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《中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)內(nèi)注射抗阿片肽血清對神經(jīng)降壓素增強電針鎮(zhèn)痛的影響》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、生理學(xué)報,1999年4月,51(2),219~223219ActaPhysiologicaSinica研究簡報組胺對大鼠小腦皮層3浦肯野細胞的興奮作用33333田 樂 溫云卿 李紅召 熊化保 王建軍(南京大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)系,南京210093)摘 要在離體大鼠小腦腦片上觀察了組胺對小腦皮層第Ⅹ小葉浦肯野細胞的作用。組胺(3~100μmol/L)主要引起浦肯野細胞的興奮反應(yīng)(9414%,51/54),在少數(shù)細胞上也觀察到組胺2+2+所引起的放電抑制現(xiàn)象(516%,3/54)。用低Ca/高Mg人工腦脊液灌流腦片,不能取消浦肯野細胞對組胺的興奮反應(yīng)(n=4
2、)。H2受體對抗劑ranitidine(011~5μmol/L)能夠阻斷浦肯野細胞對組胺的興奮反應(yīng)(n=20),而H1受體對抗劑triprolidine(015~5μmol/L)不能夠(n=9)或僅輕微地(n=4)阻斷浦肯野細胞對組胺的興奮反應(yīng)。這些結(jié)果提示,組胺可能主要通過H2受體的介導(dǎo)對浦肯野細胞起興奮性調(diào)節(jié)作用,下丘腦2小腦組胺能神經(jīng)通路可能參與了小腦的某些軀體的和非軀體的功能調(diào)節(jié)。關(guān)鍵詞:組胺;小腦浦肯野細胞;下丘腦2小腦組胺能纖維;小腦腦片學(xué)科分類號:Q426 組胺作為一種神經(jīng)遞質(zhì)或調(diào)質(zhì)的概念已經(jīng)確立。免疫組織化學(xué)的研究表明,中樞組[1]
3、胺能神經(jīng)元的胞體主要集中在下丘腦的結(jié)節(jié)乳頭核,其纖維廣泛地投射到不同腦區(qū)。在小腦中也發(fā)現(xiàn)有來自于下丘腦的組胺能神經(jīng)纖維,它們廣泛地分布于小腦皮層和小腦[1,2]核團,以蚓部和絨球小結(jié)葉最為密集,從而構(gòu)成了下丘腦2小腦組胺能神經(jīng)通路。放射配體標記和分子生物學(xué)研究證實,大鼠小腦皮層及小腦核團均存在組胺H1和H2受[1,3]體。目前,對組胺能傳入纖維在小腦機能活動中的作用還不清楚。我們先前的工作證[4]明,組胺可以調(diào)制小腦苔狀纖維傳入系統(tǒng)接替神經(jīng)元顆粒細胞的電活動。本實驗旨在觀察組胺對小腦皮層主神經(jīng)元浦肯野細胞(Purkinjecell,PC)電活動的影響
4、和介導(dǎo)組胺對PC作用的受體機制,以了解下丘腦2小腦組胺能纖維在小腦皮層機能活動中的作用。15只SD大鼠(體重200~300g)在乙醚麻醉下被斷頭并取出小腦。小腦組織塊經(jīng)冷凍1998204201收稿 1998206207修回3國家自然科學(xué)基金(No139570246,39770249)、國家教委留學(xué)回國人員科研基金(No1952135)和江蘇省自然科學(xué)基金(No1BK97045)資助項目33現(xiàn)在地址:DepartmentofMolecularNeurobiology,BrainResearchInstitute,NiigataUniversity,J
5、apan333通訊作者?1995-2005TsinghuaTongfangOpticalDiscCo.,Ltd.Allrightsreserved.220生 理 學(xué) 報 51卷人工腦脊液(artificialcerebrospinalfluid,ACSF)沖洗后,用振動切片機切取350~400μm厚蚓部矢狀腦片。將腦片移入記錄浴槽中孵育30min后開始實驗。記錄浴槽中持續(xù)地灌流ACSF[(33±012)℃,pH714,流量2~3ml/min],并通以95%O2和5%CO2混合氣。ACSF中各溶質(zhì)的濃度(mmol/L)
6、分別為:NaCl124,KCl5,MgSO4113,KH2PO4112,NaHCO326,CaCl2214,2+2+glucose10。在部分實驗中使用了低Ca/高MgACSF灌流腦片,以阻斷突觸前神經(jīng)纖維2+2+[4]的遞質(zhì)釋放,此液的Ca濃度為0125mmol/L,Mg為410mmol/L。用玻璃微電極(內(nèi)充2mol/LNaCl,直流阻抗2~3MΩ)在小腦皮層第Ⅹ小葉細胞外記錄PC的單位電活動。待細胞的自發(fā)放電穩(wěn)定之后,向記錄浴槽灌流組胺(美國RBI公司,3~100μmol/L,持續(xù)1min),并觀察PC放電活動的變化。在部分對組胺產(chǎn)生反應(yīng)的細胞
7、上,進一步觀察高選擇性的組胺H1受體對抗劑triprolidine(美國Sigma公司,015~5μmol/L)和高選擇性的組胺H2受體對抗劑ranitidine(RBI公司,011~5μmol/L)對組胺所引起的PC放電活動變化的影響。在使用這兩種組胺對抗劑的實驗中,受體對抗劑要在灌流組胺前預(yù)先持續(xù)地灌流腦片15min。所有藥物均用ACSF新鮮配制。PC的放電信號經(jīng)放大并由窗口甄別器轉(zhuǎn)換成標準矩形脈沖后,輸入計算機作刺激后時間直方圖(采樣bin寬1s),以評價藥物對細胞的作用。數(shù)據(jù)的統(tǒng)計學(xué)處理用t測驗。圖 1PC對組胺的興奮反應(yīng)以及ranitidi
8、ne和triprolidine對PC興奮反應(yīng)的阻斷作用Fig.1Excitatoryresponsesofa