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1、神經(jīng)干動(dòng)作電位及其傳導(dǎo)速度的測(cè)定【摘要】目的：測(cè)定蛙類(lèi)坐骨神經(jīng)干的單相、雙相動(dòng)作電位和其中A類(lèi)纖維沖動(dòng)的傳導(dǎo)速度，并觀察機(jī)械損傷、藥物對(duì)神經(jīng)興奮和傳導(dǎo)的影響。方法：應(yīng)用微機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)和電生理實(shí)驗(yàn)方法，分析蟾蜍坐骨神經(jīng)干的單相、雙相動(dòng)作電位波形，測(cè)定蟾蜍坐骨神經(jīng)干動(dòng)作電位及其神經(jīng)傳導(dǎo)速度，研究蟾蜍坐骨神經(jīng)干刺激電壓強(qiáng)度與單相動(dòng)作電位振幅的關(guān)系。結(jié)果：當(dāng)刺激電壓為1.0V，刺激波寬0.1ms時(shí)，閾刺激為(0.25±0.07)V，最大刺激為(0.92±0.14)V，動(dòng)作電位的傳導(dǎo)速度為(35.58±9.59)m/s。中樞引導(dǎo)的動(dòng)作電位正相振幅為（3.30±1.28）mv，負(fù)相振幅為（
2、2.18±0.82）mv，Ac1>Ac2，兩者有高度顯著性差異；動(dòng)作電位正相時(shí)程（0.92±0.09）ms比負(fù)相時(shí)程（1.79±0.32）ms短，兩者顯著性差異明顯。末端引導(dǎo)的動(dòng)作電位正相和負(fù)相振幅分別為（8.25±2.60）mv和（1.17±0.82）mv，Ap1>Ap2，兩者有高度顯著性差異；動(dòng)作電位正相時(shí)程（1.17±0.82）ms比負(fù)相時(shí)程（2.18±0.51）ms短，兩者有顯著性差異。單相動(dòng)作電位振幅Am（9.52±3.06）mv大于雙相動(dòng)作電位正相振幅（8.64±2.76）mv,兩者沒(méi)有顯著性差異；單相動(dòng)作時(shí)程Dm（1.85±0.65）ms顯著大于雙相動(dòng)作電位正相時(shí)程Dp1(
3、0.91±0.10）ms,兩者有顯著性差異。引導(dǎo)電極等于10mm時(shí)，動(dòng)作電位的正相波與負(fù)相波的振幅為（7.61±2.50）mv和（4.53±1.63）mv；當(dāng)引導(dǎo)電極等于20mm時(shí)，動(dòng)作電位的正相波與負(fù)相波的振幅為（10.10±2.60）mv和（5.31±1.91）mv；當(dāng)引導(dǎo)電極等于30mm時(shí)，動(dòng)作電位的正相波與負(fù)相波的振幅為（11.47±3.61）mv和（4.61±2.42）mv。電極距離為20mm與10mm時(shí)比較，正相波有顯著性差異，負(fù)相波無(wú)顯著性差異；電極距離為20mm和30mm時(shí)比較，正相波有顯著性差異，負(fù)相波無(wú)顯著性差異。當(dāng)刺激達(dá)到閾刺激0.17V時(shí)，開(kāi)始測(cè)到動(dòng)作電位，當(dāng)刺激
4、從閾刺激按步長(zhǎng)0.05V開(kāi)始增加刺激時(shí),動(dòng)作電位振幅呈曲線增長(zhǎng)，當(dāng)刺激達(dá)到最大刺激0.90V時(shí)，動(dòng)作電位不再增長(zhǎng)。刺激電壓1.0V，刺激波寬0.1ms時(shí)，3mol/LKCl處理前動(dòng)作電位的振幅Ap1為（7.63±3.70）mv，顯著性大于處理后動(dòng)作電位的振幅Ap1（0.97±0.94）mv；動(dòng)作時(shí)程Dp1（1.91±0.70）ms與處理后相比大于（1.37±0.70）ms，兩者有高度顯著性差異?！