不同種群植物葉綠素a和葉綠素b含量的測(cè)定

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1、實(shí)驗(yàn)三不同種群植物葉綠素a、b含量的測(cè)定（分光光度法）一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?炮仗花,榕樹(陰生植物)變?nèi)~木,鴛鴦茉莉（陽(yáng)生植物）1.學(xué)習(xí)并掌握用分光光度法測(cè)定未分離的葉綠體色素溶液中葉綠素a和b含量的方法；2.對(duì)比不同種群植物葉綠素a，b含量及其比值的差異，了解葉綠素含量與陰生和陽(yáng)生植物的形態(tài)結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)的關(guān)系3.通過(guò)本實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)與實(shí)施，增加我們對(duì)不同種群的了解，有利于我們對(duì)植物的種植與保護(hù)，也能使我們掌握基本的實(shí)驗(yàn)操作技術(shù)，培養(yǎng)探究性學(xué)習(xí)的能力，通過(guò)小組合作學(xué)習(xí)加強(qiáng)團(tuán)隊(duì)精神二、實(shí)驗(yàn)原理：根據(jù)葉綠素a、b在長(zhǎng)波方面的最大吸收峰分別位于663nm和645n

2、m處。又根據(jù)Lambert－Beer定律：Ca=12.7OD663-2.69OD645Cb=22.9OD645-4.68OD663CT=Ca+Cb=8.02OD613+20.21OD645測(cè)定得到光密度（OD值）。即可算出葉綠素a、b的含量及總?cè)~綠素的含量（mg/l）。三、儀器藥品材料：儀器：分光光度計(jì)、臺(tái)天平、剪刀、研缽、漏斗、移液管、量筒、10ml容量瓶。試劑：80%丙酮、碳酸鈣、石英砂、水、丙酮。材料：炮仗花,榕樹(陰生植物)變?nèi)~木,鴛鴦茉莉（陽(yáng)生植物）的葉片四、實(shí)驗(yàn)步驟：1、實(shí)驗(yàn)材料的培養(yǎng)和處理：試驗(yàn)前采集不同環(huán)境條件下的植物葉片。的提

3、?。喝⌒迈r葉片，剪去粗大的葉脈并剪成碎片，稱取0.5g放入研缽中加純丙酮5ml。少許碳酸鈣和石英砂，研磨成漿，再加80%丙酮5ml，將勻漿轉(zhuǎn)入離心管，并用適量80%丙酮洗滌研缽，一并轉(zhuǎn)入離心管，離心后棄沉淀，上清夜用80%丙酮定容至20ml。3、測(cè)定光密度：取上述色素提取液1ml，加80%丙酮4ml稀釋后轉(zhuǎn)入比色杯中，以80%丙酮作對(duì)照，分別測(cè)定663nm，645nm處的光密度值。4、按公式（3）（4）（5）分別計(jì)算色素提取液中葉綠素a、葉綠素b、葉綠素a和葉綠素b的濃度。再根據(jù)稀釋倍數(shù)分別計(jì)算每克鮮重葉片中色素的含量。五、結(jié)果計(jì)算：記錄數(shù)據(jù)，

4、并計(jì)算波長(zhǎng)種群663nm處的光密度值645nm處的光密度值炮仗花榕樹變?nèi)~木鴛鴦茉莉純丙酮波長(zhǎng)種群葉綠素a的濃度（mg／L）葉綠素b的濃度（mg／L）葉綠素a和b的濃度（mg／L）每克鮮重葉片中色素的含量(mg)炮仗花榕樹變?nèi)~木鴛鴦茉莉六、注意事項(xiàng)：由于植物葉子中；含有水分，故先用純丙酮進(jìn)行提取，以使色素提取液中丙酮的最終濃度近似80％。七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析：