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1、電泳儀器操作主要內容電泳儀、電泳槽、凝膠成像系統(tǒng)和微波爐的作用，工作原理，操作關鍵技術，以及注意事項。電泳原理電泳的定義：帶電粒子在電場的作用下，向著與其電性相反的電極方向移動的現(xiàn)象。電泳的基本原理：不同的物質在一定的電場強度下，由于所帶電荷不同，因此受到的引力不同，向相反電極泳動速度不同進而達到分離目的。電泳技術：利用帶電粒子在電場中移動速度不同而達到分離的技術稱為電泳技術。電泳的作用：主要用于蛋白質、核酸、同工酶、氨基酸、多肽等物質的分離；還可用于對分離物質的純度和分子量的測定。電泳的分類根據電泳分子的大小分為：凝膠電泳：
2、主要用于小蛋白質分子和核酸分子的分離毛細管電泳：主要用于糖類和大蛋白分子的分離根據電泳方法，大致可分為3類：顯微電泳自由界面電泳區(qū)帶電泳：應用最廣泛電泳的分類區(qū)帶電泳按支持物的物理性狀不同，可分為：(1）紙電泳：支持物為濾紙;(2）粉末電泳：如纖維素粉，淀粉，玻璃粉電泳；(3）凝膠電泳：如瓊脂，瓊脂糖，硅膠，淀粉膠，聚丙烯酰胺凝膠電泳；(4）緣線電泳：如尼龍絲，人造絲電泳區(qū)帶按支持物的裝置形式不同，區(qū)帶電泳可分為：(1）水平板電泳：支持物水平放置，是最常用的電泳方式；(2）垂直板電泳：聚丙烯酰胺凝膠可做成垂直板式電泳。(3）柱
3、狀（管狀）電泳：聚丙烯酰胺凝膠可灌入適當?shù)碾娪竟苤凶龀晒軤铍娪?。電泳的分類根據蛋白質分離的目的分為：單向電泳：只在聚丙烯酰胺凝膠上分離。適于分離種類較少的蛋白。雙向電泳：第一向使用預制膠條進行蛋白質的等電聚焦分離，第二向將膠條中經過第一向分離的蛋白質轉移到聚丙烯酰胺凝膠上，根據蛋白質的分子量大小與第一向相垂直分離。用于蛋白質的分離，可將提取的蛋白質混合物中數(shù)千種蛋白質同時分離開。單向與雙向電泳條帶比較單向電泳條帶雙向電泳條帶電泳實驗過程水平板電泳：制膠——插試樣格（梳子）——取試樣格——點樣——電泳——染色——凝膠成像（對電泳
4、結果進行觀察記錄和分析）。垂直板電泳：連續(xù)電泳：直接灌分離膠配制凝膠溶液——灌膠——不連續(xù)電泳：灌分離膠——濃縮膠——插試樣格——取試樣格——點樣——電泳——染色——脫色——成像觀察和記錄。儀器一、電泳儀作用：在電泳中提供電壓與電流。1、電泳儀的分類根據電泳儀的電壓范圍可將電泳儀分為3類：（1）常壓電泳儀（600V）：用于凈電荷和SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳；（2）高壓電泳儀（3000V）：用于載體兩性電解質等電聚焦電泳和DNA測序；（3）超高壓電泳儀（3000～5000V）：用于毛細管電泳。根據控制程序分為：單恒（恒壓）、雙恒
5、（恒流和恒壓）、三恒（恒流、恒壓、恒功率）。(不論是單恒、雙恒、還是三恒，儀器工作時任何情況下只能穩(wěn)U、I、P中的一種參數(shù))。毛細管電泳儀超高壓電泳儀（高效毛細管電泳儀)常壓電泳儀高壓電泳儀梯度電泳儀(用于土壤微生物的分離）生物分析儀（微流控芯片電泳儀）2、操作方法這里以我們實驗室常用的北京六一儀器廠生產的DYY-12型電腦三恒多用電泳儀為例說明。U、I、P的有效輸入范圍：U：4-1000v（常壓電泳儀）I：4-500mAP：4-300w可以同時連接4組電泳槽（并聯(lián)），此時應選擇穩(wěn)壓輸出，當接多個電泳槽時，則儀器顯示的電流數(shù)值
6、為各槽電流之和。電極插座（1）設置工作程序方法有三種：①用鍵盤輸入新的工作程序，主要使用該方法（見后邊介紹）。②按〔讀取〕鍵，取出保存在0中的上次工作程序，然后按確認鍵。（該電泳儀默認保存上次程序）③按〔讀取〕、〔0-9〕、〔確定〕鍵，取出保存在(0-9)中的工作程序。取出保存的程序，必須檢查一遍，確認無誤后才可啟動儀器工作。（2）按鍵操作A、﹝模式﹞鍵用于選擇設置工作模式。每按一下模式鍵，其工作方式按下列順序改變：STD（標準）TIME(定時)VH(伏時)STEP(分步)標準模式——到時不關輸出，只是蜂鳴提示，需人工關機；定
7、時模式——到時關輸出；伏時模式——輸出電壓與工作時間的乘積達到設定值時關輸出；分步模式——輸出按步（１-９）及模式（定時或伏時）分別設定及執(zhí)行。通常使用標準模式和定時模式。B、﹝選擇﹞鍵用于選擇設置U、I、P、T的參數(shù)設置時先看U是否為反顯狀態(tài)，每按一次移到下一個參數(shù)，移動順序為：U=I=P=T=C、﹝清除﹞鍵：可以清除有反顯提示的參數(shù)數(shù)值。如果輸入錯誤，可以按﹝清除﹞鍵，再重新輸入。D、﹝啟動﹞鍵：確認參數(shù)無誤后，啟動電泳儀輸出程序。E、﹝+﹞鍵：在輸出情況下遞增反顯U、I、P、T的數(shù)值；每按一次遞增一個數(shù)字，弱按住不放，則
8、連續(xù)快速遞增。F、﹝-﹞鍵：在輸出情況下遞減反顯U、I、P、T的數(shù)值；每按一次遞減一個數(shù)字，弱按住不放，則連續(xù)快速遞減。G、﹝繼續(xù)﹞鍵：當電泳過程中出現(xiàn)人為中斷停機，并希望繼續(xù)接著輸出工作，可以按﹝繼續(xù)﹞鍵，此后電泳儀接著前面的工作時間繼續(xù)工作。工作結束時，儀器顯示“End”
