生長素結(jié)合蛋白cdna的克隆及其在黃瓜中的表達(dá)

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1、植物學(xué)通報(bào)C""C，5?（%）：#"E#"Y!"#$%&%’())%*#$+,’+*-$.!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!生長素結(jié)合蛋白!"#$的克隆及其在黃瓜中的表達(dá)!白吉?jiǎng)偹蚊鲃⑴彗?張盛林王中鳳（西南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝系重慶!""#$%）摘要利用&’()*&方法從擬南芥（!"#$%&’()%)*+#,%#-#（+,）-./01,）中克隆了生長素結(jié)合蛋白（2345065075089:;<.50$）=>?@，進(jìn)行了全序列測(cè)定。將該基因克

2、隆在9AB$C$的DEF啟動(dòng)子和?;G終止子之間，得到植物表達(dá)載體9DEHI。通過根癌農(nóng)桿菌（!."’$#/*0"%12*1203#/%0-)（FJ5<1.<’;K0G.07）*;00）介導(dǎo)的方法轉(zhuǎn)化黃瓜（41/12%))#*%51)+,）。對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行了)*&和F;3<1.:0檢測(cè)。所得到的轉(zhuǎn)基因黃瓜植株單性結(jié)實(shí)能力增強(qiáng)。關(guān)鍵詞擬南芥，生長素結(jié)合蛋白，黃瓜，轉(zhuǎn)基因%&’()(*’+$,-)(./)(0)(*12’34)(5!"#$6(07389-:2488)’()(%,!,;/42!A@BL5(M2

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6、重要的作用（A./.:207X3.6.7.234，$Y#!；M3G<2VG;0，$YDY）。若子房中生長素含量高，可以形成單性結(jié)實(shí)果實(shí)（M3G<2VG;0，$YDY）。一般認(rèn)為，生長素的生理作用需要生長素受體———內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的生長素結(jié)合蛋白（23450(65075089:;<.50$，@A)$）的參與（+;6U.:207ZU2J6<，$Y[E；F382/20*#,，C"""）。將異源生長素結(jié)合蛋白=>?@轉(zhuǎn)入煙草后，植株對(duì)生長素的敏感性增加（I12080*#,，$YY#；A23U/0*#,，C"""）。我們

7、發(fā)現(xiàn)黃瓜中含有生長素結(jié)合蛋白基因，并已克隆出其=>?@片段。本實(shí)驗(yàn)旨在利用遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)，將異源的擬南芥內(nèi)質(zhì)網(wǎng)!<=>!"重慶市科委應(yīng)用基礎(chǔ)項(xiàng)目（C""$$$CE）。"!通訊作者。@3<1;:V;:=;::.G9;07.0=.,作者簡介：白吉?jiǎng)?，西南農(nóng)業(yè)大學(xué)YY級(jí)蔬菜學(xué)博士研究生。劉佩瑛，教授，博士生導(dǎo)師，中國魔芋協(xié)會(huì)會(huì)長，蔬菜專家。收稿日期：C""$($C(C$接受日期：C""C("C("!責(zé)任編輯：劉暉，崔郁英U;[植物學(xué)通報(bào)>?卷基因?qū)朦S瓜，提高植株內(nèi)!"#$的表達(dá)水平，使子房對(duì)生長素的敏感性增加，

8、從而獲得單性結(jié)實(shí)能力強(qiáng)的黃瓜育種新材料，并為了解!"#$的受體功能提供較為直接的證據(jù)。!材料和方法!"!實(shí)驗(yàn)材料擬南芥（!%&’()*+,(,-.&/(&0&（!"）#$%&’"）采用()*+,-./生態(tài)型，黃瓜（12324(,,&-(52,!"）選用廣泛栽培的“津研四號(hào)”品種。大腸桿菌轉(zhuǎn)化的受體菌為673*/(0#1!，根癌農(nóng)桿菌（!8%*’&3-9%(24-249:&3(90,（2,.3’$34)5&6$&7）()&&）為