神經(jīng)干動作電位.doc

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1、反射時測定和反射弧分析神經(jīng)干動作電位的測定2013級生命科學3班張柏輝學號：201325010761.實驗目的1.觀察蛙坐骨神經(jīng)干動作電位的基本波形，并了解其產(chǎn)生的基本原理；2.學習測定反射時的方法，了解反射弧的組成；3.了解脊髓反射的功能特性。2.實驗原理（一）反射時測定和反射弧分析反射是指對某一刺激無意識的應答。反射活動的結構基礎稱為反射弧，包括感受器、傳入神經(jīng)、神經(jīng)中樞、傳出神經(jīng)和效應器。從皮膚接受刺激至機體出現(xiàn)反應的時間稱為反射時。反射時是反射通過反射弧所用的時間。反射弧的任何一部分缺損，原有的反射不再出現(xiàn)。中樞的興奮和抑制同時存在又相互影響。在脊

2、髓反射的中樞之間或高位腦和脊髓對低位脊髓反射中樞均存在抑制作用，這些抑制作用保證了機體活動的協(xié)調性。（二）神經(jīng)干動作電位的測定神經(jīng)干在受到有效刺激后可以產(chǎn)生復合動作電位，標志著興奮的產(chǎn)生。如果在立體神經(jīng)干的一端施加刺激，從另一端引導傳來的興奮沖動可以記錄出雙相動作電位，假如在引導的兩個電極之間將神經(jīng)干麻醉或損壞，阻斷其興奮傳導能力，此時可以記錄到單相動作電位。3.實驗對象與實驗材料（一）材料：虎紋蛙（二）器具：手術剪、手術鑷、手術刀、金冠剪、眼科剪、毀髓針、玻璃分針、木質蛙板、固定針、鋅銅弓、瓷盤、污物缸、滴管、紗布、粗棉線、濾紙片、支架、蛙嘴夾、小燒杯、

3、秒表、神經(jīng)屏蔽盒、PowerLab、刺激線、USB線、電腦（三）試劑：任氏液、2%普魯卡因、0.5%及1%硫酸溶液4.實驗方法與步驟（一）反射時與反射弧的測定1.屈反射取一只虎紋蛙，只毀腦髓制成脊蛙（只毀腦），用蛙嘴夾夾住蛙下頜懸掛在支架上，右后肢最長趾浸入0.5%硫酸溶液中2~3mm(<10s),同時開始計時。當出現(xiàn)屈反射時立即停止計時，并用清水沖洗受刺激皮膚，紗布擦干，重復測屈反射時3次。同樣方法測左后肢最長趾的屈反射時。2.損毀感受器用手術剪自后肢最長趾基部環(huán)切皮膚，后用手術鑷剝凈長趾上的皮膚，用0.5%硫酸溶液刺激去皮皮膚，并記錄側時結果。3.對照

4、沒損毀感受器改換同側后趾有皮膚趾，將其浸入0.5%硫酸溶液中，測定反射時。4.擦或抓反射取一浸有0.5%硫酸溶液的濾紙片貼于虎紋蛙腹部，記錄抓或擦反射的反射時。5.麻醉神經(jīng)右側坐骨神經(jīng)滴加普魯卡因液，加藥同時開始計時，每2min重復步驟3，并記錄加藥時間。屈反射消失后，重復步驟4，記錄加藥時間。6.測左后肢最長趾屈反射時，并與步驟1比較。7.毀壞脊髓，重復步驟7.（二）神經(jīng)干動作電位的測定1.標本制備：坐骨神經(jīng)干（雙毀髓->剝制后肢->分離兩后肢）,分離坐骨神經(jīng)到踝關節(jié)附近，將標本搭置在神經(jīng)屏蔽盒各金屬極上；2.設置實驗裝置：連接神經(jīng)屏蔽盒各接線；3.設置

5、CH3BioAmp和Stimulator：打開PowerLab電源，打開Scope軟件（或Chart5），設置通道3:Ch3BioAmp：Range5mV,Filter20Hz，HighPass10Hz(調零用DC檔）；設置Stimulator：單刺激Delay120ms，波寬Duration:10mS，振幅Ampt:100mV；設置OverlayonTop點右下角Start，即可看到刺激輸出后得到的動作電位波形圖。每點一次START，記錄號增加在圖下方，調節(jié)單刺激持續(xù)時間Duration和振幅大小，以及調節(jié)放大器HighPass等參數(shù)，均對實驗結果有影響

6、。得到雙相電位后，以普魯卡因液或棉線結扎法損傷神經(jīng)，調參數(shù)至振幅Amp5.000mV,，觀察單相電位。5.實驗結果（一）反射時測定和反射弧分析對虎紋蛙進行反射時測定，得左后肢最長趾屈反射時平均值為1.65s,右后肢最長趾屈反射時平均值為2.77s；左后肢最長趾抓反射時平均值為1.99s，右后肢最長趾抓反射平均值為2.67s。由此可得，屈反射與抓反射的反應時相差不大，但本試驗中的虎紋蛙左后肢最長趾反射時比右后肢最長趾要短，反應更為迅敏。結果如表1所示。表1虎紋蛙屈、抓反射時測定數(shù)據(jù)表反射類型第一次反射時（s）第二次反射時(s)第三次反射時(s)均值(s)屈反

7、射左后肢最長趾2.061.741.141.65右后肢最長趾2.012.343.952.77抓反射左后肢最長趾2.721.302.411.99右后肢最長趾2.492.523.012.67當去除右后肢最長趾上皮膚后，屈反射立即消失，但其他趾屈反射仍存在。毀髓后，屈反射立即消失。當?shù)渭悠蒸斂ㄒ蛞汉?，屈、抓反射時會延長，蛙的應激反應鈍化，最終反射消失。用普魯卡因處理右側坐骨神經(jīng)后，右后肢其他趾屈反射在加藥1′14秒后就消失，右側背部抓反射消失較慢。加藥處理2min后，右側背部抓反射時由2.67s延長至3.47s,加藥3′38″后抓反射消失。結果如表2所示、表2虎紋

8、蛙反射弧分析實驗數(shù)據(jù)表實驗項目反射時(s)左（右）后肢最長趾屈反射