SSR標記技術(shù)在甘藍型油菜雜交種純度鑒定中的應(yīng)用

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1、第35卷第3期湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)vo1.35NO.32009年6月JournalofHunanAgriculturalUniversity(NaturalSciences)Jun.2009文章編號:1007.1032(2009)03-0229.04SSR標記技術(shù)在甘藍型油菜雜交種純度鑒定中的應(yīng)用曲亮,陳衛(wèi)江,李莓,王同華f湖南省作物研究所,湖南長沙410125)摘要:利用簡化的SSR標記技術(shù)對甘藍型油菜雜交種豐油701、豐油730和湘雜油4號的制種樣進行純度分析,并將豐油701收獲樣各單株的SSR分析結(jié)果與其育性表現(xiàn)進行了比對.結(jié)果篩選了38對SSR引物,其中引物Nal

2、0.D09在3個品種的不育系與恢復(fù)系間的擴增片段大小均存在差異.種植鑒定和SSR鑒定的純度比較分析表明,SSR技術(shù)得到的純度鑒定結(jié)果較種植鑒定的結(jié)果更為可靠.關(guān)鍵詞:油菜;雜交種;純度鑒定;微衛(wèi)星中圖分類號:$566.403.8文獻標識碼:AApplicationofSSRmolecularmarkertechniqueonpurityidentificationofhybridinrapeseedQULiang,CHENWei-jiang,LIMei,WANGTong-hua(HunanCropResearchInstitute,Changsha410125,China)Abst

3、ract:Purityidentificationofseedproductionsamplesofthreehybridrapeseed(BrasscanapusL.Jvarieties,F(xiàn)engyou701,F(xiàn)engyou730andXiangzayou4,wasconductedbysimplifiedSSRmolecularmarkertechnique,andtheidentificationresultsonprematurepodssamplesandmatureseedssamplesbytwoidentificationmethods,SSRandplanting

4、infield,werecompared.Andthen,SSRidentificationresultsandthefertilityperformanceofallplantscamefrommaturedseedsofFengyou701werecontrastedonebyone.Theseresultsshowedthat:Therewasabigdiferenceinthesizeoftheamplificationsegmentbetweenthe3varietiesfrombothfertilityandrestorelinesbyprimerNal0一D09sel

5、ectedfrom38SSRprimerpairs.ComparativeanalysisindicatedthatSSRmolecularmarkertechniqueproducedahigherveracityinpurityidentification.Keywords:rapeseed;hybrid;purityidentification;SSR油菜波里馬細胞質(zhì)雄性不育系的育性對溫度標記多態(tài)性相對較低,對于某些雜交組合難以將其反應(yīng)較敏感,在溫度變化較大的情況下易產(chǎn)生微親本與雜交種區(qū)分開[2】.隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅量花粉?,并以自交方式產(chǎn)生不育假雜種,對油菜速發(fā)展,分子

6、標記已經(jīng)逐漸被應(yīng)用到作物的種子純雜交制種影響較大,及時、有效地檢測雜交種中度鑒定工作中.SSR標記相對其他分子標記而言,不育母本植株的數(shù)量成為油菜雜交種純度鑒定的具有共顯遺傳、多態(tài)性高、易于檢測pJ等優(yōu)點,已關(guān)鍵.成為人們在作物遺傳多樣性和品種純度及真?zhèn)舞b目前室內(nèi)鑒定油菜雜交種純度主要是采用同工定方面首選的分子標記類型.朱四元等【4J的研究表酶和貯藏蛋白電泳技術(shù),但同工酶標記和貯藏蛋白明,不同類型抗蟲棉品種的遺傳多樣性的SSR分析結(jié)果是可靠的.詹慶才【5】利用SSR標記有效區(qū)分出收稿日期:2009.03.18了人為摻入水稻雜交種的假雜種.梅德圣等【6j利用基金項目:國家科技支撐計劃

7、項目(2o06BAD0lA04)SSR鑒定油雜8號種子純度,并與種植鑒定的結(jié)果作者簡介:曲亮(1976一),男,湖南澧縣人,助理研究員,主要從事油菜育種研究,qufeiyu@126.com.進行了比較,認為兩者結(jié)果非常接近.田筑萍等』230湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)2009年6月利用特殊SSR引物組合有效地對油菜種子的真實min,10000r/min離心5min,棄上清液,]31375%的性和純度進行了鑒定.筆者對SSR標記技術(shù)環(huán)節(jié)進乙醇,靜置1min,棄上清,置

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