中國野生葡萄資源抗白腐病鑒定及抗性種質(zhì)篩選

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1、中國野生葡萄資源抗白腐病鑒定及抗性種質(zhì)篩選摘要：【目的】葡萄白腐病是引起葡萄減產(chǎn)的重要病害，葡萄白腐病不但在我國流行嚴重，在世界上主要葡萄產(chǎn)區(qū)都有發(fā)生，由于白腐病菌難以防治，挖掘抗病種質(zhì)有利于抗病機制研究及抗病育種的開展?！痉椒ā垦芯坷檬覂?nèi)離體甘絲接種的方法，對收集到的中國野生葡萄種質(zhì)17個種、亞種及種間雜種的35個株系進行葡萄抗白腐病鑒定?！窘Y(jié)果】結(jié)果表明，中國野生葡萄不同種之間對白腐病的抗性存在差異,其中都安毛葡萄、塘尾葡萄實生、刺葡萄刺葡萄＜?、舞鋼廟街桑葉、婁奠武漢A1、靈寶變?nèi)~、燕山葡萄0947為抗病株系，刺葡萄b為最抗病的

2、株系，是研究抗白腐病機理的理想材料?！窘Y(jié)論】在中國野生葡萄中存在葡萄白腐病的抗性植株。關(guān)鍵詞：中國野生葡萄；抗??；葡萄白腐病；離體接中圖分類號：S663.1文獻標志碼：A文章編號：1009-9980?穴2013??02-0191-06葡萄是我國栽培最廣泛的水果之一，2010年，我國葡萄栽培面積為55.2萬hm2,總產(chǎn)量達843萬t,為世界第2位和第1位(來源于FAO,2010年)，并且還在逐年增加，與葡萄產(chǎn)業(yè)的發(fā)展伴隨的是葡萄病害的發(fā)生和危害，白腐病是嚴重危害葡萄生產(chǎn)的四大病害之一，對葡萄的危害包括降低樹勢、損毀枝蔓、降低產(chǎn)量甚至引起絕

3、收，嚴重威脅葡萄生產(chǎn)，如何提高葡萄對白腐病的抗性是亟待解決的問題。葡萄白腐病又稱腐爛病，致病菌為Coniothyriumdiplodiella(Speq.)Sacc,屬于殼小圓電屬，為葡萄專性寄生，不僅危害果粒還危害枝條和葉片，是葡萄生長期引起果實腐爛、導致減產(chǎn)的主要病害。我國葡萄的主要栽培品種是歐亞種，但是歐亞種對白腐病都缺乏抗性，起源于中國葡萄屬植物種類多、遺傳資源豐富，已知的葡萄野生種約38個種，種類約占世界的60%,并且新種還時有發(fā)現(xiàn)［1］，在這些野生種中蘊含大量的抗性資源［2］,在前人的研究中刺葡萄、山葡萄和華東葡萄中都有抗病

4、的株系［3］，但是受資源收集數(shù)量的限制，缺乏對中國野生葡萄資源的全面系統(tǒng)的評價。挖掘真正的抗病種質(zhì)，研究中國野生資源的抗性機理對改良現(xiàn)有栽培品種的抗性、培育抗性新種質(zhì)有重要的實踐和理論意義?？共⌒匀斯そ臃N鑒定法可以避免田間環(huán)境條件和病原種類、數(shù)量的差異。因此，在相同條件下，采用統(tǒng)一的評價方法和評價指標對大量種質(zhì)資進行抗病性的系統(tǒng)評價具有十分迫切的需求。由于利用病菌鞄子接種及室外接種的鑒定方法極易受到外界環(huán)境的影響，如濕度、溫度的變化會影響病原翹子的萌發(fā)率，從而影響實驗結(jié)果，獲得可靠的結(jié)果需要幾年的連續(xù)調(diào)查。本研究借鑒前人的鑒定方法[4]

5、,研究者采用室內(nèi)離體鑒定的方法，避免外界條件的影響；同時采用菌絲體接種避免因抱子萌發(fā)不整齊的誤差，制造傷口打破葉片結(jié)構(gòu)性引起的抗性反應，以期快速準確鑒定中國葡萄野生種質(zhì)中的抗病株系，并為其抗病機理的研究提供材料及理論基礎(chǔ)。1材料和方法1.1試驗材料試驗材料均采自鄭州果樹研究所國家種質(zhì)（葡萄）資源編號為資源圃編號1.2病菌培養(yǎng)葡萄白腐病病原菌來源于中國農(nóng)業(yè)科學院植物保護研究所。葡萄白腐病病菌為葡萄專性寄生，可以離體培養(yǎng)，將病接種于PDA固體培養(yǎng)基上，289下黑暗培養(yǎng)，3d后菌絲均勻分布，但未產(chǎn)生砲子，49保存?zhèn)溆谩?.3接種及保濕方法取枝

6、條上中部成熟葉片（葉齡10-15d）,每個處理取6枚葉片，將菌餅和無菌PDA塊（CK）分別接種葉片的正面,刺傷時避開葉片主脈，每個葉片接種1?4處，分布于葉片的不同位置，同時設(shè)6個重復，將接種后的葉片放入大培養(yǎng)皿的下底內(nèi)，上蓋覆浸濕但不滴水的濾紙，不能接觸葉片,封口膜密封保濕，289黑暗培養(yǎng)。1.4傷口處理方法以'康可'和'紅地球'為試材，采用無傷、接種1針刺傷、5針刺傷（均勻分布在菌餅下直徑2mm的圓形區(qū)域內(nèi)，下同）等3種傷口處理方式，試驗重復3次，連續(xù)觀察。1.5葉片正反面接種處理以'康可'和'紅地球'為試材，分別設(shè)正、反面接種處理

7、，利用1.2和1.3中的方法進行處理。1.6處理時間以'康可'和'紅地球'為試材，接種后利用1.2和1.3中的方法進行處理，并在接種60h后統(tǒng)計。該試驗重復2次，連續(xù)2a統(tǒng)計結(jié)果。1.7種質(zhì)鑒定綜合分析1.2、1.3,1.4處理的結(jié)果，選擇最佳處理條件,對已經(jīng)收集到的中國野生葡萄資源的不同種及株系，進行白腐病抗性鑒定及抗性種質(zhì)篩選。以美洲種的'康可'和歐亞種的'紅地球'為參照。1.8結(jié)果統(tǒng)計及分析方法采用十字交叉法測量病斑直徑，處理間的差異顯著性分析用DuncanJsMultipleRangeTest進行，以常見的“紅地球'和'康可'為

8、分級參照，抗性分級如下：A康可康可'紅地球IIV紅地球,，篩選抗性種質(zhì)。2結(jié)果與分析葡萄種質(zhì)資源鑒定刺傷條件為了確定葉片發(fā)病程度與傷口之間關(guān)系，以'康可'和'紅地球'為試材，采用未針刺、1針刺和5針刺3種處