同工酶在疾病診斷中的應(yīng)用綜述

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1、同工酶在疾病診斷中的應(yīng)用1342905徐俊超摘要:同工酶是指能催化相同的化學(xué)反應(yīng)、但酶蛋口的分子組成、分子結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)乃至免疫學(xué)性質(zhì)和電泳行為都不相同的一-組酶,是牛:命在長期進(jìn)化過程中基因分化的產(chǎn)物。本文主耍分析同工酶在骨骼、腫瘤、心血管疾病等方而的診斷作用,并闡述其醫(yī)學(xué)意義。Abstract:Isozymereferstoasetofenzymecatalyzingthesamechemicalreaction,whosecompositionofzymoproteinmolecule,molecularstruct

2、ureandphysicochcmicalpropertiesandimmunologicalpropertiesandelectrophoreticbehaviorarenotthesame,whichisaproductduringthelongevolutionintheprocessofgeneticdifferentiationoflife>Thispapermainlyanalyzestheisozymeinsuchaspectsasbone,tumor,cardiovasculardiseasediagnos

3、is,andexplainsitsmedicalsignificance.1?同工酶在骨骼疾病診斷中的應(yīng)用1.1同工酶在骨質(zhì)毓松診斷中的應(yīng)用1.1.1代表同工酶:骨堿性磷酸同工酶(BAP)1.1.2診斷方法及原理:先通過親和層析法將BAP分離出來,再通過顯色反應(yīng)測定。骨質(zhì)疏松患者由于骨量缺矢成骨細(xì)胞活性代償性升高,而BAP是山成骨細(xì)胞分泌的酶,因此患者的BPA活性會相應(yīng)地增高,能反應(yīng)成骨細(xì)胞的活性,即BAP對骨質(zhì)疏松的診斷陽性率最鬲,從而幫助診斷骨質(zhì)疏松癥。1.1.3醫(yī)學(xué)意義:①骨密度測最在疾病階段上侑局限性且花費(fèi)昂貴。②

4、骨活檢對人體有肓接損傷。③BAP的檢測相比所受影響因素較多的鈣、磷更能有效及時且穩(wěn)定地反應(yīng)骨形成率。④與廣泛尋在于人體各組織器官中的ALP相比,BAP更貝有特界性。⑤BAP對■長吋間的冰凍儲存和反復(fù)凍融的活性丟失少,在4°C、37°C和?40°C能分別保存16天、1天和10個月。⑴1.2同工酶在佝僂病診斷屮的應(yīng)用1.2.1代表同工酶:骨堿性磷酸同工酶(BALP)1.2.2診斷方法及原理:取患兒末梢循環(huán)全血一滴,約30M進(jìn)行BALP檢測採用骨堿性磷酸酶(BALP)試劑盒,依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)色板檢驗結(jié)果。正常參考值為<200U/L,20

5、0?250U/L為可疑病例?>250U/L為診斷佝僂病的臨界值。佝僂病患者體內(nèi)缺乏維生素D,造成骨樣骨細(xì)胞鈣鹽沉積不足,骨礦化減弱,使BALP異常升高。1.2.3醫(yī)學(xué)意義:①佝僂病早期癥狀體征多缺乏特界性,易造成漏診。②X射線攝片在激期之后才比較有意義,即在骨礦含量降至30%?40%以下時才能發(fā)現(xiàn)界常,且X射線對嬰幼兒傷害較大,家長較為抗拒。③BALP檢測操作簡便快捷、特異性高、町減少漏診率,是臨床一個準(zhǔn)確口J靠的生化指標(biāo),對佝僂病早期診斷具有重要的指導(dǎo)價值,值得基層醫(yī)院推廣。⑵2?同工酶在腫瘤、癌癥診斷中的應(yīng)用2.1同工

6、酶在腫瘤診斷中的應(yīng)用2.1.1代表同工酶:堿性磷酸酶(ALP)同工酣2.1.2診斷方法及原理:收集患者血清,先經(jīng)ALP活性測定以及熱失活的初步處理,然后用神經(jīng)氨酸廿酶處理標(biāo)本,最后用瓊脂糖等電聚焦法進(jìn)行各區(qū)帶等電點的測定。神經(jīng)氨酸井酶可切割A(yù)LP側(cè)鏈的II垂液酸殘基,使分子所帶負(fù)電荷減少,從而使區(qū)帶向陽極泳動速度減慢,用神經(jīng)氨酸昔酶處理血清以后,再進(jìn)行瓊脂糖等電聚焦,能將混在一起的肝和骨ALP同工酶分成等電點不同的區(qū)帶。2.1.3醫(yī)學(xué)意義:①瓊脂糖等電聚焦可以提高了靈敏度和分辨率,優(yōu)化了分離,解除了早先瓊脂糖電泳法、瓊脂電

7、泳法等難以分離月T和骨同工酶等限制。②腫瘤患者的血清中存在有特殊區(qū)帶,等電點為6.2的區(qū)帶對診斷腫瘤具有參考價值。[3]2.2同工酶在肝癌和肝癌骨轉(zhuǎn)移診斷中的應(yīng)用2.2.1代表同工酶:堿性磷酸酶(ALP)同工酶2.2.2診斷方法及原理:采集患者的非抗凝空腹血3ML,分離血清,用神經(jīng)氨酸首酶處理標(biāo)本,再進(jìn)行熱失活,接著等電聚焦法(IEF)檢測,測定肝臟疾病患者血清中的ALP同工酶,在肝癌患者中PI6.5的檢出率明顯較高,在肝癌骨轉(zhuǎn)移者屮PI6.1的檢出率也有顯著增高。2.2.3醫(yī)學(xué)意義:?ALP總活性升高無法判斷其來源是肝還

8、是骨ALP』ljIEF可分離出4種亞型。②經(jīng)改良的瓊脂糖等電聚焦法相對現(xiàn)有分離ALP同工酶的方法操作更簡便,價格更低廉,靈敏度更高,無需特殊的儀器設(shè)備,尤其適合于實驗室診斷。③PI6.5亞型對作為肝癌鑒別診斷指標(biāo),P16.1亞型町作為肝癌骨轉(zhuǎn)移鑒別診斷的指標(biāo)。[4]3?同工酶在心血管系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用3.

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