實(shí)驗(yàn)二氣孔狀態(tài)觀察

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1、1.實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備不足,影響了實(shí)驗(yàn)完成。2.懷疑鋁盒在烘干前有水分,為何不稱一下烘干后的鋁盒重量呢?可以換算出來正確的鮮重和干重。3.試管的刻度不準(zhǔn)確,應(yīng)該用移液管來統(tǒng)一量取。4.結(jié)合含水量和水勢(shì)進(jìn)行比較分析。實(shí)驗(yàn)一環(huán)境因素對(duì)植物水分狀態(tài)的影響存在問題:實(shí)驗(yàn)二氣孔運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)(Ⅰ)氣孔密度的觀察(Ⅱ)鉀離子對(duì)氣孔開度的影響腎形(雙子葉植物)啞鈴形(單子葉植物)氣孔密度:?jiǎn)挝蝗~片面積上的氣孔數(shù)(顯微鏡視野面積內(nèi)觀測(cè)到的氣孔數(shù))氣孔開度:保衛(wèi)細(xì)胞內(nèi)壁間跨距開度不同植物氣孔的數(shù)目和大小掌握測(cè)定氣孔密度和開度的方法;學(xué)會(huì)分析影響

2、因素對(duì)氣孔運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié);學(xué)會(huì)利用顯微鏡物鏡測(cè)微尺(物尺)標(biāo)定目鏡測(cè)微尺(目尺)的方法。1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.1印跡法以有機(jī)物質(zhì)的溶膠(火棉膠、牛皮膠、醋酸纖維素膠、指甲油等)涂在植物的表面,膠體風(fēng)干后凝成薄膜,這層膜上印有表皮組織各細(xì)胞的界跡邊痕,從而顯示出氣孔的開閉情況。將印膜撕下,供觀察和測(cè)量。除用來觀察氣孔狀況外,還可用于觀測(cè)植物表皮上的細(xì)胞、茸毛、蜜腺、蜜盤、刺、鱗片等。優(yōu)點(diǎn):非破壞性取樣;方便快捷。缺陷:界跡邊痕不明顯的樣品印跡模糊;凹陷氣孔難以取到印跡;清晰薄膜制作有難度。2.實(shí)驗(yàn)原理2.2固定法優(yōu)點(diǎn):鏡下觀察較

3、印跡法的醒目;植物材料可長(zhǎng)期保存;凹陷氣孔仍可觀察。缺陷:破壞性取樣;不適用于下表皮難于剝離的樣品觀察。無水乙醇能使植物細(xì)胞迅速脫水、死亡,因而細(xì)胞壁硬化、細(xì)胞形狀固定,氣孔也得以保持原形,有利于以后鏡檢研究。2.3K+對(duì)氣孔開度的影響氣孔運(yùn)動(dòng)的機(jī)制(4種假說):淀粉與糖轉(zhuǎn)化學(xué)說K+積累學(xué)說蘋果酸代謝學(xué)說玉米黃素假說在光下,保衛(wèi)細(xì)胞中的葉綠體通過光合磷酸化生成ATP,ATP驅(qū)動(dòng)質(zhì)膜上的K+-H+泵,使保衛(wèi)細(xì)胞能逆濃度梯度從周圍表皮細(xì)胞吸收K+,或從外界溶液中吸收K+,從而降低其滲透勢(shì),促進(jìn)保衛(wèi)細(xì)胞吸水,氣孔開放。K+

4、在保衛(wèi)細(xì)胞的積累,可以促進(jìn)氣孔開放。Na+可以代替K+,使氣孔開放,但效果如何?K+積累學(xué)說蠶豆葉片,竹葉菜(Commelinabenghalensis)載玻片、蓋玻片、顯微鏡、測(cè)微尺、培養(yǎng)皿印跡法:火棉膠、棉花球、鑷子、刀片;固定法:無水酒精、鑷子0.5%KNO3、NaNO3溶液光源(生長(zhǎng)箱或自然光)3.材料、儀器設(shè)備與試劑目鏡測(cè)微尺(目尺):是一塊可放在目鏡內(nèi)隔板上的圓形小玻片,其中央有精確的等分刻度,有等分為50小格和100小格兩種。用以測(cè)量經(jīng)顯微鏡放大后的物像大小??潭却笮‰S放大倍數(shù)變化而改變。物鏡測(cè)微尺(物

