《rna干擾》ppt課件

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1、RNA干擾——by法醫(yī)1401班朱芮呼文瑾王智慧目錄概述01機(jī)制02應(yīng)用03問(wèn)題與展望0401RNA干擾的概述定義通過(guò)具特異性靶向作用的雙鏈RNA或小RNA干擾分子，誘導(dǎo)病毒或轉(zhuǎn)座子等的特異性mRNA降解，從而抑制其基因表達(dá)和蛋白質(zhì)合成。是真核生物中一種高度保守的自我保護(hù)機(jī)制。特點(diǎn)具有特異性和高效性作用識(shí)別并抑制外源基因表達(dá),維持生物體基因組完整性。醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)研究技術(shù)——RNA干擾02RNA干擾的機(jī)制醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)研究技術(shù)——RNA干擾病毒基因、人工轉(zhuǎn)入基因、轉(zhuǎn)座子等外源性基因隨機(jī)整合到宿主細(xì)胞基因組內(nèi)，并利用宿主細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)錄時(shí)，常產(chǎn)生一些dsRNA。宿主細(xì)胞對(duì)這些ds

2、RNA迅即產(chǎn)生反應(yīng)，其胞質(zhì)中的核酸內(nèi)切酶Dicer將dsRNA切割成多個(gè)具有特定長(zhǎng)度和結(jié)構(gòu)的小片段RNA（大約20～25核苷酸長(zhǎng)度），即siRNA。醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)研究技術(shù)——RNA干擾siRNA在解旋酶作用下解旋，生成單鏈RNA。由siRNA中的反義鏈和體內(nèi)一些酶（包括內(nèi)切酶、外切酶、解旋酶等）結(jié)合形成RNA沉默復(fù)合體(RNAinducedsilencingcomplex,RISC)在RISC介導(dǎo)下，siRNA降解外源RNA的同源mRNA。醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)研究技術(shù)——RNA干擾RISC與外源性基因表達(dá)的mRNA的同源區(qū)進(jìn)行特異性結(jié)合，RISC具有核酸酶的功能，在結(jié)合部位切割m

3、RNA，切割位點(diǎn)即是與siRNA中反義鏈互補(bǔ)結(jié)合的兩端。被切割后的斷裂mRNA隨即降解，從而誘發(fā)宿主細(xì)胞針對(duì)這些mRNA的降解反應(yīng)。siRNA不僅能引導(dǎo)RISC切割同源單鏈mRNA，而且可作為引物與靶RNA結(jié)合并在RNA聚合酶(RNA-dependentRNApolymerase，RdRP）作用下合成更多新的dsRNA，新合成的dsRNA再由Dicer切割產(chǎn)生大量的次級(jí)siRNA。這種持續(xù)產(chǎn)生大量的siRNA的過(guò)程，不單導(dǎo)致沉默信號(hào)的放大，同時(shí)使靶標(biāo)mRNA不斷減少，呈現(xiàn)基因沉默的現(xiàn)象。因此具有高效性03RNA干擾的應(yīng)用醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)研究技術(shù)——RNA干擾在功能基因組研

4、究中，需要對(duì)特定基因進(jìn)行功能喪失或降低突變，以確定其功能由于RNAi具有高度的序列專(zhuān)一性，可以特異地使特定基因沉默，獲得功能喪失或降低突變，因此RNAi可以作為一種強(qiáng)有力的研究工具，用于功能基因組的研究。醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)研究技術(shù)——RNA干擾用于研究布氏錐蟲(chóng)的正向遺傳學(xué)工具研究丙型肝炎的藥物靶點(diǎn)研究植物基因沉默以用于品種改良等等利用RNAi抑制曼地亞紅豆杉細(xì)胞紫杉14β-羥基化酶基因的表達(dá)01治療HIV感染02治療肝炎病毒感染03治療腫瘤在基因治療中的應(yīng)用醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)研究技術(shù)——RNA干擾遺傳性疾病的治療美國(guó)西北大學(xué)的CarthewRW和日本基因研究所的IshizukaA等

5、人發(fā)現(xiàn)RNAi同脆性X染色體綜合征（與FMR-1基因異常有關(guān)的導(dǎo)致智力低下的染色體?。┲g的關(guān)系密切，揭示了與RNAi相關(guān)機(jī)制的缺陷可能導(dǎo)致人類(lèi)疾病的病理機(jī)制。遺傳性疾病的RNAi治療成為當(dāng)今研究RNAi的又一大熱點(diǎn)。04RNA干擾的展望RNA干擾是生命科學(xué)研究的一大熱點(diǎn)，RNA干擾機(jī)制的進(jìn)一步闡明將為抗病毒基因工程提供更多的理論支持。另外一些基因工程中的新技術(shù)（如Gateway技術(shù))不斷的加入到RNA干擾的研究中來(lái)，為更好的解讀其沉默機(jī)制提供了很好的技術(shù)支撐，相信在我們一定能讀透RNA干擾，并且利用這一機(jī)制為人們解決問(wèn)題。醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)研究技術(shù)——RNA干擾THANK

6、S!