ｉｎｔｅｒａｃｔｉｎｇｉｔｈＡＢＳＣＩＳＩＣＡＣＩＤＩＮＳＥＮＳｍＶＥ５ｉｎｔｈｅｗｒｅｇｕｌａｔ

3、ｉｏｎｏｆＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｓｅｅｄｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎＰｈ．Ｄ．Ｃａｎｄｉｄａｔｅ：ＸｕａｎＺｈａｏＡｄｖｉｓｏｒ：ＴｏｎｌｉｎＭａｏｇＭａｏｒ：ＣｅｌｌＢｉｏｌｏｊｇｙＳｅｔｅｍｂｅｒ２０１８ｐ，獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學(xué)位論文是我個人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進行的研究工作及取得的研究成果。盡我所知，除了文中已經(jīng)注明引用和致謝的內(nèi)容外，論文中不包含本人和其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得中國農(nóng)業(yè)大學(xué)或其它教育一機構(gòu)的學(xué)位或

4、證書而使用過的材料。與我同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示了謝意。（：時間學(xué)位論文作者簽名：年／月日桃｜丨關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說明本人完全了解中國農(nóng)業(yè)大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定。本人同意中國農(nóng)業(yè)大學(xué)有權(quán)保存及向國家有關(guān)部門和機構(gòu)送交論文的紙質(zhì)版和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人同意中國農(nóng)業(yè)大學(xué)將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容授權(quán)匯編錄入《中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》或《中國優(yōu)秀碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫》進行出版。，并享受相關(guān)

5、權(quán)益（保密的學(xué)位論文在解密后應(yīng)遵守此協(xié)議）：Ｉ學(xué)位論文作者簽名：時間年月０日Ｉ導(dǎo)師簽時間曰％＃｜｜Ｘ摘要種子的休眠與萌發(fā)對于植物的正常生長具有非常重要的意義，其過程受到外界環(huán)境因素和內(nèi)在激素水平的共同調(diào)控。當(dāng)植物處于高鹽、干旱、低溫等外界脅迫環(huán)境時，種子內(nèi)源的激素ａｂｓｃｉｓｉｃａｃｉｄ（ＡＢＡ）水平升高，抑制種子萌發(fā)以幫助植物抵御不良環(huán)境。當(dāng)逆境解除或外界環(huán)境適宜植物生長時降低種子對脅迫信號的響應(yīng)，以促進種子萌發(fā)過程對植物的生存繁衍就變得非常重要。種子

6、萌發(fā)的正確調(diào)控對植物進行成功繁殖是非常必要的。因此對種子萌發(fā)過程調(diào)控機制的研究顯得尤為重要。ＡＢＡ信號途徑在抑制種子萌發(fā)過程中起著重要的作用。而前人的研究發(fā)現(xiàn)植物激素油菜素甾醇ｂｒａｓｓｉｎｏｓｔｅｒｏｉｄｓＢＲｓ能夠抬抗ＡＢＡ信號以促進種子萌發(fā)ＢＲ合（）。２－／ＢＡ敏感的表型ＢＲ成酶缺失突變體辦（在種子萌發(fā)過程中表現(xiàn)出對Ａ，而信號通路持續(xù)激活的突變體在種子萌發(fā)過程中對ＡＢＡ不敏感。然而ＢＲ與ＡＢＡ信號通路在調(diào)控種子萌發(fā)過程中相互拮抗的分子機制并不完全清楚。ＡＢＳＣＩ

7、ＳＩＣＡＣＩＤＩＮＳＥＮＳＩＴＩＶＥ５（ＡＢＩ５）是ＡＢＡ信號通路中重要的轉(zhuǎn)錄因子，負調(diào)控種子的萌發(fā)過程。本論文通過酵母雙雜交實驗發(fā)現(xiàn)ＢＲ信號通路核心轉(zhuǎn)錄因ＢＲ－－子ＢＲＩＮＳＥＮＳＩＴＩＶＥ１Ｉｌ）ＥＭＳＳＵＰＰＲＥＳＳＯＲｌ（ＢＥＳ１能夠與ＡＢＩ５直接相互作（）用－ｄｏｗｎ實驗以及體內(nèi)蛋白免疫共沉淀Ｃｏ－ＩＰ。體外ｐｕｌｌ（）實驗、雙分子突光互補一ＢＩＦＣ實驗５１）、熒光素酶雙分子互補（ＬＣＩ）等實驗進步明確了ＡＢＩ與ＢＥＳ在體（內(nèi)外的互作關(guān)系。ＡＢＩ５

8、屬于亮氨酸拉鏈ｂＺＩＰ轉(zhuǎn)錄因子家族該蛋白家族包括Ｃ１、（），Ｃ一２、Ｃ３、Ｃ４四個保守結(jié)構(gòu)域以及個負責(zé)與ＤＮＡ結(jié)合的ｂＺＩＰ區(qū)。將ＡＢＩ５蛋白進行截斷，構(gòu)建并表達其截斷突變蛋白進行互作實驗。通過酵母雙雜交、體外ｕｌ－ｐｌｄｏｗｎ以及ＬＣＩ等實驗發(fā)現(xiàn)ＢＥＳ１通過ＡＢＩ５的ｂＺＩＰ區(qū)與ＡＢＩ５相互結(jié)合。ＡＢＩ５，的一ｂＺＩＰ區(qū)是其結(jié)合下游調(diào)控基因啟動子上ＡＢＡ反應(yīng)元件的區(qū)域。進步的凝膠阻滯ＥＭＳＡ實驗、煙草瞬時表達實驗均發(fā)現(xiàn)ＢＥＳ１與ＡＢＩ５的相互作用負調(diào)控了（）ＡＢＩ５結(jié)合