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《《細(xì)菌的檢查方法》PPT課件》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、細(xì)菌學(xué)診斷標(biāo)本采集和送檢六原則避免雜菌污染不同期不同標(biāo)本用抗生素以前采集病變明顯部位標(biāo)本作好標(biāo)記標(biāo)本必須新鮮顯微鏡放大法：普通光學(xué)顯微鏡：0.25um0.25mm電子顯微鏡：透射電鏡、掃描電鏡染色法病原菌檢測細(xì)菌形態(tài)與結(jié)構(gòu)檢查結(jié)晶紫1min盧戈碘1min95%乙醇30s稀釋復(fù)紅30s的意義1.將細(xì)菌區(qū)分為2大類GramStain2.指導(dǎo)選擇抗菌藥物3.用于細(xì)菌致病性等方面的研究直接涂片鏡檢形態(tài)和染色性具有特征的致病菌，直接涂片染色后鏡檢有助初步診斷。痰液抗酸性細(xì)長桿菌結(jié)核桿菌腦脊液淤血點腎形,G-雙球菌腦膜炎奈瑟菌膿液G+葡萄串狀球菌葡
2、萄球菌病原菌檢測分離培養(yǎng)和鑒定確診細(xì)菌感染性疾病最可靠的方法（金標(biāo)準(zhǔn)),有助于選用抗菌藥物及評價療效。①普通培養(yǎng)法（需氧培養(yǎng)法）②高滲培養(yǎng)法③厭氧培養(yǎng)法病原菌檢測臨床標(biāo)本預(yù)處理增菌接種培養(yǎng)基，分離單個菌落各種鑒定試驗涂片染色快速診斷試驗生化試驗血清學(xué)實驗涂片染色藥敏試驗動物試驗初步診斷報告最終診斷報告一般檢驗程序病原學(xué)診斷分離培養(yǎng)和鑒定①培養(yǎng)特征：營養(yǎng)、生長條件、菌落特征②形態(tài)特征：細(xì)菌形態(tài)、排列、染色性③生化反應(yīng)：檢測細(xì)菌對各種基質(zhì)（糖類和蛋白質(zhì)）的代謝作用和代謝產(chǎn)物的差異，借以區(qū)別和鑒定細(xì)菌。病原菌檢測生化反應(yīng)如:幽門螺桿菌尿素酶分
3、解尿素產(chǎn)氨,使培養(yǎng)液變堿,pH指示劑變色。微量、快速、半自動或自動細(xì)菌生化鑒定和細(xì)菌藥敏分析系統(tǒng)，使病原菌檢出水平提高，時間縮短。病原菌檢測病原菌檢測血清學(xué)試驗用含已知特異性抗體的免疫血清，可有效檢出標(biāo)本中極微量細(xì)菌特異抗原，或與分離培養(yǎng)出的未知純種細(xì)菌進(jìn)行血清學(xué)試驗，確定致病菌的種或型。常用方法有玻片凝集試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、協(xié)同凝集、乳膠凝集、免疫電泳、間接血凝等試驗。病原菌檢測動物試驗利用實驗動物可進(jìn)行病原菌的分離鑒定，檢測細(xì)菌毒力等。常用實驗動物有小鼠,豚鼠和家兔等。接種途徑有皮內(nèi)、皮下、腹腔、肌肉、靜脈等。病原
4、菌檢測藥物敏感試驗紙片法試管稀釋法病原菌檢測其他方法分子生物學(xué)技術(shù)核酸雜交技術(shù)PCR生物芯片技術(shù)聚合酶鏈反應(yīng)是一種模擬天然DNA復(fù)制的體外擴增法，其基本原理如下：加熱使雙鏈DNA解開螺旋↓在退火溫度條件下引物同模板雜交↓在TaqDNA聚合酶，dNTPs，Mg2+和合適pH緩沖液存在條件下延伸引物↓重復(fù)上述變性→退火→引物延伸過程至25-40個循環(huán)。靶序列被擴增上百萬倍，達(dá)到體外擴增核酸序列的目的。PCR技術(shù)核酸雜交技術(shù)雜交方法是一種分子生物學(xué)的標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)，用于檢測DNA或RNA分子的特定序列（靶序列）。DNA或RNA先轉(zhuǎn)移并固定到硝酸纖維
5、素或尼龍膜上，與其互補的單鏈DNA或RNA探針用放射性或非放射性標(biāo)記。在膜上雜交時，探針通過氫鍵與其互補的靶序列結(jié)合，洗去未結(jié)合的游離探針后，經(jīng)放射自顯影或顯色反應(yīng)檢測特異結(jié)合的探針。生物芯片技術(shù)該技術(shù)系指將大量（通常每平方厘米點陣密度高于400）探針分子固定于支持物上后與標(biāo)記的樣品分子進(jìn)行雜交，通過檢測每個探針分子的雜交信號強度進(jìn)而獲取樣品分子的數(shù)量和序列信息。血清學(xué)診斷用已知抗原檢測病人血清抗體直接凝集試驗補體結(jié)合試驗中和試驗乳膠凝集ELISA
