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《蛋白質(zhì)的合成及轉(zhuǎn)運(yùn)》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在教育資源-天天文庫。
1、蛋白質(zhì)的合成及轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)容第一節(jié)遺傳密碼第二節(jié)蛋白質(zhì)合成的分子基礎(chǔ)第三節(jié)蛋白質(zhì)合成的步驟第三節(jié)蛋白質(zhì)的運(yùn)輸及翻譯后修飾第一節(jié)遺傳密碼遺傳密碼(geneticcode):DNA(或mRNA)中的核苷酸序列與蛋白質(zhì)中氨基酸序列之間的對應(yīng)關(guān)系稱為遺傳密碼。密碼子(codon):mRNA上每3個相鄰的核苷酸編碼蛋白質(zhì)多肽鏈中的一個氨基酸,這三個核苷酸就稱為一個密碼子或三聯(lián)體(triplet)密碼。一、遺傳密碼密碼的破譯1954年Gamov確認(rèn)核酸分子中三個堿基決定一個氨基酸。1961年Crick等用遺傳學(xué)方法也證實(shí)三聯(lián)體密碼子學(xué)說是正確的。缺失或插入核苷酸引起三聯(lián)體密碼的改
2、變CATCATCATCATCATCATCATCA?CATCATCATCATCCATCA?CAXTCATCATCATCAXTXCATXCATCATCAT-1-1,+1+31.1961年美國的Nirenberg等人以均聚物為模板指導(dǎo)多肽的合成,尋找到了破譯遺傳密碼的途徑。利用多核苷酸磷酸化酶合成一條由相同核苷酸組成的多核苷酸鏈,用它作模板,利用大腸桿菌體外蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)。以均聚物為模板指導(dǎo)多肽的合PolyC為模板,產(chǎn)生的多肽鏈為PolyProPolyU為模板,產(chǎn)生的多肽鏈為PolyPhePolyA為模板,產(chǎn)生的多肽鏈為PolyLys證明三聯(lián)體密碼的三個著名實(shí)驗(yàn)2.核
3、糖體結(jié)合技術(shù)1964年Nirenberg等人首先合成一個已知序列的核苷酸三聚體,然后與大腸桿菌核糖體和氨酰tRNA一起溫育。由此確定與已知核苷酸三聚體結(jié)合的tRNA上連接的是那一種氨基酸。該實(shí)驗(yàn)確定了50多種三聯(lián)體密碼,對于幾種密碼編碼同一個氨基酸提供了直接的、最好的證據(jù)3.1964年,Khorana以共聚物即含有重復(fù)序列的多聚核苷酸指導(dǎo)多肽的合成,加快了破譯遺傳密碼的步伐。以特定的共聚物為模板指導(dǎo)多肽的合成以多聚二核苷酸作模板可合成由2個氨基酸組成的多肽,如以PolyUG為模板UGUGUGUGU合成產(chǎn)物為PolyLys-Val。以多聚三核苷酸作為模板,可得三種
4、氨基酸組成的多肽UCGUCGUCG。PhePhePheSerSerSerLeuLeuSerEstablishedthechemicalstructureoftRNADevisedmethodstosynthesizeRNAswithdefinedsequencesEstablishedtheinvitrosystemforrevealingthegeneticcodes遺傳密碼字典UACGUCAGUCAG第二位第一位(5ˊ)第三位(3ˊ)UCAGUCAGUCAG二、遺傳密碼的基本特性1、密碼是無標(biāo)點(diǎn)符號的且相鄰密碼子互不重疊。2、密碼的簡并性:由一種以上密碼子編
5、碼同一個氨基酸的現(xiàn)象稱為簡并性(degeneracy),對應(yīng)于同一氨基酸的密碼子稱為同義密碼子(Synonymouscodon)。密碼的簡并性可以減少有害突變3、密碼的擺動性(變偶性):密碼的專一性主要是由第一第二個堿基所決定,tRNA上的反密碼子與mRNA密碼子配對時,密碼子的第一、二位堿基是嚴(yán)格的,第三位堿基可以有一定的變動。Crick稱這一為變偶性(wobble).4、密碼的通用性和變異性5、64組密碼子中,AUG既是Met的密碼,又是起始密碼;有三組密碼不編碼任何氨基酸,而是多肽鏈合成的終止密碼子:UAG、UAA、UGA。6、密碼的防錯系統(tǒng)反密碼子與密碼
6、子之間的堿基配對AUCG反密碼子第一位堿基密碼子第三位堿基GUCUAGIUCA次黃嘌呤核苷酸(I)常常出現(xiàn)在tRNA的5ˊ位,I可以與U,C和A形成氫鍵。帶有反密碼子IGC的tRNAAla分子可以與特異編碼Ala的三個密碼(GCU,GCC,GCA)中的任一個結(jié)合關(guān)于密碼的防錯系統(tǒng)密碼的簡并性由第三個堿基決定氨基酸的極性由第二個堿基決定如:中間U→非極性、疏水、和有支鏈的aa中間C→非極性或不帶電極性側(cè)鏈aa中間AorG→親水的aa第一個A或C、第二個A或G、第三個任意→可離解、親水側(cè)鏈堿性aa前兩位AG第三個任意→酸性親水側(cè)鏈aa結(jié)果:一個堿基變化后→相同aa或
7、性質(zhì)相似aa,這是進(jìn)化的結(jié)果人線粒體中變異的密碼子UGA終止信號TrpAUAIleMetAGAArg終止信號AGGArg終止信號密碼子正常情況下編碼線粒體DNA編碼第二節(jié)蛋白質(zhì)合成的分子基礎(chǔ)蛋白質(zhì)的生物合成(翻譯)以氨基酸為原料以mRNA為模板以tRNA為運(yùn)載工具以核糖體為合成場所起始、延長、終止各階段蛋白因子參與合成后加工成為有活性蛋白質(zhì)原核細(xì)胞mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)5′3′順反子順反子順反子先導(dǎo)區(qū)末端順序SD區(qū)特點(diǎn)半衰期短許多原核生物mRNA以多順反子形式存在AUG作為起始密碼;AUG上游7~12個核苷酸處有一被稱為SD序列的保守區(qū),16SrRNA3’-端反向互
8、補(bǔ)而使mRNA與核糖體結(jié)