娟P(guān)鍵詞】神經(jīng)干單相動(dòng)作電位雙相動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度1.材料和方法1.1材料1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：中華蟾蜍1.1.2實(shí)驗(yàn)試劑：任氏液3mol/L氯化鉀溶液1.1.3實(shí)驗(yàn)器材：RM6240微生物信號(hào)采集處
5、理系統(tǒng)蛙類(lèi)解剖手術(shù)器材蛙釘培養(yǎng)皿1.2方法1.2.1制備蟾蜍坐骨神經(jīng)干標(biāo)本蟾蜍毀腦脊髓，去上肢和內(nèi)臟，避開(kāi)神經(jīng)剝離皮膚，標(biāo)本于任氏液中清洗。剝皮的下肢標(biāo)本俯臥位置于蛙板上，水平位剪除骶骨。分離脊柱兩側(cè)的坐骨神經(jīng)，穿線，緊靠脊柱根部結(jié)扎，近中樞端剪斷神經(jīng)干，用尖頭鑷子夾結(jié)扎線將神經(jīng)干從骶部剪口處穿出。標(biāo)本俯臥位置于蛙板上，使其充分伸展呈人字形，固定。分離大腿兩側(cè)的坐骨神經(jīng)、腓淺神經(jīng)、脛神經(jīng)，后順神經(jīng)走向，在靠近跟腱處剪斷跟腱和神經(jīng)，將標(biāo)本浸入盛有任氏液培養(yǎng)皿中待用。1.2.2儀器及標(biāo)本連接按要求連接生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)與標(biāo)本盒。啟動(dòng)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)軟件。在RM6240系統(tǒng)中，選擇“生理
6、科學(xué)實(shí)驗(yàn)”菜單中的“神經(jīng)干動(dòng)作電位”項(xiàng)目。設(shè)置儀器參數(shù)：1、2通道時(shí)間常數(shù)0.02～0.002s、濾波頻率1KHz、靈敏度5mV，采樣頻率40KHz，掃描速度0.5ms/div。單刺激激模式，刺激幅度0.1～3V，刺激波寬0.1ms，延遲5ms，同步觸發(fā)。1.2.3調(diào)節(jié)刺激電壓，記錄動(dòng)作電位，收集實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。2．觀察項(xiàng)目2.1中樞端引導(dǎo)的和末梢端引導(dǎo)的雙相動(dòng)作電位2.1.1中樞端引導(dǎo)的雙相動(dòng)作電位用1.0V電壓，波寬0.1ms的單個(gè)方波刺激神經(jīng)干末梢端，觀察中樞端引導(dǎo)的雙相動(dòng)作電位正、負(fù)相振幅和時(shí)程。2.1.2末梢端引導(dǎo)的雙相動(dòng)作電位用1.0V電壓，波寬0.1ms的單個(gè)方波刺激神經(jīng)干中樞端
7、，觀察末梢端引導(dǎo)的雙相動(dòng)作電位正、負(fù)相振幅和時(shí)程。2.2動(dòng)作電位傳導(dǎo)速度的測(cè)定用1.0V電壓，波寬0.1ms的單個(gè)方波刺激神經(jīng)干中樞端測(cè)定第一和第二對(duì)引導(dǎo)電極動(dòng)作電位發(fā)生的時(shí)間差t2-t1，兩電極之間的距離s2-s1，再根據(jù)公式v=s2-s1/t2-t1，求得興奮傳導(dǎo)速度。2.3引導(dǎo)電極間距離與動(dòng)作電位振幅和時(shí)程的關(guān)系用1.0V電壓，波寬0.1ms的單個(gè)方波激刺激神經(jīng)干中樞端，測(cè)定第1對(duì)引導(dǎo)電極間距為10、20、30mm時(shí)的正相雙相
