《分支桿菌屬》課件

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1、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)分枝桿菌屬結(jié)核分枝桿菌形態(tài)、染色、培養(yǎng)特性和抵抗力結(jié)核分枝桿菌感染的免疫特點(diǎn)結(jié)核菌素實(shí)驗(yàn)的原理、結(jié)果判斷和應(yīng)用微生物學(xué)檢查和防治原則麻風(fēng)分枝桿菌形態(tài)、染色和致病性結(jié)核分枝桿菌感染的免疫特點(diǎn)重點(diǎn)重點(diǎn)與難點(diǎn)難點(diǎn)*胞壁中含有大量脂質(zhì)——抗酸桿菌*大多生長緩慢*致病物質(zhì)為菌體成分，無內(nèi)外毒素，無芽孢、無鞭毛*致病多為慢性分枝桿菌屬特點(diǎn)分枝桿菌分類*結(jié)核分枝桿菌*牛分枝桿菌*麻風(fēng)分枝桿菌*非結(jié)核分枝桿菌部分為條件致病菌致病菌第一節(jié)結(jié)核分枝桿菌（Mycobacteriumtuberculosis）全球感染約20億現(xiàn)患2000萬死亡300萬/年我國活動(dòng)性肺結(jié)核患者500萬死亡13萬/年結(jié)核

2、病流行現(xiàn)狀一、生物學(xué)性狀*細(xì)長略彎（1～4）?m×0.4?m，有時(shí)呈分枝狀*有微莢膜、無芽胞、無鞭毛*齊-尼抗酸染色陽性形態(tài)與染色菌膜2.培養(yǎng)特性專性需氧*營養(yǎng)要求高改良羅氏培養(yǎng)基*生長緩慢3~4周形成可見菌落*兼性胞內(nèi)菌巨噬細(xì)胞不活潑糖發(fā)酵觸酶試驗(yàn)(H2O2)熱觸酶試驗(yàn)結(jié)核分枝桿菌-+-非結(jié)核分枝桿菌-++生化反應(yīng)較強(qiáng)，與脂質(zhì)有關(guān)四怕怕濕熱怕酒精怕紫外線怕抗癆藥物四抗抗干燥抗酸堿抗堿性染料抗青霉素等抵抗力*形態(tài)結(jié)構(gòu)*耐藥性*毒力——卡介苗變異性巴斯德研究所的Calmette和Guerin強(qiáng)毒的、致病性的牛分枝桿菌13年230代（BCG，BacilleCalmette-Guerin)弱毒

3、的、失去致病性的牛分枝桿菌減毒株卡介苗的研制二、致病性致病物質(zhì)多，主要為菌體成分*莢膜：有助于黏附、入侵、抗吞噬等。*脂質(zhì)：占60%，磷脂、脂肪酸、蠟質(zhì)D、硫酸腦苷脂。*蛋白質(zhì)：與蠟質(zhì)D結(jié)合后能引起遲發(fā)型超敏反應(yīng)，參與結(jié)核結(jié)節(jié)的形成。*多糖：使中性粒細(xì)胞增多，引起局部病灶細(xì)胞浸潤。*核酸致病物質(zhì)*磷脂：刺激單核細(xì)胞增生，抑制蛋白酶活性，使病灶組織不分解，并使病灶中的巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)轭惿掀ぜ?xì)胞，從而形成結(jié)核結(jié)節(jié)和干酪樣壞死。*脂肪酸（分枝菌酸）：與抗酸性有關(guān)索狀因子：破壞線粒體膜及酶類，抑制白細(xì)胞游走，引起慢性肉芽腫。*蠟質(zhì)D：有佐劑作用，可激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生遲發(fā)型超敏反應(yīng)，引起慢性肉芽腫。*硫酸

