sHLAG檢測(cè)及胚胎植前篩選

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1、sHLAG檢測(cè)及胚胎植前篩選作者：孫新六1,劉秀蘭2單位：1.泰山醫(yī)學(xué)院附屬泰安醫(yī)院中心實(shí)驗(yàn)室，山東泰安271000;2.泰山醫(yī)學(xué)院附屬泰安醫(yī)院婦產(chǎn)科，山東泰安271000【摘要】目的探討胚胎植前篩選以提高胚胎移植成功率。方法單胚培養(yǎng)體外受精胚胎，ELISA方法檢測(cè)移植成功組與失敗組胚胎培養(yǎng)上清液sHLAG水平，并比較培養(yǎng)上清中sHLAG與胚胎HLAGmRNA表達(dá)的相關(guān)性。結(jié)果胚胎移植成功組sHLAG水平顯著高于未成功受孕組;sHLAG>10ng/ml移植組受孕成功率60.9%,sHLAG<5ng/ml成功

2、率11.5%。結(jié)論sHLAG是植前篩選良好指標(biāo)，能提高胚胎移植成功率?！娟P(guān)鍵詞】可溶性人白細(xì)胞抗原G;胚胎移植;植前篩選DetectingofsHLAGandselectionforpreimplantationembryosSUNXinliu1,LIUXiulan2(1.theCentralLaboratoryofTaianCentralHospital,Taian271000,China;　　2.theDept.ofObstetricsandGynecologyofTaianCentralHospital,Taian27

3、1000,China)　　Abstract:Objective:Investigatingtheselectionforpreimpantationembryostoemhancetherateofsuccessfulembryoimplantation.Methods：Theembryoswereculturedbyoneembryoseveryhole,wedetectedtheconcentrationofsHLAGinsupernatantculturesofembryosinsuccessfulpregnantgroup

4、andunsuccessfulpregnantgrouprespectively,comparedthecorrelationbetweensHLAGinsupernatantculturesofembryosandexpressionofHLAGmRNAinembryos.Results：thesHLAGwassignificantlyhigherinpregnantgroupthaninnonpregnantgroup,therateofsuccessfulpregnantwas60.9%ingroupofsHLAGu

5、p10ng/mland11.5%ingroupofsHLAGunder5ng/mlrespectively.Conclusion：sHLAGwasanidealindictorofselectionforpreimpantationembryosandcanechancetherateofsuccessfulembryoimplantation.　　Keywords:sHLAG;embryoimplantation;selectionofpreimpantationembryos　　人白細(xì)胞非經(jīng)典抗原G(humanleukec

6、yteantigenG,HLAG)是HLAI類抗原，主要分布于絨毛外滋養(yǎng)層細(xì)胞[1]，sHLAG是可溶性HLAG,存在于孕婦外周血清中，sHLAG亦可由受精胚胎表達(dá)，與臨床密切相關(guān)[2]。本實(shí)驗(yàn)旨在研究以sHLAG為指標(biāo)植前篩選移植胚胎以期提高體外受精胚胎移值(IVFET)成功率?！　?材料與方法　　1.1試劑及實(shí)驗(yàn)對(duì)象　　受精胚胎由本院生殖中心提供;RTPCR試劑盒購(gòu)自TAKARa公司;胚胎培養(yǎng)基購(gòu)自丹麥Medicult公司;sHLAG試劑盒購(gòu)自Biovendor公司?！　?.2胚胎制備及培養(yǎng)　　促超排卵、取

7、卵、卵母細(xì)胞收集及體外受精均由生殖中心按常規(guī)操作完成。受精胚胎置于8孔培養(yǎng)板中，每孔放置一個(gè)胚胎，并用1mlDenmark培養(yǎng)基培養(yǎng)48h,鏡下挑選形態(tài)完好的胚胎，轉(zhuǎn)入新鮮培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)72h,篩選合格胚胎，并收集培養(yǎng)上清。合格胚胎篩選標(biāo)準(zhǔn)：分裂球數(shù)目≥6個(gè);分裂球形態(tài)規(guī)則;碎片<5%;卵裂球大小均勻，透亮?！　?.3胚胎移植　　由生殖中心按常規(guī)程序完成，胚胎移植對(duì)象均為30~35周歲女性，均未生育。4周后，檢測(cè)血清βHCG呈陽(yáng)性及B超顯示胎兒心跳視為移植成功?！　?.4sHLAG檢測(cè)　　取胚胎培養(yǎng)上清，

8、2000r/min離心5min,取上清，ELISA法測(cè)sHLAG。用稀釋液將HLAG標(biāo)準(zhǔn)品等倍系列稀釋成125,62.5,31.25,15.63,7.81,3.91,1.96Unit/ml(1Unit相當(dāng)于1ng)，采用夾心法EL