反射弧的分析

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1、反射弧的分析反射時測定和反射弧分析以及神經(jīng)干動作電位的測定1?實驗?zāi)康?.1觀察蛙坐骨神經(jīng)干復(fù)合動作電位的基本波形，并了解其產(chǎn)生的基本原理1.2學(xué)習(xí)測定蛙離題神經(jīng)干上神經(jīng)沖動傳導(dǎo)速度的方法和原理1.3學(xué)習(xí)測定反射時的方法，了解反射弧的組成1.4觀察反射被阻斷的現(xiàn)象2.實驗原理2.1神經(jīng)干在受到有效刺激以后可以產(chǎn)牛復(fù)合動作電位，這標(biāo)志神經(jīng)發(fā)生電位。如果在立體神經(jīng)干的一段施加刺激，可以使用儀器記錄從另一端傳來的興奮活動。若在神經(jīng)干某一段損壞，則儀器記錄到的是單相動作電位。2.2反射是機(jī)體對外界刺激做出的規(guī)律性應(yīng)答。反射活動結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)稱為反射弧，包括感受器、傳人神經(jīng)

2、、神經(jīng)中樞、傳出神經(jīng)、效應(yīng)器。反射時，反射弧任一結(jié)構(gòu)受到損壞，反射不能完成。由于脊髓的機(jī)能比較簡單，所以選用毀腦的蛙作為試驗材料。3?實驗材料與器材3.1實驗材料：蛙(frog)3.2常用手術(shù)器械(手術(shù)剪、手術(shù)鑲、手術(shù)刀、金冠剪、眼科剪、眼科躡、毀髓針、玻璃分針)、蠟盤、蛙板，玻璃板、固定針、鋅銅弓、培養(yǎng)皿或不銹鋼盤、污物缸、滴管、紗布、粗棉線、任氏液、2%普魯卡因、0.5%及1%硫酸溶液、濾紙片、支架、蛙嘴夾、小燒杯、秒表、神經(jīng)屏蔽盒、PowerLab10T＞刺激線、USB線、電腦4?實驗方法與步驟4.1反射時與反射弧的測定4.1.1脊蛙（只毀腦），分離右

3、側(cè)股部坐骨神經(jīng)穿線備用4.1.2夾在支架上，右后肢最長趾浸入0.5%硫酸溶液中2-3mm（<10s）,測屈反射時3次，同樣測左后肢最長趾的。4.1.3損毀感受器實驗4丄4對照沒損毀感受器實驗4.1.5測擦或抓反射（搔扒反射）4.1.6麻醉坐骨神經(jīng)，加藥后每隔2min重復(fù)步驟（4）（記錄加藥時間）4.1.7立即重復(fù)步驟（5）,每隔2min重復(fù)一次步驟（5）直到抓反射消失，記錄吋間4.1.8左側(cè)后肢最長趾反射時有無變化，毀壞脊髓后重復(fù)實驗，記錄結(jié)果。4.2坐骨神經(jīng)干標(biāo)木的制備4.2.1雙毀髓?>剝制后肢■分離兩后肢4.2.2分離坐骨神經(jīng)到踝關(guān)節(jié)附近4

4、.2.3連接實驗裝置4.2.4設(shè)置CH3BioAmp和Stimulator將神經(jīng)干標(biāo)本放入神經(jīng)屏蔽盒4.2.5檢查USB線是否連接，連接刺激線和通道3生物電輸入線到相應(yīng)接頭4.2.6打開PowerLab電源，打開Scope軟件（或Chart5）4.2.7設(shè)置通道3:Ch3BioAmp：Range5mV,Filter20Hz,HighPass10Hz（調(diào)零用DC檔），設(shè)置Stimulator：單刺激Delay120ms，波寬Duration:10mS,振幅Ampl.lOOmV,設(shè)置0verlayonChB或ChA或Top428開始實驗。點(diǎn)右下角Start,即可

5、看到刺激輸出后得到的動作電位波形圖。每點(diǎn)一次START,記錄號增加在圖下方，調(diào)節(jié)單刺激持續(xù)時間Duration和振幅大小，以及調(diào)節(jié)放大器HighPass等參數(shù)，均對實驗結(jié)果有影響5.實驗結(jié)果5.1神經(jīng)干動作電位的測定5.1.1雙相動作電位刺激強(qiáng)度為2.25V時的雙相動作電位（1）朿IJ激強(qiáng)度為3.00V時的雙相動作電位（2）5.1.2單相動作電位刺激強(qiáng)度為3.25V的單相動作電位5.2反射弧分析6.分析與討論：6.1復(fù)合神經(jīng)干動作電位的測定6.1.1雙相動作電位從5.1圖可以看到雙相動作電位呈現(xiàn)先升后降。當(dāng)復(fù)合神經(jīng)干沒有受刺激時，呈現(xiàn)內(nèi)負(fù)（負(fù)電位）外正（正電

6、極），故膜外都呈現(xiàn)正電，即外膜與電極所接觸的兩點(diǎn)之間沒有電位差，所以兩電極之間也無電位差存在,掃描線為一水平基線。在神經(jīng)干一端給予電刺激后，則產(chǎn)生一個向兩邊傳導(dǎo)的沖動（負(fù)電位），與原來的膜外為正電極相反，產(chǎn)生了電位差（由正變?yōu)樨?fù)），掃描線向上偏轉(zhuǎn)，記錄出一個向上的波形。（查閱文獻(xiàn)得，負(fù)波規(guī)定為止）。隨后，沖動繼續(xù)向傳導(dǎo)，由一開始刺激處傳向兩邊。當(dāng)它到達(dá)被測電極所在的下方時，由于最開始刺激的神經(jīng)已經(jīng)恢復(fù)原先的電位水平了（由負(fù)變?yōu)檎?，于是被測電極相對于最開始刺激的神經(jīng)為負(fù)，引起掃描線向下偏轉(zhuǎn)，記錄出一個向下的波形。故圖上記錄出了一個先升后降的雙相動作電位。同時

7、，雙相動作電位的上、下兩相幅值并不一致。這與實驗所用的復(fù)合神經(jīng)有關(guān)，因為復(fù)合神經(jīng)的粗細(xì)程度并不一定。6.1.2單相動作電位如果兩個引導(dǎo)電極之間的神經(jīng)纖維完全損傷，興奮波只通過第一個引導(dǎo)電極，不能傳至第二個引導(dǎo)電極，則只能引導(dǎo)出一個方向的電位偏轉(zhuǎn)波形，稱為單相動作電位。在此次實驗中，我們小組的單相動作電位比較容易測得，而雙相動作電位則比較難。可能又以下原來：1、神經(jīng)屏蔽盒內(nèi)的輸入線路受阻。因為當(dāng)輸入線路受阻時，即相當(dāng)于刺激只能在刺激處產(chǎn)生動作電位，而動作電位卻不能繼續(xù)朝受阻的方向傳導(dǎo)，故呈現(xiàn)單相動作電位。2、復(fù)合神經(jīng)干的受阻。由于在剝離神經(jīng)干的時候要切掉一些旁

8、支的神經(jīng)干，也有可能使坐骨神經(jīng)受到損傷。6.2反射弧