血凝試驗(yàn)檢查影響因素研究

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1、血凝試驗(yàn)檢查影響因素研究1血樣的采集與處理11采血技術(shù)患者應(yīng)處于平靜狀態(tài)、空腹；采血前不應(yīng)拍打采血部位，必須順利“一針見(jiàn)血”，避免混入組織液或發(fā)生溶血；壓脈帶不應(yīng)扎的太緊，壓迫時(shí)間不應(yīng)過(guò)長(zhǎng)；采血速度要適當(dāng)，建議使用定量真空采血管；采血后要立即與抗凝劑混合，但不要用力震蕩。采血順序?qū)υ囼?yàn)結(jié)果也有影響,朱忠勇報(bào)道［1］：PT血樣采集順序第二管、第三管與第一管比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，APTT的差異則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。12標(biāo)本運(yùn)輸、保存與處理標(biāo)本應(yīng)隨采隨檢，如需運(yùn)輸標(biāo)本應(yīng)在室溫下運(yùn)送，低溫會(huì)破壞血小板活化因子導(dǎo)致PT、APTT結(jié)果降低。血漿標(biāo)本原則上應(yīng)立即檢測(cè)，血液一旦離體即開(kāi)始變化

2、，隨離體時(shí)間的延長(zhǎng)凝血因子逐漸消耗,從而檢測(cè)出的結(jié)果也不同。分離血漿置室溫2h所測(cè)結(jié)果與立即測(cè)定PT、APTT結(jié)果有明顯差異(PvO01)［2］o凝血試驗(yàn)應(yīng)在室溫保存4h內(nèi)完成，如不能完成應(yīng)49保存,24h內(nèi)完成。209保存的標(biāo)本應(yīng)1周內(nèi)完成檢測(cè)，否則會(huì)對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響［3卜血液離心是凝血試驗(yàn)標(biāo)本處理的關(guān)鍵步驟,離心的目的就是盡可能地除去血漿中的血小板，以便排除血小板數(shù)量和功能對(duì)試驗(yàn)的影響。有報(bào)道認(rèn)為標(biāo)本離心的相對(duì)離心力RCF>2000g,離心時(shí)間不少于15min為宜[4]□13抗凝劑的選擇抗凝劑的選擇對(duì)血凝檢測(cè)結(jié)果起著重要作用，根據(jù)ICSH及ICTH推薦的0019mol

3、/L枸橡酸鈉是凝血因子檢測(cè)的首選抗凝劑。因枸橡酸鈉對(duì)V、V川因子有一定的保護(hù)作用，不受肝素影響，還適用于接受肝素治療患者的監(jiān)測(cè)。而草酸鹽能與鈣離子形成不溶性沉淀物，影響血凝儀的光電終點(diǎn)。肝素可與AT山作用抑制凝血因子的反應(yīng)。EDTA能抑制或干涉纖維蛋白凝塊形成纖維蛋白原單體聚合，且對(duì)V因子保護(hù)性差。血液與抗凝劑的比例應(yīng)按9:1比例混合，9份血液指9份紅細(xì)胞壓積正常血液中血漿的量，抗凝劑只對(duì)血漿起作用，如抗凝劑加入不準(zhǔn)確會(huì)影響血凝結(jié)果。另外，由于貧血或紅細(xì)胞增多癥影響血漿量的變化而引起抗凝劑在血漿中絕對(duì)含量改變，也會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。因此在日常工作中要注意紅細(xì)胞壓積的變化，當(dāng)

4、HCT超出或低于正常范圍時(shí)，應(yīng)用計(jì)算公式隨時(shí)調(diào)整抗凝劑的用量，以保證抗凝劑在血漿中的絕對(duì)值含量不變[5]□2試劑11試劑的選擇試劑的質(zhì)量是確保結(jié)果可靠性的先決條件，試劑的選擇一方面要根據(jù)所用檢測(cè)儀器的類(lèi)型，另一方面要根據(jù)試驗(yàn)檢測(cè)目的選擇對(duì)其敏感的試劑。為了試驗(yàn)結(jié)果便于比較和估計(jì)抗凝劑療效或指導(dǎo)用藥，最好選擇INR報(bào)告方式。因此，選擇試劑應(yīng)標(biāo)有ISI值，理論上ISI值越接近10越好，ISI值的高低決定INR的精度，也決定試劑的質(zhì)量[6]□22試劑的使用及保存121試劑在使用時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作。試劑復(fù)溶劑一般為蒸憎水、注射用水或pH60~70去離子水。復(fù)溶劑pH值增高會(huì)使

