資源描述：
《雞類patatin脂肪酶家族》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、雞類patatin脂肪酶家族主要參考文獻JaniSaarela,etal.Thepatatin-likelipasefamilyinGallusgallusBMCGenomics.2008,9:281GregoryR.Steinberg,etal.AdipocytetriglyceridelipaseexpressioninhumanobesityAmJPhysiolEndocrinolMetab.2007,293:E958–E964MartinaSchweiger,etal.AdiposeTriglycerideLipaseandHormone-sensitiveL
2、ipaseAretheMajorEnzymesinAdiposeTissueTriacylglycerolCatabolismJBIOCHEM.2006,281(52):40236–40241研究背景脂肪組織是機體最大的能量儲存庫，當(dāng)機體需要能量的時候，儲存在脂肪組織的甘油三酯在脂酶的作用下被分解為游離脂肪酸,釋放入血液參與能量代謝。如果脂解作用出現(xiàn)障礙或病變，就會影響機體能量的平衡，進而引發(fā)肥胖和胰島素抵抗等疾病。卵生動物的卵黃是胚胎發(fā)育所需營養(yǎng)和調(diào)控因子的主要來源，而卵黃是脂質(zhì)和蛋白質(zhì)從母體肝臟轉(zhuǎn)運到卵泡中的卵子累積而成。研究背景胚胎正常生長依賴于從卵黃分泌到胚循
3、環(huán)當(dāng)中的脂類等營養(yǎng)物質(zhì)，參與該過程的基因主要有：脂肪酶、脂質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白和脂蛋白受體基因等，因此產(chǎn)蛋母雞是一個分析脂質(zhì)轉(zhuǎn)運和全身脂質(zhì)代謝精細調(diào)控分子機制的最好模型。而且產(chǎn)蛋母雞的脂質(zhì)代謝是一個研究激素調(diào)控的非常好的例子，因為雌激素不公直接調(diào)控合成卵黃前體物質(zhì)的基因在肝臟中的表達，還可能與脂肪分解和卵黃沉積中脂質(zhì)的轉(zhuǎn)運過程及胚胎卵黃利用有關(guān)。實驗動物1.Derco產(chǎn)蛋母雞：30-40周齡公雞：購自海德爾公司2.受精蛋在38度和70%的濕度條件下孵化11天后取出，取卵黃囊膜用于RNA抽提3.白色(<5mm)和黃色(5-12mm)有卵黃的小卵泡4.來自F5-F1級卵泡的顆粒細胞
4、5.白色脂肪組織：取自雞的腹腔6.其它雞組織樣品，液氮保存。實驗方法RT-PCR實時熒光定量PCRInsilicocharacterization實驗結(jié)果一.雞PNPLAs基因家族新基因鑒定及序列的獲得PNPLA2又叫Adiposetriglyceridelipase(ATGL),desnutrin,iPLA2ζ,和TTS-2，是一種分解TG產(chǎn)生DG的關(guān)鍵酶，它的功能非常保守。Comparativegeneidentification58(CGI58,ABHD5)是ATGL的激活蛋白，人CGI58的異常會導(dǎo)致叫作Chanarin-Dorfman綜合癥的脂肪代謝疾病，患
5、者的許多組織都含有富含TG的脂滴。雞CGI58蛋白與人的有79%的同源性，而與激活A(yù)TGL相關(guān)的氨基酸殘基完全保守。PNPLA3也叫adiponutrin和iPLA2ε。在禁食情況下，它的表達量受到嚴(yán)重抑制，而AGTL表達量會提高。PNPLA3位于細胞膜，而ATGL位于胞質(zhì)中。PNPLA4又叫g(shù)enesequence2(GS2)和iPLA2η。它和TGs水解有關(guān)，在人的所有組織中有PNPLA4的表達。PNPLA6又名neuropathytargetesterase(NTE)。在人的血液淋巴細胞和老鼠大腦中有表達，與膜脂的代謝及與神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞相互作用的信號傳導(dǎo)有
6、關(guān)。PNPLA7也叫NTE-relatedesterase(NRE)，與PNNPL6有很高的相似性。它高表達于前列腺、胰腺和脂肪組織。胰島素能抑制它的表達。有研究表明它是一種溶血磷脂酶。PNPLA8也叫iPLA2γ，中等水平表達于人的各種組織，在人脂肪細胞早期分化時表達上調(diào)。PNPLA9主要在脂肪組織和大腦中表達，脂肪細胞分化后期表達增加。從中國田鼠卵細胞分離的PNPLA9蛋白能夠分解二棕櫚酰磷脂酰膽堿，而錨蛋白重復(fù)序列是該酶活性所必需的。PNPLA1和PNPLA5類patatin脂酶蛋白結(jié)構(gòu)示意圖雞PNPLAs蛋白Patatin結(jié)構(gòu)域氨基酸序列比對圖二.PNPLAs
7、各基因表達情況三.Insilicocharacterization預(yù)測ATGL在382-389位氨基酸殘基處有一個核定位信號(VKKAKKKL)，而人的相應(yīng)氨基酸殘基VMRAKRKL并不被預(yù)測為枋定位信號。PNPLA1，6，7，8和9蛋白都含有一個或多個酪氨酸激酶磷酸化位點；而且PNPLA6和7還含有兩個環(huán)核苷酸結(jié)合位點。和人的PNPLA9相比，雞的PNPLA9含有幾個錨蛋白重復(fù)序列，表明可能與蛋白互相有關(guān)。除了PNPLA8外，其它PNPLAs和CGI58蛋白都是球狀蛋白。所有完全克隆的PNPLAs，只有PNPLA4含有信號肽。PNPLA4和7含有跨
