測定項(xiàng)目及方法

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1、實(shí)驗(yàn)測定項(xiàng)目及方法好果率:好果率（%）=（好果數(shù)/果子統(tǒng)計(jì)總數(shù)）×100%以未發(fā)生病害，冷害，機(jī)械性損傷和霉變的果實(shí)為好果，通過技術(shù)和數(shù)學(xué)的方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。果實(shí)硬度：應(yīng)用果實(shí)硬度計(jì)（GY-1型果實(shí)硬度計(jì)）。果實(shí)硬度計(jì)設(shè)計(jì)原理果實(shí)硬度是指水果單位面積（S）承受測力彈簧的壓力（N），它們的比值定義為果實(shí)硬度（P）。P=N/SP—被測水果硬度值105帕或（公斤每平方里米）N—測力彈簧壓在果實(shí)面上的力N牛頓或(公斤)S—果實(shí)的受力面積平方米或(平方厘米)GY-1果實(shí)硬度計(jì)使用方法測量前：轉(zhuǎn)動表盤，使驅(qū)動指針與表盤的第一條刻度線對齊（GY-1型的為刻度線2，G

2、Y-2和GY-3型的為刻度線0.5）；將待測水果削去1平方厘米左右的皮。測量：用手握硬度計(jì)，使硬度計(jì)垂直于被測水果表面，壓頭均勻壓入水果內(nèi)，此時(shí)驅(qū)動指針開始驅(qū)動指示指針旋轉(zhuǎn)，當(dāng)壓頭壓到刻度線（10毫米）處停止，指示指針指示的讀數(shù)即為水果的硬度，取三次平均值。測量后：旋轉(zhuǎn)回零旋鈕，使指針復(fù)位到初始刻度線。電導(dǎo)率：電導(dǎo)率儀測定（DDS-12A型數(shù)字式電導(dǎo)率儀）使用方法：1.量程選擇共5擋，分別是2μS/cm、20μS/cm、200μS/cm、2mS/cm、20mS/cm，檔位數(shù)字為該擋的最大測量值，電導(dǎo)率儀超過此數(shù)字時(shí)不再顯示數(shù)字，應(yīng)該換檔。使用高周時(shí)

3、需同時(shí)按下20mS/cm及200μS/cm檔位。讀數(shù)超過200μS/cm時(shí)用高周，超過2S/cm時(shí)用DjS-10型Pt黑電極。2.電容補(bǔ)償用以抵消電極連接的電容器。在接有電導(dǎo)電極但電極未浸入溶液時(shí)，按下2μS/cm擋按鈕，用電容補(bǔ)償調(diào)節(jié)器調(diào)零。3.常數(shù)調(diào)節(jié)用調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)至與電容常數(shù)一致。4.溫度補(bǔ)償通常置于25℃。測定是將電極插入測定液，按下相應(yīng)的檔位即可讀數(shù)。丙二醛含量：硫代巴比妥酸比色法公式：C（μmol/L）=6.45（A-A）-0.56A式中：A、A、A分別代表450nm、532nm和600nm波長下的吸光度值。用公式可直接求的植物樣品提取液

4、中MDA的濃度，進(jìn)一步算出其在植物組織中的含量。材料、儀器、試劑：材料：所選植物材料儀器：研缽、試管、可調(diào)加樣器、恒溫水浴鍋、冷凍離心機(jī)、分光光度計(jì)。試劑；1．5%三氯乙酸（TCA）。2．0.67%（W/V）硫代巴比妥酸（TBA）用10%的TCA配制。步驟：1.取0.5g植物樣品，加5%TCA5ml，研磨后所得勻漿在3000r/min下離心10min。2.取上清液2ml，加0.67%TBA2ml，混合后在100℃水浴上煮沸30min，冷卻后再離心一次。3.分別測定上清液在450nm、532nm和600nm處的吸光度值。并按照公式算出MDA濃度。多酚

5、氧化酶活性：多酚氧化酶活性；兒茶酚比色法器材與試劑1、儀器：低溫離心機(jī)、s22pc分光光度計(jì)2、試劑：兒茶酚、pH4.6磷酸緩沖液3、材料：所用實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)步驟：1．稱取實(shí)驗(yàn)材料0.5克，加入2.5mLpH7.2磷酸緩沖液，少許PVP，研磨勻漿，轉(zhuǎn)移到離心管，再用2.5mLpH7.2磷酸緩沖液沖洗研缽，合并提取液。4℃5000rpm離心15分鐘，上清液即為粗酶液。2．在試管中，加入2.5mLpH7.2磷酸緩沖液，1.5mL兒茶酚以及1mL粗酶液，空白調(diào)零以1mL磷酸緩沖液代替粗酶液。3．A值測定：加入粗酶液后迅速混勻，立刻于525nm下測定反應(yīng)體系

6、的A值，每隔30秒記錄一次，共記錄5次。4．計(jì)算酶活力。按下式計(jì)算PPO活性＝U/mingFWA值增加0.001定義為一個(gè)酶活力單位。計(jì)算所測材料的PPO活性。選擇A值變化均勻的三組數(shù)值求平均值。過氧化物酶活性：愈創(chuàng)木酚比色法材料、儀器、試劑：材料：所用實(shí)驗(yàn)材料。儀器：可見光分光光度計(jì)；離心機(jī)；研缽；容量瓶；量筒；試管；吸管。試劑：0.05mol/LpH5.5磷酸緩沖液；0.05mol/L愈創(chuàng)木酚；2%HO；20%三氯乙酸。實(shí)驗(yàn)步驟：（一）酶液的制備取5.0g洗凈去皮的實(shí)驗(yàn)材料，放入研缽中。加適量的磷酸緩沖液研磨成勻漿。將勻漿全部轉(zhuǎn)移到離心管中，于

7、3000rmp離心10min，上清液轉(zhuǎn)入25ml容量瓶中。沉淀用5ml磷酸緩沖液再提取2次，上清液并入容量瓶中，定容至刻度，低溫下保存?zhèn)溆?。（二）過氧化物酶活性測定酶活性測定的反應(yīng)體系包：0.05mol/L磷酸緩沖液2.9ml，2%HO1.0ml，0.05mol/L愈創(chuàng)木酚1.0ml和1.0ml酶液。用加熱煮沸5min的酶液為對照，反應(yīng)體系加入酶液后，立即于37℃水浴中保溫15min，然后迅速轉(zhuǎn)入冰浴中，并加入20%三氯乙酸2.0ml終止反映，然后過濾（或5000r/min離心10min），適當(dāng)稀釋，470nm波長下測定吸光度。結(jié)果計(jì)算：以每分鐘A

8、變化0.01為1個(gè)過氧化物酶活性單位（U）過氧化物酶活性【U/（g·min）】=（ΔA×V）／（W×V×0.01×t）式中