高產(chǎn)酸性蛋白酶菌株的篩選及發(fā)酵條件研究

高產(chǎn)酸性蛋白酶菌株的篩選及發(fā)酵條件研究

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1、萬(wàn)方數(shù)據(jù)食品與發(fā)酵科技FoodandFermentationTechnology第46卷(第6期)Vo正46,No.6吉j2同/酸性蛋白酶菌株的篩選及發(fā)酵條件研究沈玉潔1,張明春2,向葦2,方尚玲1,陳茂彬1.(1.發(fā)酵工程省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,湖北工業(yè)大學(xué)生物工程學(xué)院,湖北武漢4300682.湖北白云邊酒業(yè)股份有限公司,湖北松滋434200)摘要:從白云邊高溫大曲中篩選得到1株產(chǎn)酸性蛋白酶活力較高的芽孢桿菌菌株,經(jīng)VI’rEK-32微生物自動(dòng)鑒定系統(tǒng)鑒定為地衣芽孢桿菌。通過(guò)對(duì)該茵株固體發(fā)酵條件的研究,發(fā)現(xiàn)其最適產(chǎn)酶條件為:最佳固體培養(yǎng)基為:固料:水為1:0.7,在固料中麩皮:黃豆

2、粉為1:0.8,pH5.0,培養(yǎng)溫度為45℃,發(fā)酵時(shí)間為52h,接種量為7%,該菌株固體發(fā)酵產(chǎn)酶活力達(dá)到1420.2U,g。關(guān)鍵詞:高溫大曲;酸性蛋白酶;發(fā)酵條件中圖分類(lèi)號(hào):Q939—3TS261.1TQ925.2文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):1674—506X(2010)06_0032-0004Screeningofacid-proteasestrainandstudyonitsfermentationconditionSHENYu-jiel,ZHANGMing—ehun2,XIANGWei2,FANGShang—lin91,CHENMao-binpf1.KeyLabofFermentat

3、ionEngineering(Min蠡tryofEducation),CollegeofBioengineering,HubeiUniversityofTechnology,Wuhaa,Hubei430068,China;2.HubeiBaiyunbianLiquorIndustryCo.Ltd.,Songzi,Hubei434200;)Abstract:Aacidproteaseproducingstrainw船fromhiishtemperatureDaquWaSidentified鸛BacilluslicheniformiswithVITEK-32microbeautomatic

4、appraisalsystem.Accordingtothestudyoffermentationcondition,wecanfinditsfittestconditionwereasbllows:theoptimumcompositionofthesolidsubstrateforfermentationWaSsolidmaterial:waterwas1:0.7,bran:beanflourwas1:O.8inthetotalsolidmatedal,initialpHis5.0,culturetemperatureis45℃,fermentationtimeis52h。7%fl

5、askinoculumssize.Underaboveconditions,theactivityofacid—proteaseproducedbythestrainWaS1420.2U/g.Keywords:hightemperatureDaqu;acid-protease;fermentationconditiondoi:10.39690.issn.1674-506X.2010.06-010白酒大曲中含有酸性蛋白酶,其在pH值為2.0—5.0的酸性條件下活力最強(qiáng)。在白酒生產(chǎn)過(guò)程中,高級(jí)醇主要來(lái)源于酸性蛋白酶分解蛋白質(zhì)所生成的氨基酸,酸性蛋白酶與白酒制曲、酒醅發(fā)酵以及白酒中香味物質(zhì)的

6、形成有著密切的關(guān)系。研究發(fā)現(xiàn)嗜熱芽孢桿菌有極強(qiáng)的酸性蛋白酶活性,且隨著品溫上升而增長(zhǎng),可以認(rèn)為它是醬香型高溫大曲生成酸性蛋白酶的主力軍【11,所以在白酒發(fā)酵中對(duì)于蛋白酶作用的研究意義重大。本試驗(yàn)采用平板初篩和三角瓶復(fù)篩得到1株產(chǎn)酸性蛋白酶活力較高的菌株,通過(guò)對(duì)其發(fā)酵條件的研究,進(jìn)一步了解其生物活性,為后續(xù)產(chǎn)醬香機(jī)理的研究提供理論基礎(chǔ),同時(shí)也為生產(chǎn)實(shí)踐提供一定的科學(xué)依據(jù)。1材料與方法1.1菌株從白云邊高溫大曲中預(yù)先篩選得到的5株耐高溫菌株1.2培養(yǎng)基收稿日期:2010—09—21基金項(xiàng)目:國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目“嗜熱芽胞桿菌轉(zhuǎn)座子突變體庫(kù)的構(gòu)建及產(chǎn)香機(jī)理研究”(31071594)資助。作者

7、簡(jiǎn)介:沈玉潔(1985一),女,碩士研究生,研究方向:工業(yè)微生物。通訊作者:陳茂彬,博士,教授,主要從事工業(yè)微生物、釀酒生物技術(shù)研究。萬(wàn)方數(shù)據(jù)第46卷(怒第160期)沈玉潔等:高產(chǎn)酸性蛋白酶菌株的篩選及發(fā)酵條件研究331.2.1分離培養(yǎng)基:采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基及種子培養(yǎng)基[211.2.2酸性蛋白酶初篩培養(yǎng)基干酪素0.4%,KH2P040.03%,MgS04"7H200.05%,F(xiàn)eS04·7H20o.01002%,NaCl0.1%,ZnS04

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