5、凝血時(shí)間延長(zhǎng)；若水質(zhì)渾濁污染或鈣離子存在，或含有保護(hù)劑抗生素抗體或其他添加劑的水，不能用于試劑的復(fù)溶劑。復(fù)溶后的試劑不能反復(fù)凍融，不用時(shí)應(yīng)加蓋并保存在2?89,所有試劑均應(yīng)在有效期內(nèi)使用。122試劑使用時(shí)要注意污染的問(wèn)題，避免試劑瓶蓋蓋錯(cuò)，造成交叉污染。3操作因素試驗(yàn)操作技術(shù)對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果有很大的影響，很微小的變化也會(huì)造成試驗(yàn)結(jié)果的明顯變化。21首先要檢查儀器電源、光源是否穩(wěn)定，預(yù)熱時(shí)間或溫度設(shè)置是否正確。22檢查所有試劑、緩沖液、標(biāo)本是否合格，如有問(wèn)題及時(shí)更換。33每次檢測(cè)之前，應(yīng)先檢測(cè)參比血漿或質(zhì)控血漿以確保檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。14加試劑時(shí)要防止氣泡產(chǎn)生，無(wú)論是透射光還是散射

6、光測(cè)定，防止氣泡產(chǎn)生是確保結(jié)果準(zhǔn)確性的前提，有氣泡時(shí)凝血時(shí)間會(huì)假性延長(zhǎng)。4藥物與疾病因素某些藥物本身就影響凝血機(jī)制，如水合氯醛、阿司匹林、保泰松、氯貝丁酯、口引喙美辛等可使口服抗凝藥物在血液中濃度明顯增高。大劑量使用青霉素（血漿濃度達(dá)5000u/ml）可使PT、APTT明顯延長(zhǎng)，且隨藥物濃度的增加而延長(zhǎng)[7]□頭胞哌酮分子中甲硫甲哩環(huán)的側(cè)鏈與前凝血酶原相仿，干擾凝血檢測(cè)結(jié)果?？Ⅴ慑e(cuò)誤地與抗生素結(jié)合而導(dǎo)致凝血酶原的形成減少導(dǎo)致低凝血酶血癥[8]o肝素、華法林、雙香豆素、低分子右旋糖酹等可抑制凝血酶，影響纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白，阻止血小板的黏附和聚集，使血漿中抗凝物質(zhì)含量

7、增多，影響凝血試驗(yàn)使凝固時(shí)間延長(zhǎng)。除藥物對(duì)凝血試驗(yàn)結(jié)果的影響之外，很多疾病也對(duì)凝血結(jié)果有影響。如DIC時(shí)，由于凝血因子的大量消耗以及產(chǎn)生的FDP拮抗凝血酶，可使PT延長(zhǎng)。但在DIC早期，患者血液處于高凝狀態(tài)，PT縮短。因此，分析血凝結(jié)果一定要結(jié)合患者病情進(jìn)展程度。各種疾病導(dǎo)致溶血、黃疸脂血，會(huì)縮短APTTo高血壓或急性呼吸窘迫綜合征等疾病會(huì)導(dǎo)致凝血功能顯著增強(qiáng)，繼而引起一系列敏感指標(biāo)的改變。另外,季節(jié)變化以及飲食因素等都對(duì)凝血實(shí)驗(yàn)有影響，如茶葉中的茶多酚，桔汁中的枸椽酸鹽，海帶中的藻酸雙酯鈉等都有抗凝作用。由此可見(jiàn)，血凝試驗(yàn)的結(jié)果受多方面