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《GC方法開(kāi)發(fā)基礎(chǔ)》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線(xiàn)閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、GC方法開(kāi)發(fā)基礎(chǔ)如何系統(tǒng)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)亻_(kāi)發(fā)氣相色譜分析方法從設(shè)置儀器參數(shù)...到調(diào)整溫度和流速...有效的方法開(kāi)發(fā)實(shí)踐對(duì)達(dá)到最佳性能和取得可靠結(jié)果非常重要。這就是為什么我們把最關(guān)鍵的方法開(kāi)發(fā)程序都放在一起–并且唾手可得的原因。例如，我們將說(shuō)明如何...?得到最佳的分離度–并縮短分析時(shí)間–通過(guò)確定最佳載氣平均線(xiàn)速度?為各種樣品類(lèi)型選擇默認(rèn)的進(jìn)樣器設(shè)定值–包括揮發(fā)性樣品（如溶劑）和高沸點(diǎn)樣品（如類(lèi)固醇、甘油三酸酯和表面活性劑）?確定是程序升溫還是恒溫條件最適合您的應(yīng)用?完善開(kāi)發(fā)升溫程序的最新技術(shù)–包括設(shè)置初始溫度及保持時(shí)間、調(diào)節(jié)
2、升溫速率以改善中間流出峰的分離度、確定最終溫度和時(shí)間，并對(duì)峰定性進(jìn)行確認(rèn)通過(guò)采取本部分的建議，您可以將效率、質(zhì)量和成本效益融入到您開(kāi)發(fā)的每個(gè)方法中。133方法開(kāi)發(fā)的基礎(chǔ)尋找最佳載氣平均線(xiàn)速度確定最佳平均線(xiàn)速度相當(dāng)容易，僅需要很少的嘗試過(guò)程。氫氣可在最短時(shí)間內(nèi)提供最佳分離度。氦氣可以提供相似的分離度，但是花費(fèi)的時(shí)間較長(zhǎng)。由于所需分析時(shí)間非常長(zhǎng)，因此不建議將氮?dú)馀c毛細(xì)管色譜柱一起使用。使用氦氣作為載氣時(shí)，嘗試將初始平均線(xiàn)速度設(shè)為30cm/sec。如果需要更高的分離度，請(qǐng)將速度減小到不小于25cm/sec；但是，分析時(shí)間會(huì)增
3、加。如果需要較短的分析時(shí)間，請(qǐng)將速度增加到35cm/sec，最高可增到40cm/sec。注意在較高的線(xiàn)速度下潛在的分離度損失?？赡苓€需要對(duì)柱溫箱溫度進(jìn)行微小的調(diào)整。使用氦氣作為載氣時(shí)，30-35cm/sec的平均線(xiàn)速度可用于許多分析。使用氫氣作為載氣時(shí)，嘗試將初始平均線(xiàn)速度設(shè)為60cm/sec。如果需要更高的分離度，則請(qǐng)將速度減小為不小于50cm/sec；但是，分析時(shí)間會(huì)增長(zhǎng)。如果需要的分析時(shí)間較短，則請(qǐng)將速度增加到70cm/sec，最高可增到80cm/sec。小心在這些較高速度下潛在的分離度損失?？赡苓€需要對(duì)柱溫箱溫
4、度進(jìn)行微小的調(diào)整。使用氫氣作為載氣時(shí)，60-70cm/sec的平均線(xiàn)速度可用于許多分析。將各種平均線(xiàn)速度下的色譜圖進(jìn)行比較，即可注意到保留和分離度的變化。有時(shí)，在同一色譜圖中不同的平均線(xiàn)速度適合不同的峰。在這些情況下，通常選擇折衷速度。除氮?dú)馔?，平均線(xiàn)速度較小的改變(<2cm/sec)很少會(huì)使分離度有很大變化。因此使用平均線(xiàn)速度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，兩次嘗試應(yīng)相差至少3-4cm/sec。134網(wǎng)上訂購(gòu)，請(qǐng)登錄www.agilent.com/chem/store/cn方法開(kāi)發(fā)的基礎(chǔ)進(jìn)樣器缺省設(shè)置250oC的進(jìn)樣器溫度足以適合幾乎所
5、有的樣品。對(duì)于諸如揮發(fā)性溶劑等揮發(fā)性樣品，建議進(jìn)樣器溫度使用150-200oC。對(duì)于諸如類(lèi)固醇、甘油三酸酯或表面活性劑等的高沸點(diǎn)樣品，建議進(jìn)樣器溫度使用275-300oC。要確保隔墊可以承受高的進(jìn)樣器溫度。大多數(shù)樣品可以使用多種進(jìn)樣器條進(jìn)樣器缺省設(shè)置件或參數(shù)進(jìn)行分析。這會(huì)產(chǎn)生一組大口徑直接進(jìn)樣分流不分流相當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)且適合多數(shù)樣品的進(jìn)樣器溫度：250oC250oC250oC襯管：直接閃蒸直管或沙漏形帶有底端限流的直管條件。由于默認(rèn)或標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)樣器設(shè)置進(jìn)樣：1μl1μl1μl適合80-90%的樣品，因此開(kāi)發(fā)新分流比：1:50方法時(shí)
6、這些條件是良好的起始條件。吹掃活化使時(shí)間：0.5分鐘柱溫箱溫度恒溫條件是指在GC運(yùn)行過(guò)程中柱溫箱保持溫度恒定。恒溫條件用于保留相似的溶質(zhì)。恒溫條件下，不相似溶質(zhì)的保留相差非常大。恒溫條件下，峰寬隨保留的增加而迅速增加（圖10a）。由于這些原因，因此恒溫條件僅適合于有限數(shù)量的分析。圖10a：恒溫條件色譜柱：DB-1，15mx0.25mm內(nèi)徑，0.25μm載氣：氦氣，30cm/sec柱溫箱：100oC恒溫C10C11C12C13C14C15C1601020304050Time(min.)網(wǎng)上訂購(gòu)，請(qǐng)登錄www.agilen
7、t.com/chem/store/cn135多數(shù)分析需要使用溫程序升溫。程序升溫是指在運(yùn)行期間以可控速率對(duì)柱溫箱進(jìn)行加熱。這可以更快速地分析保留不相似的溶質(zhì)，且隨著保留的增加峰展寬的程度很?。▓D10b）。程序升溫的主要缺點(diǎn)是方法開(kāi)發(fā)過(guò)程比較困難，且連續(xù)分析之間GC柱溫箱冷卻時(shí)間較長(zhǎng)。尋找分析的最佳升溫程序沒(méi)有秘密或訣竅。通常需要嘗試過(guò)程。調(diào)整升溫程序時(shí)的警告如果在不同升溫程序下的多次嘗試都未產(chǎn)生令人滿(mǎn)意的峰分離度，則可能需要使用其它的方法。一些化合物在任何合理的升溫程序下使用某種固定相也不能得到分離，因此可能改變升溫程
8、序時(shí)，在新的色譜圖中峰的需要使用其它固定相。有時(shí)，改善效率即可解決問(wèn)題。優(yōu)化載氣平均線(xiàn)速度，改善進(jìn)樣識(shí)別非常重要。峰保留順序可以隨著升器效率或使用更有效的色譜柱尺寸可提供所需的分離度。溫程序（稱(chēng)為峰倒置）的改變而變化。錯(cuò)誤地識(shí)別峰或峰明顯的損失（實(shí)際與其它峰共流出）通常是由未檢測(cè)到的峰倒置所致。對(duì)多數(shù)極性固定相尤為如此。圖10b:
