細(xì)菌的檢查方法ppt課件.ppt

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1、（二）不染色標(biāo)本檢查法和染色標(biāo)本檢查法不染色標(biāo)本染色標(biāo)本單染色復(fù)染色特殊染色鞭毛、芽孢、莢膜革蘭染色、抗酸、albert動(dòng)力觀察載玻片細(xì)菌懸液蓋玻片（1）壓滴法1.不染色標(biāo)本檢查法（2）懸滴法鏡檢蓋玻片細(xì)菌懸液凹玻片2.染色標(biāo)本檢查法細(xì)菌標(biāo)本經(jīng)染色后，除能清楚看到細(xì)菌的形態(tài)、大小、排列方式外，還可根據(jù)染色反應(yīng)將細(xì)菌進(jìn)行分類。革蘭氏染色（Gramstain)原理：步驟：意義：鑒別細(xì)菌選擇抗菌藥物研究細(xì)菌致病性結(jié)晶紫1min盧戈碘1min95%乙醇30s稀釋復(fù)紅30s革蘭染色革蘭染色結(jié)果油鏡下模式圖×1000結(jié)果：革蘭陽性（G＋）菌呈藍(lán)紫色革蘭陰性（G－）菌呈紅色原理：（1）細(xì)胞壁

2、結(jié)構(gòu)：成分、肽聚糖層數(shù)等（2）等電點(diǎn)：G＋等電點(diǎn)低，帶負(fù)電荷多，與帶正電荷的結(jié)晶紫結(jié)合牢固革蘭染色的臨床意義：（1）鑒別細(xì)菌（2）指導(dǎo)臨床選擇藥物（3）與細(xì)菌的致病性有關(guān)（3）抗酸染色法鑒別：抗酸性桿菌和非抗酸性桿菌步驟：固定標(biāo)本苯酚復(fù)紅加溫染色鹽酸乙醇脫色亞甲藍(lán)復(fù)染結(jié)果：抗酸性桿菌染成紅色非抗酸性桿菌染成藍(lán)色（4）特殊染色法鑒別：細(xì)菌的莢膜、芽胞、鞭毛及細(xì)胞壁、異染顆粒等的染色☆電子顯微鏡適用于專性厭氧菌培養(yǎng)。厭氧培養(yǎng)箱、厭氧袋、厭氧罐、皰肉培養(yǎng)法、硫乙醇酸鹽法等。常用的生化試驗(yàn)1、吲哚試驗(yàn)（Indoltest）：含有色氨酸酶的細(xì)菌（如大腸桿菌、變形桿菌等）可分解色氨酸生成吲

3、哚，若加入二甲基氨基苯甲醛，與吲哚結(jié)合，形成玫瑰吲哚，呈紅色，稱吲哚試驗(yàn)陽性。2、甲基紅試驗(yàn)：產(chǎn)氣桿菌使丙酮酸脫羧后形成中性產(chǎn)物，培養(yǎng)液pH＞5.4，甲基紅指示劑呈桔黃色，為甲基紅試驗(yàn)陰性，大腸桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，培養(yǎng)液呈酸性pH＜5.4，指示劑甲基紅呈紅色，稱甲基紅試驗(yàn)（Methylredtest,MR）陽性。3、V-P試驗(yàn)：大腸桿菌與產(chǎn)氣桿菌均分解葡萄糖⊕，為區(qū)分兩菌可采用VP試驗(yàn)及甲基紅試驗(yàn)。產(chǎn)氣桿菌能使丙酮酸脫羧、氧化（在堿性溶液中）生成二乙酰，后者可與含胍基的化合物反應(yīng)，生成紅色化合物，稱VP陽性。大腸桿菌分解葡萄糖產(chǎn)生丙酮酸，VP陰性。4、枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)（C

4、itrateultiliazationtest）:能利用枸櫞酸鹽作為唯一碳源的細(xì)菌如產(chǎn)氣桿菌，分解枸櫞酸鹽生成碳酸鹽，同時(shí)分解培養(yǎng)基的銨鹽生成氨，由此使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性，使指示劑溴麝香草酚藍(lán)（BTB）由淡綠轉(zhuǎn)為深藍(lán)，此為枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)陽性。吲哚（I）、甲基紅（M）、VP（Vi）、枸櫞酸鹽利用（C）四種試驗(yàn)，合稱之為IMViC試驗(yàn)，用以將大腸桿菌與其形狀十分相近的腸桿菌屬的細(xì)菌鑒別開來。IMViC試驗(yàn)：