畢業(yè)論文--抗冷基因RLK轉(zhuǎn)化玉米自交系H99的研究

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1、吉林大學(xué)學(xué)士學(xué)位論文(設(shè)計(jì))承諾書本人鄭重承諾:所呈交的學(xué)士學(xué)位畢業(yè)論文(設(shè)計(jì)),是本人在指導(dǎo)教師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行實(shí)驗(yàn)、設(shè)計(jì)、調(diào)研等工作基礎(chǔ)上取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外,本論文(設(shè)計(jì))不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫的作品成果。對(duì)本人實(shí)驗(yàn)或設(shè)計(jì)中做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人或集體,均已在文中以明確的方式注明。本人完全意識(shí)到本承諾書的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。承諾人年月日中文摘要玉米是當(dāng)今世界一種重要的糧食、飼料和工業(yè)原料作物。利用生物技術(shù)創(chuàng)造的玉米新材料與人們的生活息息相關(guān)。我國東北地區(qū)農(nóng)業(yè)氣象災(zāi)害中低溫脅迫問題還較為嚴(yán)重并有待解決,若在玉米生長季節(jié)受到低溫冷害則會(huì)對(duì)玉米質(zhì)量和產(chǎn)

2、量造成影響。近年來,國內(nèi)外許多科研工作者都在從事抗冷玉米遺傳轉(zhuǎn)化的研究,其中農(nóng)桿菌介導(dǎo)法在玉米遺傳轉(zhuǎn)化體系方面取得了巨大的成果。玉米抗冷基因ZmRLK是高等植物中一類定位在質(zhì)膜上的類受體蛋白激酶(receptor-likeproteinkinase,RLK)?;蛉L由2028bp核苷酸序列組成,編碼675個(gè)氨基酸。能參與植物細(xì)胞內(nèi)的蛋白互作,在抗逆防御、脅迫應(yīng)答、信號(hào)感知和傳遞等過程中發(fā)揮重要作用。本研究以玉米優(yōu)良自交系H99胚性愈傷組織為受體,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)法將抗冷基因RLK轉(zhuǎn)入玉米,共侵染800塊玉米愈傷組織,經(jīng)雙丙氨膦篩選后進(jìn)行器官的分化,最終成苗450株,分子檢測(cè)獲得含有B

3、ar基因陽性植株24株,陽性率5.3%,目的基因RLK基因表達(dá)陽性植株10株,陽性率2.2%。本研究利用基因工程將抗逆基因轉(zhuǎn)入玉米優(yōu)良自交系,減少損害,使后代具有抵抗逆境的能力,從而更深入地研究各種調(diào)控因素玉米在生長發(fā)育中的影響,培育出適應(yīng)環(huán)境的抗冷玉米新種質(zhì),為提高玉米抗冷性能奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。關(guān)鍵詞:玉米;抗冷基因RLK;胚性愈傷組織;農(nóng)桿菌介導(dǎo)法IAbstractZeamaysisakindofimportantgrain,feedandindustrialrawmaterialcropintheworldtoday.People'slivesarecloselyrelatedto

4、theuseofbiotechnologytocreatenewcornmaterials.TheproblemoflowtemperaturestressinagrometeorologicaldisastersinnortheasternChinaisstillseriousandremainstobesolved.Duringthegrowingseason,ifthechillinginjuryinmaizeisaffectedbylowtemperature,thequalityandyieldofmaizewillbeaffected.Inrecentyears,many

5、scientificresearchworkersathomeandabroadareengagedinthetransformationofcoldmaizegeneticresearch,inwhichAgrobacterium-mediatedtransformationofmaizegenetictransformationsystemhasmadegreatachievements.Maizecold-resistantgeneZmRLKisaclassofreceptor-likeproteinkinase(RLK)locatedintheplasmamembrane.T

6、hefulllengthofthegeneconsistsof2028bpnucleotidesequenceencoding675aminoacids.Thegenecanparticipateinplantcellproteininteraction,andplaysanimportantroleintheanti-stressdefense,stressresponse,signalperceptionandtransmissionprocess.Inthisresearch,weusedtheH99embryogeniccallusofmaizeinbredlineasthe

7、recipient,andthecoldresistancegeneZmRLKwastransferredintomaizebyAgrobacteriumtumefaciens,and800maizecalliwereinfected.Screenedbydipropylamine,450strainswereharvestedafterorgandifferentiation.Theresultsshowedthatthetransformationof

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