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《高效液相色譜_串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定水產(chǎn)品中喹乙醇及其代謝物》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、知識(shí)與經(jīng)驗(yàn)高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定水產(chǎn)品中喹乙醇及其代謝物112*11陳永平,張素青,林黎明,李春青,李兆千(1.農(nóng)業(yè)部漁業(yè)環(huán)境及水產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心,天津300221;2.山東省出入境檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心,青島266002)中圖分類(lèi)號(hào):O657.62文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B文章編號(hào):1001-4020(2011)09-1108-03喹乙醇(OQX)是以鄰硝基苯胺為原料合成的蒸發(fā)儀。一種抗菌促生長(zhǎng)劑,因其具有良好的廣譜抗菌效果、OQX及MQCA標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液:稱(chēng)取OQX、提高畜禽飼料消化率、促生長(zhǎng)作用而被廣泛應(yīng)用于MQCA標(biāo)準(zhǔn)品各1.0mg,用乙腈-甲醇-
2、0.1%(體積[1]獸藥及飼料添加劑中。但隨著對(duì)OQX毒性的深分?jǐn)?shù),下同)甲酸水溶液(8+7+85)的混合溶液溶解-1入研究與評(píng)價(jià),普遍認(rèn)為它是一種基因毒劑和生殖并定容至10mL容量瓶中。配制成100mgL誘變劑,有致突變、致畸作用,并且在動(dòng)物體內(nèi)會(huì)產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。生蓄積毒性,可通過(guò)食物鏈間接地對(duì)人體健康構(gòu)成pH8磷酸鹽緩沖溶液:稱(chēng)取磷酸二氫鈉12g[2-3]和磷酸氫二鈉14.2g,加水溶解,用1molL-1氫威脅。3-甲基喹啉-2-羧酸是喹惡啉在動(dòng)物體內(nèi)[4]氧化鈉溶液調(diào)pH至8,加水定容至1L,配成的代謝產(chǎn)物,以喹諾酮和OQX為主要代表。攝-1入OQX飼料添
3、加劑后,會(huì)在肌肉、腸道、腎臟等組0.1molL磷酸鹽緩沖溶液?？椫写x生成3-甲基-喹啉-2-羧酸,這種代謝物對(duì)乙腈、甲醇為色譜純,其余試劑為分析純,試驗(yàn)[5]用水為二次蒸餾水。機(jī)體毒性極大,美國(guó)規(guī)定豬肉中OQX含量不得高于4gkg-1,歐盟規(guī)定OQX及喹乙醇代謝物1.2儀器工作條件1.2.1色譜條件(MQCA)不得檢出。AglientXDBC18色譜柱(2.1mm150mm,目前國(guó)內(nèi)外報(bào)道了液相色譜法、氣相質(zhì)譜法、液3.5m),流動(dòng)相:A為乙腈,B為甲醇,C為0.1%相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)OQX或MQCA,其中關(guān)于飼料-1甲酸水溶液;流量200Lmi
4、n,進(jìn)樣量20L,柱中OQX,雞肉、牛肉、豬肉組織中MQCA的報(bào)道較多[6-9]。高效液相色譜-紫外檢測(cè)器測(cè)定OQX及溫30。梯度洗脫程序見(jiàn)表1。MQCA,存在基質(zhì)復(fù)雜、干擾較大,且不能定性的不表1梯度洗脫程序Tab.1Programofgradientelution足。本工作建立了高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法同時(shí)時(shí)間流動(dòng)相體積分?jǐn)?shù)/%測(cè)定水產(chǎn)品中OQX及MQCA的方法,用外標(biāo)法/minABC定量。0.0106841試驗(yàn)部分4.01068410.01370171.1儀器與試劑12.0133057ThermoFinniganTSQQuantumAccess液相
5、1.2.2質(zhì)譜條件色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀,氮吹儀,離心機(jī),旋轉(zhuǎn)+電噴霧離子源(EIS),電噴霧電壓4000V,離收稿日期:2010-05-05子傳輸管溫度350,鞘氣壓力3.675kPa,輔助氣-1*聯(lián)系人流量5Lmin,碰撞誘導(dǎo)解離電壓10V,選擇反1108陳永平等:高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定水產(chǎn)品中喹乙醇及其代謝物應(yīng)監(jiān)測(cè)(SRM),正離子模式檢測(cè),碰撞氣氬氣壓力濾膜后,按儀器工作條件進(jìn)行測(cè)定,外標(biāo)法定量。200Pa。其余質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表2。2結(jié)果與討論表2OQX和MQCA的質(zhì)譜參數(shù)Tab.2MSparametersforOQXandMQCA2.
6、1提取凈化條件的選擇質(zhì)荷比m/z碰撞能量試驗(yàn)分別用甲醇(5+95)溶液與乙腈-乙酸乙酯組分母離子子離子/eV(1+1)混合溶液作提取劑,對(duì)OQX進(jìn)行提取,正己OQX263.9220.913烷去脂、過(guò)無(wú)水硫酸鈉柱和HLB小柱,除去基質(zhì)中143.030的水及大分子雜質(zhì),減少對(duì)色譜柱、質(zhì)譜儀的污染。MQCA189.1145.114結(jié)果表明:采用乙腈-乙酸乙酯(1+1)混合溶液提102.132取,回收率較甲醇(5+95)溶液提取回收率高。與文[2]1.3試驗(yàn)方法獻(xiàn)報(bào)道的測(cè)定動(dòng)物組織中OQX和豬糞中[10]1.3.1MQCA的測(cè)定OQX方法作比較,凈化效果理想。稱(chēng)取魚(yú)肉
7、勻漿試樣5.00g,置于50mL玻璃離MQCA帶有一個(gè)-COOH基團(tuán)顯弱酸性,與-1心管中,加3molL氫氧化鈉溶液10mL,置組織中某些蛋白質(zhì)結(jié)合較牢固,通?？刹捎盟崴?、95~100水浴中水解20min。冷卻至室溫,加堿水解或酶解的方式將目標(biāo)化合物與蛋白質(zhì)分離。鹽酸4mL,混勻,冷卻至室溫,加乙酸乙酯10mL,試驗(yàn)分別采用酶水解、酸水解和堿水解3種提取方-1渦旋振蕩1min,以4000rmin轉(zhuǎn)速離心5min,式對(duì)MQCA進(jìn)行提取,結(jié)果表明:用酶水解時(shí),溫上層溶液轉(zhuǎn)入50mL玻璃離心管;用5mL乙酸乙度、pH值對(duì)酶活性影響較大,試驗(yàn)過(guò)程較難控制,[1
