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《PRRS滅活疫苗的研制進(jìn)展》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫(kù)。
1、PRRS滅活疫苗的研制進(jìn)展豬繁殖與呼吸綜合征（Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS）又稱“藍(lán)耳病”，該病從20世紀(jì)80年代出現(xiàn)以來(lái)，已給全球的養(yǎng)豬業(yè)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。PRRS滅活疫苗是當(dāng)時(shí)首個(gè)能冇效應(yīng)對(duì)該病的生物制品，它安全、貯存方便、研制周期短，主耍用于預(yù)防后備母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬感染PRRS病毒。合適的毒株、培養(yǎng)條件、滅活工藝與佐劑是該疫苗研發(fā)的關(guān)鍵。木文將討論P(yáng)RRS滅活疫苗研制的最新進(jìn)展。一、毒株的選擇毒株的選擇對(duì)于PRRS滅活疫苗的研制至關(guān)重要。目詢PRRS毒株主要存在歐洲和美洲兩人
2、類型，兩者相似性只有60%；即使是同一個(gè)類型，不同PRRS毒株的同源性也不高，最低的只有85%,這是因?yàn)镻RRS病毒的變界速度相對(duì)較快，Hanada等學(xué)者［1］分析了過(guò)去十多年P(guān)RRS病毒的全基因序列，提出PRRS病毒的進(jìn)化率（103位/年）要明顯高于他RNA病毒（KT"/位/年）。因此，prrs滅活疫苗毒株必須要有代表性，應(yīng)符合疫苗使用地區(qū)流行毒株的特點(diǎn)?？谇吧虡I(yè)上已經(jīng)成功開(kāi)發(fā)了多個(gè)針對(duì)美洲型PRRS毒株（CH?la、ISU?P、JXA1、VD-A1）與歐洲型PRRS毒株（LV、VD-EKVD-E2）的滅活疫苗。它們對(duì)疫苗來(lái)源相同的強(qiáng)毒株都能提
3、供很好的免疫保護(hù)［2-7］o此外，還有-?些滅活疫苗正處于研發(fā)階段,包括歐洲型的PRRS-CY-218-JPD-P5-6-91OrOlotW株［8］,以及美洲型的SD?1毒株［9］等。PRRS滅活疫苗的保護(hù)力一直備受質(zhì)疑，這可能與學(xué)者們?cè)诠ザ緟妓褂脧?qiáng)毒株的不同有關(guān)。Swenson等學(xué)者（1995）證實(shí)，PRRS滅活疫苗可以縮短攻毒后公豬精液中病毒的持續(xù)吋間［11］;兩年后Nielsen學(xué)者再次用來(lái)源相同的滅活疫苗（PRRomiSe?,英特威，疫苗株VR?2402）免疫公豬，但沒(méi)能減少精液屮的病毒含量［10］o兩個(gè)試驗(yàn)不同之處在于前者使用的攻毒株
4、與疫苗株相同（即VR-2402）,后者使用的攻毒株是VR-2385,這說(shuō)明滅活疫苗的交叉保護(hù)力較弱。也有學(xué)者對(duì)此表示異議，Stadejek等學(xué)者發(fā)現(xiàn)，歐洲型PRRS毒株的滅活疫苗對(duì)歐洲型LVPRRS強(qiáng)毒株的免疫失敗，但歐洲型PRRS毒株的弱毒疫苗則可以提供較好的保護(hù)作用［12］。滅活疫苗的GP5蛋白與LV毒株的同源性為99%,而弱毒疫苗的相關(guān)同源性只有93%,以上結(jié)果是建立在屮和抗體有效的基礎(chǔ)之上。此外，Osorio（1998年）和Scortti（2006年）｛Scortti,2006#109｝等兩位學(xué)者的試驗(yàn)表明，弱毒疫苗對(duì)于同型的不同亞群的P
5、RRS強(qiáng)毒，其交義保護(hù)力分別為50%和85%,然而這又如何解釋對(duì)于不同類型的PRRS強(qiáng)毒，弱毒疫苗的交叉保護(hù)性低的現(xiàn)彖？因此，滅活疫苗的保護(hù)效力肯定與毒株的同源性密切相關(guān)，但PRRS弱毒疫苗的交叉保護(hù)性要更優(yōu)于滅活疫苗。滅活疫苗的交叉保護(hù)性較差，以下三種途徑或許可以捉供幫助：一是使用自家苗，國(guó)內(nèi)很多豬場(chǎng)使用該方法。國(guó)外MJBiologies公司也研制出了一種PRRS亞單位滅活疫苗技術(shù)［13］,主要應(yīng)用于自家苗的生產(chǎn)。目前國(guó)內(nèi)有技術(shù)力量的豬場(chǎng)自己生產(chǎn)自家苗，沒(méi)有技術(shù)力量委托市場(chǎng)上的游擊隊(duì)，但這都與嚴(yán)格的GMP生產(chǎn)相矛盾：病料滅活的不徹底、產(chǎn)品和病料
6、的交叉污染、安全檢驗(yàn)的不規(guī)范，使豬場(chǎng)時(shí)刻在“刀刃”上游走，隨時(shí)都有可能暴發(fā)大規(guī)模疫?。欢情_(kāi)發(fā)PRRS滅活多價(jià)苗，勃林格殷格翰公司2004年在屮國(guó)中請(qǐng)的弱毒疫苗專利包括了兩個(gè)疫苗株（疫苗株ATCC保藏號(hào)分別為PTA-6281和6282）［14］；2005年韓國(guó)公司中請(qǐng)的中國(guó)專利，其PRRS二價(jià)滅活疫苗的生產(chǎn)種毒也包含了兩個(gè)疫苗株，即VR-2509（MN-HS毒株）與CNV-1［3］；歐洲捷克Dyntec公司生產(chǎn)的PRRS滅活疫苗，SUIVACPRRS-IN?和SUIVACPRRS?INe?,則分別含有3與2種PRRS疫苗株，其屮SUIVACPRR
7、S4N?疫苗含有一株美洲型疫苗株。三是選擇合適的制作工藝，這對(duì)于保護(hù)毒株的免疫原性罪常重要。包括滅活前病毒含量、滅活工藝、佐劑和乳化工藝，詳見(jiàn)下文。二、病毒培養(yǎng)PRRS滅活疫苗的病毒培養(yǎng)必須注意以下兩點(diǎn)：一是必須達(dá)到一定標(biāo)準(zhǔn)的病毒含量；二是與分離株盡量保持相同的同源性和免疫原性。增加傳代次數(shù)可以提高病毒的TCID50,但綜合考慮研發(fā)時(shí)間和成本，以及保持疫苗株的同源性和免疫原性，PRRS滅活疫苗的培育代次普遍不高。合適的培養(yǎng)細(xì)胞也能提高病毒的TCID50,Marc-145細(xì)胞［5,9,15-21］和MA-104細(xì)胞［22］是目前PRRS滅活疫苗生產(chǎn)
8、的主要細(xì)胞系，此外的生產(chǎn)細(xì)胞系還有豬肺泡巨噬細(xì)豬睪丸細(xì)胞或A?72細(xì)胞［3］。Thomas等學(xué)者述對(duì)MA-104細(xì)胞系進(jìn)行克隆，得到90