4、腦苷脂：抑制巨噬細(xì)胞內(nèi)吞噬體與溶酶體融合，使該菌成為兼性胞內(nèi)寄生菌。結(jié)核病*傳播途徑：呼吸道、消化道、皮膚損傷部位等*多組織器官結(jié)核病肺外感染肺部感染原發(fā)感染原發(fā)后感染*基本病變：結(jié)核結(jié)節(jié)所致疾病原發(fā)綜合征：原發(fā)病灶一淋巴管炎一淋巴結(jié)炎啞鈴狀雙極現(xiàn)象原發(fā)感染（結(jié)核結(jié)節(jié)）局部炎癥結(jié)核性腦膜炎內(nèi)源性感染巨噬細(xì)胞吞噬呼吸道肺細(xì)菌繁殖菌體成分代謝產(chǎn)物滲出性炎癥增生性炎癥變質(zhì)性炎癥好轉(zhuǎn)吸收鈣化擴(kuò)散粟粒性結(jié)核內(nèi)源性（原發(fā)感染殘留菌）外源性（外來結(jié)核菌侵入）肺干酪樣壞死結(jié)核結(jié)節(jié)局部病變發(fā)生快不易擴(kuò)散繼發(fā)感染原發(fā)感染原發(fā)后感染易發(fā)人群兒童成年人是否感染過否是免疫力和超敏反應(yīng)無有病變特點(diǎn)反應(yīng)輕、短暫病灶反

5、應(yīng)強(qiáng)烈播散（淋巴、血行）易播散不播散原發(fā)感染與原發(fā)后感染特點(diǎn)比較三、免疫性與超敏反應(yīng)*有菌免疫：或稱傳染性免疫（infectionimmunity）*細(xì)胞免疫：致敏T淋巴細(xì)胞、激活的巨噬細(xì)胞*郭霍現(xiàn)象（Koch’sphenomemon）*結(jié)核菌素試驗(yàn)：Ⅳ型遲發(fā)型超敏反應(yīng)免疫性細(xì)胞免疫與超敏反應(yīng)同時(shí)存在結(jié)核分枝桿菌注入健康豚鼠皮下10~14天注射部位緩慢發(fā)生潰爛，病灶深而不易愈合，附近淋巴結(jié)腫大，細(xì)菌擴(kuò)散至全身同量結(jié)核桿菌注入康復(fù)結(jié)核的豚鼠皮下1~2天注射局部迅速出現(xiàn)潰爛，淺而易愈合，附近淋巴結(jié)不腫大，細(xì)菌也很少擴(kuò)散大量結(jié)核桿菌注入康復(fù)的豚鼠皮下局部及全身嚴(yán)重的超敏反應(yīng)甚至死亡第二次初次第

6、三次郭霍現(xiàn)象*原理：皮膚遲發(fā)型超敏反應(yīng)*結(jié)核菌素試劑：舊結(jié)核菌素（OT）、純蛋白衍生物（PPD）兩種PPD：PPD-C；BCG-PPD*方法：取PPD-C和BCG-PPD各5單位分別注入兩前臂皮內(nèi)，48～72h后觀察結(jié)果結(jié)核菌素試驗(yàn)＞5mm，陽性PPD-C＞BCG-PPD，感染PPD-C＜BCG-PPD，卡介苗接種≥15mm，強(qiáng)陽性活動(dòng)性結(jié)核＜5mm，陰性未感染感染的初期老年人患嚴(yán)重傳染病的患者*結(jié)果分析紅腫硬結(jié)*應(yīng)用1）卡介苗接種對象及免疫效果的測定2）嬰幼兒結(jié)核病診斷3）測定細(xì)胞免疫功能狀況4）流行病學(xué)調(diào)查四、微生物學(xué)檢查法*標(biāo)本采集：痰、尿、糞、腦脊液及胸、腹水、血等*直接鏡檢：抗

7、酸染色法或熒光抗體染色法*分離培養(yǎng)：羅氏培養(yǎng)基培養(yǎng)3~4周*實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：豚鼠*快速診斷：PCR、ELISA五、防治原則*發(fā)現(xiàn)和治療痰菌陽性者*新生兒接種卡介苗預(yù)防直接面視下的督導(dǎo)化療（DirectlyObservedTreatmentStrategy，DOTS）*標(biāo)準(zhǔn)化短程化療方案：聯(lián)合使用一組特效抗結(jié)核藥物*六項(xiàng)原則：早期、聯(lián)合、規(guī)律、適量、全程、督導(dǎo)一線異煙肼利福平鏈霉素吡嗪酰胺乙胺丁醇二線阿米卡星卷曲霉素丙硫異煙胺氧氟沙星帕星肼