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1、PCNA在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達及意義【關(guān)鍵詞】子宮內(nèi)膜摘要:目的探討增殖細胞核抗原（PCNA）在子宮內(nèi)膜癌中的表達及臨床意義。方法采用免疫組織化學(xué)技術(shù)對23例子宮內(nèi)膜癌及26例正常絕經(jīng)期子宮內(nèi)膜中PCNA表達水平進行檢測。每例切片3張，厚度4μm，分別進行HE染色及PCNA測定。結(jié)果PCNA在子宮內(nèi)膜癌中的表達明顯高于正常絕經(jīng)期子宮內(nèi)膜（P<0.01），與子宮內(nèi)膜癌組織學(xué)分級和手術(shù)分期相關(guān)。結(jié)論PCNA的表達與子宮內(nèi)膜癌的生物學(xué)行為有關(guān)，PCNA指數(shù)可作為預(yù)測子宮內(nèi)膜癌預(yù)后的指標。關(guān)鍵詞:子宮內(nèi)膜;腫瘤;增殖細胞核抗原
2、ExpressionofPCNAinendometrialcarcinomas.XUYong-zhong，DENGYing.（ZhangjiajieMunicipalPeople'sHospital，Zhangjiajie427000，Hunan，P.R.China）Abstract:ObjectiveToinvestigatetheexpressionsandeffectofproliferatingcellnuclearantigen（PCNA）inhumanendome-trialcarcinoma.Methods
3、ImmunohistochemistrywasusedtodetecttheexpressionofPCNAin23casesofendomtrialcarcino-ma.and26normalendometrialtissues.ResultsExpressionofPCNAinendometrialcarcinomawashigherthanthatinnormalen-dometrialtissues（P<0.01）wasassociatedwiththehistologicalgradingandsurgical
4、stagingofendometrialcarcinoma.Withthein-creaseoftumourgradeandstaging，thePCNAindexincreased.ConclusionPCNAmaybeinvolvedinthecarcinogenesisofen-dometrialcarcinoam.PCNAindexcanbeusefulprognosticatorsofendometrialcarcinoma.Keywords:Endometrial;Carcinoma;PCNA增殖細胞核抗原（
5、Proliferatingcellnuclearantigen，PCNA）又稱周期素，其表達合成與增殖細胞的增殖周期有關(guān)，其量的變化與DNA合成一致［1］。本研究應(yīng)用免疫組化技術(shù)對子宮內(nèi)膜癌組織進行PCNA檢測，探討PCNA的表達與子宮內(nèi)膜癌生物學(xué)行為的關(guān)系。1材料及方法1.1標本來源子宮內(nèi)膜癌標本23例，取自1998年11月～2004年1月在張家界市人民醫(yī)院診刮確定為子宮內(nèi)膜癌患者，其平均年齡（64±6）歲。正常絕經(jīng)期子宮內(nèi)膜26例，取自絕經(jīng)期子宮脫垂行子宮切除及絕經(jīng)期出血行診刮內(nèi)膜病理檢查正常者，平均年齡（59±4）
6、歲，無性激素應(yīng)用史。全部標本經(jīng)4%多聚甲醛固定，石蠟包埋，5μm連續(xù)切片。1.2試劑及免疫組化方法小鼠抗人單克隆抗體PCNA（PC10）及SP免疫組化試劑盒購自福州邁新生物制品有限公司，按試劑盒說明書操作，用PBS代替―抗作陰性對照，已知子宮內(nèi)膜癌陽性切片作陽性對照。免疫組化步驟如下:①切片脫蠟至水。②蒸餾水新鮮配置3%H2O2室溫5～10min滅活內(nèi)源性酶。蒸餾水洗3次。③微波修復(fù)抗原:將切片浸入0.01M枸櫞酸鹽緩沖液，pH6.0，微波爐加熱至96～100℃，持續(xù)20～30min，冷卻后進行下一步。④滴加抗原修復(fù)液，
7、室溫10min。蒸餾水洗3次。⑤滴加正常血清封閉液，室溫20min。去掉多余液體，不洗。⑥滴加適當稀釋的PCNA，室溫120min。0.01MPBS洗2min×3次。⑦滴加生物素化山羊抗小鼠IgG，20℃20min，0.01MPBS洗2min×3次。⑧滴加試劑SABC，20℃20min，0.01MPBS洗5min×4次。⑨DAB顯色。⑩蘇木素輕度復(fù)染。脫水、透明、封固。顯微鏡觀察［1，2］。1.3結(jié)果判斷免疫組化染色陽性反應(yīng)為棕黃色、黃色，PCNA定位于細胞核。PCNA用增殖指數(shù)（Prolif-erativeindex，
8、PI）表示，PI是指PCNA陽性細胞占腫瘤細胞的百分率，并將之分為四級，1%～25%為Ⅰ級，26%～50%為Ⅱ級，51%～75%為Ⅲ級，≥75%為Ⅳ級。其中Ⅰ～Ⅱ級為弱陽性，Ⅲ～Ⅳ級為強陽性。1.4統(tǒng)計學(xué)處理實驗數(shù)據(jù)均采用卡方檢驗進行統(tǒng)計學(xué)分析。2結(jié)果正常絕經(jīng)期子宮內(nèi)膜中可見部分細胞呈PCNA的低水平表達，子宮內(nèi)膜癌
