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1、第四節(jié)顯微鑒定顯微鑒定(microscopicalidenifi-ction)是利用顯微鏡來觀察生藥的組織構(gòu)造、細(xì)胞形狀以及內(nèi)含物,描述顯微特征,制定顯微鑒別依據(jù),用以鑒定生藥品種和質(zhì)量的重要手段之一。一、顯微鑒定的常用方法顯微鑒定組織鑒定:觀察藥材的切片或磨片,鑒別其組織特征,適合于完整的藥材或粉末特征相似的同屬藥材的鑒別;粉末鑒定:觀察藥材的粉末制片或解離片鑒別其細(xì)胞分子及內(nèi)含物的特征,適合于破碎、粉末狀藥材或中成藥的鑒別。鑒定者:需具有植(動)物解剖的基本知識,掌握制片的基本技術(shù)。鑒定時:根據(jù)觀察的對象和目的,選擇具有
2、代表性的藥材,制備不同的顯微制片,依法進(jìn)行鑒別。植物性生藥根、根莖、莖藤、皮、葉等類,制作橫切片觀察,必要時制縱切片;果實、種子類須作橫切片及縱切片觀察;木類須觀察橫切、徑向縱切及切向縱切三個面。鑒定葉、花、果實、種子、全草等類生藥,可取葉片、萼片、花冠、果皮、種皮制表面片,以觀察各部位的表面(皮)特征??蓪⑸幾鞣勰┢M(jìn)行觀察??芍平怆x組織片,以觀察某些細(xì)胞組織,如纖維、石細(xì)胞、導(dǎo)管等。對于中成藥,可直接取目的物,選用不同試液制片,觀察粉末的具有鑒別意義的組織、細(xì)胞及細(xì)胞后含物顯微特征。切片類型橫切片或縱切片切片方法徒手切
3、片:10~20μm,最為簡便、快速,較為常用。石蠟切片:便于教學(xué)用?;咔衅河袑S脵C器切制。冰凍切片:宜于科研,不利于教學(xué),無法染色。解離組織片:可用氫氧化鉀法,使細(xì)胞間質(zhì)溶解,細(xì)胞分離后觀察目的物。表面片:葉、花、果實、種皮等多用,可觀察各部位的表皮特征。粉末片:水合氯醛透化片;水合氯醛不透化片;醋酸甘油片或稀甘油片或水裝片。磨片:觀察礦物藥,相當(dāng)于固定片。目鏡測微尺觀察細(xì)胞和后含物時,常需要測量其直徑、長短(以μm計),作為鑒定依據(jù)之一,測量可用目鏡測微尺進(jìn)行。先將目鏡測微尺用載臺測微尺標(biāo)化,計算出每一小格的μm數(shù),應(yīng)
4、用時將測得物的小格數(shù),乘以每一小格的μm數(shù),即得所欲測定物的大小。二、顯微鑒定要點(一)根類生藥1、根類生藥的組織構(gòu)造雙子葉植物:多為次生構(gòu)造,表層為木栓組織;皮層一般已不存在;栓內(nèi)層發(fā)達(dá)呈皮層樣,稱次生皮層;韌皮部較發(fā)達(dá);形成層環(huán)多明顯;木質(zhì)部由導(dǎo)管、管胞、木纖維、木薄璧細(xì)胞及木射線組成;中央大多無髓。少數(shù)為初生構(gòu)造,皮層寬,中柱小,木質(zhì)部束及韌皮部束數(shù)目少,相間排列,初生木質(zhì)部呈星芒狀,一般無髓。有異常構(gòu)造(三生構(gòu)造):何首烏根的形成層環(huán)外方有數(shù)個復(fù)合維管束;牛膝根有數(shù)輪同心排列的維管束(維管束環(huán)的束間形成層不明顯);商
5、陸根有數(shù)輪同心排列的形成層環(huán)及其所形成的三生構(gòu)造;單子葉植物無木栓組織,其表皮細(xì)胞外壁有時增厚,也有表皮發(fā)育成數(shù)列根被細(xì)胞,壁木栓化或木化;皮層寬廣,占根的大部分,內(nèi)皮層凱氏點通常明顯;中柱小,木質(zhì)部束及韌皮部束數(shù)目多,相間排列成一圈。中央有髓。根類生藥常有分泌組織,大多分布于韌皮部,有乳管、樹脂道、油室或油管、油細(xì)胞等。根類生藥中常有各種草酸鈣結(jié)晶,如簇晶、方晶、砂晶或針晶等,兼有簇晶與針晶或砂晶與簇晶共生。纖維、石細(xì)胞及淀粉粒、菊糖的有無及其形狀亦應(yīng)注意。2、根類粉末生藥的觀察木栓組織:多見,注意木栓細(xì)胞表面觀的形狀、顏
6、色、壁的厚度,有的可見木栓石細(xì)胞(如黨參)。導(dǎo)管:一般較粗,注意其類型、直徑、導(dǎo)管分子的長度及末端壁的穿孔的形狀及排列等。石細(xì)胞:應(yīng)注意形狀、大小、細(xì)胞壁增厚形態(tài)和程度、紋孔形狀及大小、孔溝密度等特征。纖維:觀察時注意纖維的類型、形狀、長短粗細(xì)等;注意纖維束的周圍細(xì)胞是否含結(jié)晶形成晶鞘纖維。分泌組織:注意分泌細(xì)胞、分泌腔(室)、分泌管(道)及乳汁管等類型、形狀、顏色、周圍細(xì)胞的排列及形態(tài)等特征。結(jié)晶:大多為草酸鈣結(jié)晶,偶有含硅質(zhì)塊的,應(yīng)注意結(jié)晶的類型、大小、排列及含晶細(xì)胞的形態(tài)等。淀粉粒:一般較小,應(yīng)注意淀粉粒的多少、形狀、
7、類型、大小、臍點形狀及位置、層紋等特征。(二)根莖類生藥1、根莖類生藥的組織構(gòu)造根據(jù)中柱、維管束的類型,區(qū)別其為蕨類植物、雙子葉植物或單子葉植物的根莖。蕨類植物根莖:外層為厚壁性的表皮及下皮細(xì)胞,基本組織較發(fā)達(dá)。中柱的類型有:原生中柱、雙韌管狀中柱及網(wǎng)狀中柱等。雙子葉植物根莖:有木栓組織;皮層中有時可見根跡維管束;中柱維管束無限外韌型;中心有髓。少數(shù)種類有三生構(gòu)造,髓部有復(fù)合維管束。單子葉植物根莖:外層為表皮;皮層中有葉跡維管束;內(nèi)皮層明顯;中柱中散有多數(shù)有限外韌維管束,也有周木維管束(如菖蒲);多含草酸鈣針晶束,存在于黏液
8、細(xì)胞中。2、根莖類粉末生藥的觀察:注意鱗莖、塊莖、球莖常含多量較大的淀粉粒,其形狀、大小、臍點、層紋以及復(fù)粒等特征是鑒別的重要依據(jù);鱗莖的鱗葉表皮??刹煲姎饪?;單子葉植物根莖較易見到環(huán)紋導(dǎo)管;蕨類植物根莖一般只有管胞,無導(dǎo)管。(三)莖藤類生藥1.莖藤類生藥的組織構(gòu)造根據(jù)維管束的類型及排列: