蛋白質(zhì)合成及轉(zhuǎn)運(yùn)1

蛋白質(zhì)合成及轉(zhuǎn)運(yùn)1

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1、第38章蛋白質(zhì)合成及轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)的生物合成過程就是將mRNA分子中由堿基序列組成的遺傳信息,通過遺傳密碼破譯的方式轉(zhuǎn)變成為蛋白質(zhì)中的氨基酸排列順序,因而稱為翻譯(translation)。蛋白質(zhì)的生物合成合成場(chǎng)所:核糖體原料:AA、tRNA、mRNA、rRNA酶、蛋白因子ATP、GTP、無機(jī)離子含有密碼子閱讀方向5’到3’起始密碼和終止密碼3’端:真核生物有PolyA尾巴5’端:決定起始密碼的選擇一、蛋白質(zhì)合成的分子基礎(chǔ)(一)模板是mRNA1961年,Nirenberg證明了mRNA的模板作用。mRNA是遺傳信息的攜帶者遺傳學(xué)將編碼一個(gè)多肽的遺傳單位稱為順反子(cistron)。原核細(xì)胞

2、中數(shù)個(gè)結(jié)構(gòu)基因常串聯(lián)為一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位,轉(zhuǎn)錄生成的mRNA可編碼幾種功能相關(guān)的蛋白質(zhì),為多順反子(polycistron)。真核生物一個(gè)mRNA只編碼一種蛋白質(zhì),為單順反子(singlecistron)。mRNA結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)圖mRNA上存在遺傳密碼mRNA分子上從5?至3?方向,由AUG開始,每3個(gè)核苷酸為一組,決定肽鏈上某一個(gè)氨基酸或蛋白質(zhì)合成的起始、終止信號(hào),稱為三聯(lián)體密碼(tripletcodon)。ORF從mRNA5?端起始密碼子AUG到3?端終止密碼子之間的核苷酸序列,各個(gè)三聯(lián)體密碼連續(xù)排列編碼一條多肽鏈,稱為開放閱讀框架(openreadingframe,ORF)。每種AA都至少有一

3、種tRNA負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運(yùn)通常一種AA具有幾種tRNA(二)tRNA轉(zhuǎn)運(yùn)活化的AA到模板上tRNA分子具有4個(gè)位點(diǎn):3’CCA-OH氨基酸接受位點(diǎn)識(shí)別氨酰-tRNA合成酶位點(diǎn)核糖體識(shí)別位點(diǎn)反密碼子位點(diǎn)核蛋白體的組成核蛋白體原核生物真核生物蛋白質(zhì)S值rRNA蛋白質(zhì)S值rRNA小亞基21種30S16S33種40S18S大亞基34種50S23S5S49種60S28S5.8S5S核蛋白體70S80S(三)核糖體是蛋白質(zhì)合成的工廠原核生物核蛋白體結(jié)構(gòu)模式30S小亞基:有mRNA結(jié)合位點(diǎn)50S大亞基:E位:排出位(Exitsite)轉(zhuǎn)肽酶活性大小亞基共同組成:A位:氨基酰位(aminoacylsite)P

4、位:肽酰位(peptidylsite)(一)氨酰tRNA的生成-氨基酸的活化二、翻譯的步驟氨基酸+tRNA氨基酰-tRNAATPAMP+PPi氨酰-tRNA合成酶第一步反應(yīng)氨基酸+ATP+E—→氨基酰-AMP-E+AMP+PPi第二步反應(yīng)氨基酰-AMP-E+tRNA↓氨基酰-tRNA+AMP+E(二)氨酰tRNA合成酶識(shí)別:AA、tRNA、ATPⅠ型和Ⅱ型酶氨基酰-tRNA合成酶對(duì)氨基酸和tRNA都有高度特異性。氨基酰-tRNA的表示方法:Ala-tRNAAlaSer-tRNASerMet-tRNAMet氨基酸的活化形式:氨基酰-tRNA氨基酸的活化部位:α-羧基氨基酸與tRNA連接方

5、式:酯鍵氨基酸活化耗能:2個(gè)~P(三)氨酰tRNA合成酶的校正功能——水解非正確組合的AA和tRNA異亮氨酰–tRNAIle纈氨酰–tRNAVal纈氨酰–tRNAIle則被水解:纈氨酸+tRNAIle翻譯起始于Met的參與tRNAMet:攜帶Met摻入蛋白內(nèi)部tRNAiMet:起始Met摻入——由同一種tRNA合成酶合成起始因子識(shí)別tRNAiMet延伸因子識(shí)別tRNAMet(四)一個(gè)特殊的tRNA啟動(dòng)蛋白的合成原核生物中的甲酰MetfMet-tRNAiMet(五)翻譯起始于mRNA與核糖體的結(jié)合原核生物借助SD序列(六)蛋白因子幫助合成的起始肽鏈合成起始指mRNA和起始氨基酰-tRNA

6、分別與核蛋白體結(jié)合而形成翻譯起始復(fù)合物(translationalinitiationcomplex)。參與起始過程的蛋白質(zhì)因子稱起始因子(initiationfactor,IF)。S-D序列:在原核生物mRNA起始密碼AUG上游,存在4~9個(gè)富含嘌呤堿的一致性序列,如-AGGAGG-,稱為S-D序列。 又稱為核蛋白體結(jié)合位點(diǎn)(ribosomalbindingsite,RBS)能與16S核糖體RNA識(shí)別,以幫助從起始AUG處開始翻譯。Shine和DalgarnoS-D序列原核生物mRNA5’端的SD序列——識(shí)別16SrRNA核糖體結(jié)合位點(diǎn)序列真核生物5’端有核糖體進(jìn)入部位帽子結(jié)構(gòu)幫助識(shí)

7、別向3’掃描至AUGGCCGCCpurCCAUGG參與起始過程的蛋白質(zhì)因子稱起始因子(initiationfactor,IF)。原核生物起始因子有三種:IF-1:占據(jù)A位防止結(jié)合其他tRNA。IF-2:促進(jìn)起始tRNA與小亞基結(jié)合。IF-3:促進(jìn)大小亞基分離,提高P位對(duì)結(jié)合起始tRNA敏感性。原核生物翻譯起始復(fù)合物形成核蛋白體大小亞基分離;mRNA在小亞基定位結(jié)合;起始氨基酰-tRNA的結(jié)合;核蛋白體大亞基結(jié)合。IF-3IF-11.核蛋白體大小

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