幼鼠顳葉癲癇模型匹羅卡品致癇后潛伏期末海馬的形態(tài)學(xué)以及蛋白表達(dá)譜變化

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1、,z(6)://www.cs啪ea-orsjh腳一-netDOI'.IO.3969/j.5ssn.1672—7347.2013.06.003http://xbyx.xysm.,net/xbwk/fileup/PDF/201306560.pdf幼鼠顳葉癲癇模型匹羅卡品致癇后潛伏期末海馬的形態(tài)學(xué)以及蛋白表達(dá)譜變化吳麗文,尹飛,彭鏡,何芳,張慈柳,鄧小鹿,王國麗(中南大學(xué)湘雅醫(yī)院兒科教研室,長沙410008J'[摘要】目的:研究發(fā)育期大鼠慢性內(nèi)側(cè)顳葉癲癇(mesialtemporallobeepilepsy,MTLE)模型潛伏期末海馬的形態(tài)學(xué)以及蛋白表達(dá)譜變化,揭示慢性MTLE發(fā)病機(jī)制。方法:

2、建立氯化鋰一匹羅卡品誘導(dǎo)的發(fā)育期大鼠MTLE模型,取致癇后3周末的對照組(=20)和MTLE模型組(n=20)大鼠為研究對象,尼氏及Timm染色觀察海馬神經(jīng)元丟失和苔蘚纖維出芽情況;采用二維凝膠電泳(twodimensionalgelelectrophoresis,2-DE)結(jié)合質(zhì)譜分析對兩組間的差異表達(dá)蛋白質(zhì)進(jìn)行鑒定;Western印跡對部分差異表達(dá)蛋白進(jìn)行印證。結(jié)果:MTLE模型組海馬內(nèi)可見明顯的海馬神經(jīng)元丟失和苔蘚纖維出芽;建立了發(fā)育期大鼠慢性MTLE模型潛伏期末的海馬蛋白質(zhì)2-DE圖譜,共鑒定了差異表達(dá)蛋白質(zhì)31個(gè),分別屬于神經(jīng)遞質(zhì)和突觸發(fā)生相關(guān)的蛋白、細(xì)胞骨架蛋白、細(xì)胞連接蛋白

3、、能量代謝和線粒體功能蛋白、生物活性酶類、細(xì)胞結(jié)構(gòu)相關(guān)蛋白質(zhì)以及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)蛋白質(zhì)等;Western印跡對部分蛋白水平檢測的結(jié)果與蛋白質(zhì)組學(xué)結(jié)果一致。結(jié)論:Dynamin一1,neurogranin和ubiquitin等一系列突觸相關(guān)的蛋白表達(dá)異常,可導(dǎo)致突觸重構(gòu)、異常苔蘚纖維增生和異常神經(jīng)興奮環(huán)路的形成,是MTLE發(fā)病機(jī)制中至關(guān)重要的環(huán)節(jié)?!娟P(guān)鍵詞】內(nèi)側(cè)顳葉癲癇;海馬;潛伏期;發(fā)病機(jī)制;蛋白質(zhì)組學(xué)Morphologyanddifferentiallyexpressedproteinsinhippocampusofmesialtemporallobeepilepsymodelofl●mm

4、at.Urerat。S●na■UCed■D■yDl●l●oCarDi●neWULiwen,YINFei,PENGJing,HEFang,ZHANGCiliu,DENGXiaolu,WANGGuoli(DepartmentofPediatrics,XiangyaHospitaljCentralSouthUniversity,Changsha410008,China)ABSTlUTObjective:Toexaminethechangesofmorphologyanddifferentiallyexpressedproteinsinhippocampusatthelatentstageofc

5、hronicmesialtemporallobeepilepsy(MTLE)inimmaturerats,andtoexploretheglobalmechanismofchronicMTLEatanewpoint.收稿日期(Dateofreception】:2012."09—19作者簡介(Biography):吳麗文,博士,主治醫(yī)師,主要從事小兒神經(jīng)系統(tǒng)疾病的研究。通信作者(Correspondingauthor):尹飛,Emaihyf2323~hotmail.com基金項(xiàng)目(Foundationitems):國家自然科學(xué)基金青年基金(811008461);中南大學(xué)青年教師助推項(xiàng)目(2

6、011QNZT152)。IbisworkwassupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChinaYouthFundPr0ject(81100846)andYoungTeachersofCentralSouthUniversityBoosterProject,P.R.China(2011Q.NZT1S2).幼鼠顳葉癲癇模型匹羅卡品致癇后潛伏期末海馬的形態(tài)學(xué)以及蛋白表達(dá)譜變化吳麗文,等Methods:MTLEmodelsofimmatureratswereinducedbylithium—pilocarpine.Theratswered

7、ividedinto2groupsrandomly:acontrolgroup(n=20)andanMTLEmodelgroup(n=20).Atthelatentstage,nisslandTimmstainingwereperformedtoevaluatethecelllossandmossyfibersprouting.Thediferentiallyexpressedproteinswereseparatedby2-dim

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