病毒外源因子檢測方法的探討

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1、?3102?現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志ModernJournalofIntegratedTraditionalChineseandWesternMedicine2004Dec,13(23)病毒外源因子檢測方法的探討呂文利,趙麗萍,田華,程榮華,向玉琴,程曉載(武漢生物制品研究所,湖北武漢430060)[摘要]■鉗對病卓類制品的外源因子檢測方法進行程證和援討。才法采用動物實臉法現(xiàn)察動物炳、死等感染情況;采用納胞培養(yǎng)法通過現(xiàn)察t及血吸附試臉來判定外源因子感染情況。結果動物實驗法和細胞培養(yǎng)法均能從不同的側面反映出*種或者疫苗的外源因子汚變情況。結論動物實驗法和細胞培

2、養(yǎng)法可用于炳*類創(chuàng)島的卓種逸f和疫苗生產中的外汲因子檢測,但在反映是何種外源因子污染上仍有不足。[關■詞]外源因子;血吸附;細胞培養(yǎng);感染現(xiàn)韋[中圖分類號]R373[文駅標識碼]A[文章細號]1008-8849(2004)23-StudyoftestmethodofadventitiousvirusagentLVWen-B,ZHAOLi-pingtTIANHua,CHENGRong-hua,XIANGYu-qin,CHENGXiaoyi(WuhanInstititeofBiologicalProducts,Wuhan430060,Hubei,China

3、)Abstract:ObjectiveItistoconfirmanddiscussthetestmethodofadventitiousvirusagent.MethodsTheanimalinfectionsituationincludingillnessanddeathandsoonwasobservedwithanimalexperimentmethod,adventitiousagentinfectionsituationwasjudgedthroughobservingthecellularpathologicalchangesandbl

4、oodabsorptionexperimentwithcellculturetest.ResultsAdventitiousagentcontaminativesituationofpathc^enicbacteriaorbacterinwasreflectedwithanimalexperi?mentmethodandcellculturemethodfromdifferentsides.ConclusionAnimalexperimentmethodandcellculturemethodcanbeusedaspathogenicbacteriab

5、reedingselectionofvirusproductsandadventitiousagentexamineduringbacterinproduction,buttheyhaveinsufficiencyonreflectingadventitiousagentcontaminativetype?Keywords:adventitiousagent;bloodabsorption;cellculture;infectionphenomena病毒類制品在毒種的選育和疫苗的生產過程中經常需要進行細胞培養(yǎng),所以有可能造成外源因子(待別趣外源病毒因子

6、)的污染。為了保證產品質■,需要對癱種或疫苗進行外源因子的檢測⑴。目前國內外源因子檢測方法較不統(tǒng)一,標準不很明確,而外源因子對細胞的總染不同于細鯛戀染,檄染細菌的細胞或者原液有明顯的特征,很容易辨別。而病壽類外源因子感染細胞后短期內肉眼難以分辨,需通過一定的檢測方法進行檢測。筆者對外源因子的檢測方法進行驗證和探討,以期提供一種疫苗制備和毒種選育過程中可參照的外源因子檢測方法。1實驗資料1.1一般資料乙腦減毒活疫苗(批號20021035);乙腦病毒免疫血清(批號9999),中檢所提供;配制稀釋液0.5%Hank's水僧乳蛋白;小鼠(15~20g)20只;

7、乳鼠(一日齡)20只;豚農3只;本所FL、Vero和PHK細胞各若干瓶。1.2方法1.2.1動物實驗法[作者簡介]呂文利(1968—),女,醫(yī)學生物工程評,現(xiàn)任武漢生物iw品研究所乙騎室主任。1.2.1.1試劑調配法先將乙腦減毒活疫苗3支用稀釋液原倍還原,并溶解均勻,於后稀釋100倍(10?2),再將乙腦病灌免疫血清2支用稀釋液原倍還原,溶解均勻。試驗組:取KT?疫苗1.5mL,加入乙腦病壽免疫血清1.5mL,W37V,1.5h,l:l中和?中和后的樣品再進行10倍稀釋?疫苗終濃度2X107,即為中和樣品。血清對照組:取乙腦耕毒免疫血清0.5mL,加入

8、稀釋液0.5mL,?37X:,1.5h,l:l中和對照,其樣品仍進行10倍稀釋,終玻度2X10

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