5、尺):是中央部分刻有精確等分線的載玻片,一般是將1mm等分為100格,每格長(zhǎng)10μm。實(shí)際長(zhǎng)度不受放大倍數(shù)影響。專用于校正目鏡測(cè)微尺(目尺)每格的相對(duì)長(zhǎng)度。目鏡測(cè)微尺物鏡測(cè)微尺4.實(shí)驗(yàn)步驟1)計(jì)算顯微鏡視野直徑和面積(40×,物尺)物尺放在視野直徑線計(jì)算直徑,視野面積S=π(d/2)2。2)用物尺標(biāo)定目尺(40×)由于不同顯微鏡鏡筒長(zhǎng)度不同,或不同的目鏡和物鏡組合放大倍數(shù)不同,目尺每小格所代表的實(shí)際長(zhǎng)度也不一樣。因此,用目尺測(cè)量物體大小時(shí),必須先用物尺校正,以計(jì)算出在一定放大倍數(shù)目鏡和物鏡下目尺所代表的實(shí)際長(zhǎng)度,然后

6、才能用來測(cè)量物體大小。低倍鏡下找到物尺,并移至視野中部,高倍鏡下標(biāo)定目尺。目尺每格=10×20/29(μm)目尺物尺每格10μm目尺29格對(duì)物尺20格視野10格目尺r=?計(jì)算氣孔密度17格目尺對(duì)應(yīng)6格物尺目尺每格=6×10/17(um)測(cè)氣孔大小目尺17格物尺6格計(jì)算氣孔開度?μm將火棉膠均勻涂抹于葉片下表皮表面,風(fēng)干2min,用鑷子揭開一層薄膜;將薄膜平鋪在稍有濕潤(rùn)(哈氣)的載玻片上,壓上蓋玻片,鏡檢;低倍鏡下選視野,高倍鏡下觀察記數(shù),觀察3個(gè)視野的氣孔數(shù)目。3)印記法觀察氣孔密度4)固定法觀察氣孔密度用鑷子撕剝?nèi)~

7、片下表皮(用刀片切一小口以利于撕取或直接將鑷尖插入下表皮后側(cè)拉),迅速(愈快愈好)放入無水乙醇中固定2~3min,把固定好的表皮平放在載玻片上,加幾滴無水乙醇,壓上蓋玻片,鏡檢,低倍鏡下選視野,高倍鏡下觀察記數(shù),觀察3個(gè)視野的氣孔數(shù)目。5)K+、Na+對(duì)氣孔開度的影響3個(gè)培養(yǎng)皿中分別放0.5%KNO3、0.5%NaNO3溶液和蒸餾水各15ml;每個(gè)培養(yǎng)皿放2~3張從相似葉位/相近大小的葉片上取下的下表皮;25℃下,光照處理60min;依次制片和鏡下觀察氣孔開度,記錄與開度相應(yīng)的目尺格數(shù)。每個(gè)處理隨機(jī)觀察5個(gè)氣孔。實(shí)驗(yàn)

8、步驟1)計(jì)算顯微鏡視野直徑和面積(40×,物尺)2)用物尺標(biāo)定目尺(40×)3)印記法觀察氣孔密度:將火棉膠均勻涂抹于葉片下表皮表面,風(fēng)干2min,用鑷子揭開一層薄膜;將薄膜平鋪在稍有濕潤(rùn)(哈氣)的載玻片上,壓上蓋玻片,鏡檢,觀察3個(gè)視野的氣孔數(shù)目。4)固定法觀察氣孔密度:用鑷子撕剝?nèi)~片下表皮,迅速放入無水乙醇中固定2~3min,把固定好的表皮

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