葛花黃酮部位質(zhì)量控制及解酒保肝的藥效學(xué)和作用機(jī)制研究

葛花黃酮部位質(zhì)量控制及解酒保肝的藥效學(xué)和作用機(jī)制研究

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1、中圖分類號論文編號學(xué)科分類號密級?ShanxiUniversityofChineseMedicine碩士學(xué)位論文葛花黃酮部位質(zhì)量控制及解酒保肝的藥效學(xué)和作用機(jī)制研究FlavonoidsinPuerariaelobataflosualitcontrolandrotectliverqyptheraofharmacodnamicsandmechanismresearchpypy研究生姓名:王瑤導(dǎo)師姓名:、職稱裴香萍副教授學(xué)科:、專業(yè)名稱中藥學(xué)研究方向:中藥鑒定與資源研究申請學(xué)位類型:科學(xué)學(xué)位二〇—

2、*b年五月三H—曰山西中醫(yī)學(xué)院學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是個(gè)人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)特別加以注明引用的內(nèi)容外,本論文不含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體,均已在文中以明確方式標(biāo)明并致謝。本人完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。論文作者簽名:z〇/7年X月糾曰關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解山西中醫(yī)學(xué)院有關(guān)保留使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許被查閱和借閱。本人授權(quán)山西中醫(yī)學(xué)院可

3、以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索,可以采用影印、縮印或其他復(fù)印手段保存和匯編本學(xué)位論文。(保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定)論文作者簽名?:5名藏論文導(dǎo)師簽:4年丨占月日"葛花黃酮部位質(zhì)量控制及解酒保肝的藥效學(xué)和作用機(jī)制研究中文摘要目的:葛花為豆科植物野葛(Puerarialobata(Willd.)Ohwi)或甘葛藤(P.thomsoiiBeeth.)的未開放的花蕾,異名葛條花,是我國常用的解酒中藥。近年來,研究報(bào)道葛花解酒保肝的主要有效成分為異黃酮類物質(zhì),與本實(shí)驗(yàn)前期研究相吻合;實(shí)驗(yàn)對葛花黃酮部位進(jìn)行了質(zhì)量控制、藥效學(xué)以及作用機(jī)制的研究,為

4、葛花質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定、臨床應(yīng)用及資源開發(fā)利用提供理論依據(jù)。方法:葛花藥材經(jīng)提取分離純化得到葛花黃酮部位,分別采用薄層色譜法(TLC)和紫外-可見分光光度法(UV)對葛花黃酮部位進(jìn)行主要成分鑒別和總黃酮含量測定;運(yùn)用高效液相色譜(HPLC)法測定葛花黃酮部位中鳶尾苷、鳶尾黃素-7-O-木糖基葡萄糖苷、鳶尾苷元的含量,并建立葛花黃酮部位的色譜指紋圖譜。實(shí)驗(yàn)選擇ICR小鼠建立急性酒精中毒模型,以葛花黃酮部位高、中、低劑量進(jìn)行預(yù)防性干預(yù),通過觀察葛花黃酮部位對醉酒小鼠翻正反射、學(xué)習(xí)記憶能力和運(yùn)動協(xié)調(diào)性的影響和測定小鼠血中乙醇濃度、肝中乙醇脫氫酶(ADH)活性,分析葛花黃酮部位對急性酒精中毒的保

5、護(hù)作用;選擇Wistar大鼠建立急慢性酒精性肝損傷模型,以葛花黃酮部位高、中、低劑量進(jìn)行預(yù)防性干預(yù),檢測急慢性酒精性肝損傷大鼠的血清與肝臟中各項(xiàng)生化指標(biāo)和肝臟病理結(jié)構(gòu)的影響,分析葛花黃酮部位對急慢性酒精性肝損傷大鼠的肝臟保護(hù)作用;運(yùn)用酶聯(lián)免疫ELISA法和熒光定量PCR法檢測慢性酒精性肝損傷大鼠血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)、白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)的含量和肝臟中核因子相關(guān)因子-2(NRF-2)、核轉(zhuǎn)錄因子-κB(NF-κB)、TGF-β1、CD68的mRNA表達(dá),對慢性酒精性肝損傷大鼠的肝臟保護(hù)作用機(jī)制進(jìn)行初

6、步研究分析。結(jié)果:葛花黃酮部位經(jīng)提取分離純化后,用TLC進(jìn)行定性鑒別,專屬性強(qiáng),斑點(diǎn)清晰明顯,分離度較好;建立UV法測定葛花黃酮部位中總黃酮含量,以鳶尾苷為對照的回歸方程Y=0.0742X+0.0123,相關(guān)系數(shù)r=0.9995。方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果:精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性均符合規(guī)定;加樣回收率為97.24~102.32%,RSD為1.80%。葛花黃酮部位的總黃酮含量為93.24%。建立HPLC法同時(shí)測定葛花黃酮部位中3種成分含量的方法,鳶尾黃素-7-O-木糖基葡萄糖苷的回歸方程y=2840528.18x–29185.93,相關(guān)系數(shù)r=0.9999;鳶尾苷的回歸方程y=4444648.3

7、4x–139596.80,相關(guān)系數(shù)r=0.9999;鳶尾苷元的回歸方程y=7328041.12x–61890.82,相關(guān)系數(shù)r=0.9998。方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果:精密度、重復(fù)性、穩(wěn)I山西中醫(yī)學(xué)院2017屆碩士學(xué)位論文定性均符合規(guī)定;鳶尾黃素-7-O-木糖基葡萄糖苷加樣回收率為98.88~103.44%,RSD為1.80%;鳶尾苷加樣回收率為97.26~101.19%,RSD為1.56%;鳶尾苷元加樣回收率為98.80~102.11%,RSD為1.40%。10批葛花黃酮部位

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