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1、Y-干擾素釋放試驗的臨床應(yīng)用Y干擾素釋放試驗(interferon．1releaseassays），IGRA是檢測結(jié)核分枝桿菌(MTB)特異性抗原刺激T細胞產(chǎn)生的Y干擾素，以判斷是否存在MTB的感染。IGRAs可彌補PPD試驗的不足，目前多個國家已將其用于診斷MTB潛伏感染(1atenttuberculosisinfection，LTBI)，我國部分醫(yī)院也已常規(guī)開展此項檢測受到MTB抗原刺激致敏的T細胞再次遇到同類抗原時可產(chǎn)γ干擾素IGRAs通過檢測全血或分離自全血的單核細胞在MTB特異性抗原刺激下產(chǎn)生的γ干擾素，判斷受試者是否感染MTB目前國際上較成熟的IGRAs有2種：(1)全血法：采用
2、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測全血中致敏T細胞再次受到MTB特異性抗原刺激后釋放的1．干擾素水平，稱之為全血檢測或結(jié)核感染T細胞免疫檢測；(2)細胞法：采用酶聯(lián)免疫斑點技(ellzymelinkedimmunospotassay，ELISPOT)測定在MTB特異性抗原刺激下，外周血單個核細胞中能夠釋放1一干擾素的效應(yīng)T細數(shù)量，稱之為細胞檢測或結(jié)核感染T細胞檢測。上述2種檢測方法的原理類似，檢測技術(shù)和操作程序略有不同，均采用MTB的RDl區(qū)基因編碼抗原多肽作為特異性抗原，主要相對分子質(zhì)量為6000的早期分泌抗原靶(ESAT-6)和相對分子質(zhì)量為10000的培養(yǎng)濾液蛋白(CFP一10)抗原或
3、抗原多肽T-SPOT試驗γ干擾素檢測陰性γ干擾素檢測陽性TB抗原多肽T細胞活化T細胞γ干擾素30IGRAs的結(jié)核特異免疫抗原SAT-6和CFP一10主要存在于MTB復(fù)合群，而在卡介苗和大多數(shù)NTM中缺失，因此IGRAs的特異度較好。但ESAT-6和CFP—10也存在于少數(shù)幾種NTM中，如堪薩斯分枝桿菌、海分枝桿菌、蘇爾加分枝桿菌、轉(zhuǎn)黃分枝桿菌和胃分枝桿，故IGRAs陽性不能排除上述幾種NTM感染的可能。PPD試驗與IGRAs的對比PPD試驗作為診斷MTB感染的傳統(tǒng)方法，具有操作簡便、成本低廉的特點，至今仍廣泛使用，但該方法使用的PPD抗原成分復(fù)雜，易受卡介苗接種和非結(jié)核分枝桿菌(nontub
4、erculosismyeobacterium，NTM)的影響，特異度較低，且對人免疫缺陷病毒(HIV)感染及重癥疾病患者等免疫功能受損人群的敏感度不足。薈萃分析結(jié)果顯示，在HIV感染人群中，IGRAs的敏感度并未高于PPD試驗，但IGRAs(尤其是細胞檢測)受CD4+T細胞數(shù)量的影響小于PPD試驗，這可能因為IGRAs檢測過程已對單個核細胞數(shù)量進行了標(biāo)準(zhǔn)化，即在檢測程序上消除了淋巴細胞數(shù)量減少對檢測結(jié)果的影響PPD陽性對以下情況無法區(qū)分卡介苗預(yù)防接種√非結(jié)核分枝桿菌感染√LIBI√活躍結(jié)核病√結(jié)核病治愈、自愈后√IGRAs陽性卡介苗預(yù)防接種ⅹ大多數(shù)非結(jié)核分枝桿菌感染ⅹLIBI√活躍結(jié)核病√結(jié)
5、核病治愈、自愈后√2010年全國結(jié)核病流行病抽樣調(diào)查結(jié)核分枝桿菌復(fù)合群77.1%，非結(jié)核分枝桿菌22.9%2010年廣州結(jié)核病流行病抽樣調(diào)查：非結(jié)核分枝桿菌19.3%，且其中前5位IGRAs為陰性的IGRAs的敏感性和特異性美國FDA認證臨床實驗數(shù)據(jù)：經(jīng)培養(yǎng)確診的結(jié)核病患者樣本183例敏感性95.6%（175∕183）306例入伍新兵特異性97.1%（297∕306）對活動性結(jié)核病的輔助診斷：PPD試驗和IGRAs均無法區(qū)分LTBI和活動性結(jié)核病患者。國內(nèi)IGRAs的研究數(shù)據(jù)顯示其敏感度和特異度差別較大，敏感度為53％一98％，特異度為60％～90％(或以上)，但多數(shù)文獻報道的敏感度和特異度
6、>70％，提示IGRAs的特異度優(yōu)于PPD試驗。IGRA用于診斷肺結(jié)核：深圳第三人民醫(yī)院的結(jié)果例數(shù)（n）ELISPOT(+)n(%)結(jié)核患者24461846（75.47）急性播散型肺結(jié)核5851（87.93）繼發(fā)性肺結(jié)核18381389（75.97）結(jié)核性胸膜炎538428（79.55）結(jié)核性腦膜炎5940（67.80）其他肺外結(jié)核356275（77.25）陳舊性肺結(jié)核5624（42.86）健康對照42265（14.20）新發(fā)肺結(jié)核密切接觸者384136（35.4）IGRAs檢測活動性結(jié)核病的敏感度高于TSTIGRAs敏感性還未高到陰性可以排除結(jié)核病的程度存在假陰性，陰性并不能排除結(jié)核病IG
7、RAs檢測結(jié)核疑似病例的特異性不高IGRAs不能區(qū)分活動性肺結(jié)核和潛伏期結(jié)核感染（陽性不一定是活動性肺結(jié)核）存在假陰性，陰性并不能排除結(jié)核病IGRAs陽性時不能肯定診斷，陰性時不能排除診斷WHO不推薦中、低收入國家在診斷活躍結(jié)核感染時使用IGRAs中國的國情適用IGRAs嗎？中國結(jié)核病發(fā)病率高WHO不推薦中、低收入國家在診斷活躍結(jié)核感染時使用IGRAsY-干擾素釋放試驗在中國應(yīng)用的建議我國一方面是結(jié)核病高負擔(dān)
