植物根際促生菌的篩選及鑒定

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1、ResearchPaper研究報(bào)告微生物學(xué)報(bào)ActaMicrobiologicaSinica50(7):853-861;4July2010ISSN0001-6209;CN11-1995/Qhttp://journals.im.ac.cn/actamicrocn植物根際促生菌的篩選及鑒定1,2,3222*康貽軍,程潔,梅麗娟,殷士學(xué)1(揚(yáng)州大學(xué)農(nóng)學(xué)院,揚(yáng)州225009)2(揚(yáng)州大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院,揚(yáng)州225127)3(鹽城師范學(xué)院生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,鹽城224002)摘要:【目的】植物根際促生菌(PGPR)和植物的互作關(guān)系往往不穩(wěn)定,

2、PGPR菌群有可能提高菌株對野外環(huán)境的適應(yīng)性。為此,本文根據(jù)PGPR促生機(jī)制的多樣性,從不同植物根際土壤進(jìn)行了PGPR的篩選及鑒定?!痉椒ā渴紫龋凑展痰?、解磷、解鉀、拮抗6種常見病原真菌,同時能在植物根際定殖為基本初篩標(biāo)準(zhǔn),然后在實(shí)驗(yàn)室條件下測定初篩菌株的多項(xiàng)促生能力(PGP),最后通過生理生化試驗(yàn)和16SrRNA基因序列分析對所篩菌株進(jìn)行鑒定。【結(jié)果】從江蘇揚(yáng)州、鹽城等地土壤樣品篩選出14株P(guān)GPR,具有體外抑菌、產(chǎn)NH3、產(chǎn)IAA、產(chǎn)HCN、產(chǎn)嗜鐵素、解磷、溶鉀、固氮以及產(chǎn)抗生素等促生能力。分類鑒定結(jié)果顯示:7株屬于假單胞菌屬(P

3、seudomonas)、3株屬于類芽孢桿菌屬(Paenibacillus)、2株為芽孢桿菌屬(Bacillus)、1株為布克霍爾德氏菌屬(Burkholderia)、1株為歐文氏菌屬(Erwinia)?!窘Y(jié)論】所篩細(xì)菌具有多種促生能力,且能在根際定殖,為進(jìn)一步構(gòu)建多功能PGPR廣適菌群提供菌株資源。關(guān)鍵詞:植物根際促生菌;篩選;鑒定中圖分類號:Q939文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A文章編號:0001-6209(2010)07-0853-09植物根際促生菌(plantgrowth-promoting盡管PGPR的促生機(jī)制尚未完全闡明,但其作rhizoba

4、cteria,PGPR)指生存于植物根際、根表,并能用機(jī)制的多樣性被普遍認(rèn)同。主要包括:(1)產(chǎn)生[1]直接或間接地促進(jìn)或調(diào)節(jié)植物生長的微生物。調(diào)節(jié)植物生長的信號物質(zhì),如吲哚乙酸、赤霉素、細(xì)[4-5][6]過去幾十年間,報(bào)道了大量該類細(xì)菌,包括假單胞菌胞分裂素和乙烯;(2)非共生固氮;(3)產(chǎn)嗜屬(Pseudomonas)、固氮螺菌屬(Azospirillum)、固氮[7][8][9]鐵素、抗生素和氰化物抵抗病原菌;(4)溶解菌屬(Azotobacter)、克雷伯氏菌屬(Klebsiella)、腸桿磷礦物及其它養(yǎng)分[10-12]。一些P

5、GPR也能通過影菌屬(Enterobacter)、產(chǎn)堿菌屬(Alcaligens)、節(jié)桿菌[13]響共生固氮結(jié)瘤、結(jié)節(jié),從而間接促進(jìn)植物生長。屬(Arthobacter)、布克霍爾德氏菌屬(Burkholderia)、現(xiàn)今已開發(fā)成生物防治劑和研究熱門的PGPR菌株[1-4]桿菌屬(Bacillus)以及沙雷氏菌屬(Serratia)等。基本都是熒光假單胞菌和芽孢桿菌。PGPR既可幫助植物從環(huán)境中攝入某種養(yǎng)分,進(jìn)行除上述特征,PGPR在植物根際還應(yīng)具有競爭直接促生;也可通過減輕或預(yù)防不良環(huán)境因素(如[3]性,并能定殖于根際。然而,PGPR

6、和植物的互作病原菌、重金屬等)給植物造成的傷害,從而間接促關(guān)系往往并不穩(wěn)定,成功的實(shí)驗(yàn)室試驗(yàn)并不一定在生。[14]田間原位能成功。PGPR的這種不穩(wěn)定性源于不基金項(xiàng)目:國家自然科學(xué)基金(40871117)*通信作者。Tel:+86-514-87979575;Fax:+86-514-87978626;E-mail:sxyin@yzu.edu.cn作者簡介:康貽軍(1980-),男,江蘇如東人,講師,博士研究生,從事環(huán)境微生物學(xué)研究工作。E-mail:yijunkang@yahoo.com收稿日期:2010-03-09;修回日期:2010-

7、04-27854YijunKangetal./ActaMicrobiologicaSinica(2010)50(7)同的環(huán)境條件對細(xì)菌生長造成影響,從而制約其促YN8-2,引發(fā)水稻紋枯病)以及水稻串珠鐮刀菌生效果。這些環(huán)境因子包括氣象、土壤性質(zhì)或土著(FusariummoniliformeYN8-5,引發(fā)水稻惡苗病)孢[1]微生物活力等。子接種于PDA培養(yǎng)基中央,28℃±2℃培養(yǎng)48h因此,有必要將研究轉(zhuǎn)向篩選適應(yīng)于田間條件后,于該平板的一側(cè)劃線接種上述所挑出的菌株,繼[15]的菌株。其中一個可能的途徑就是根據(jù)PGPR續(xù)培養(yǎng)7d,觀察,

8、保留具備抑制病原菌能力的細(xì)菌。促生機(jī)制的多樣性,構(gòu)建適應(yīng)不同環(huán)境要求的多功1.2.2解磷、解鉀菌株初篩:通過透明圈試驗(yàn),篩選[18][19]能PGPR菌群。本文基于這一理念,從不同土壤樣具備解磷、解鉀能力的

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