YCT《白肋煙煙堿轉化株鑒定規(guī)程》

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1、YC/T《白肋煙煙堿轉化株鑒定規(guī)程》編制說明1工作簡況1.1任務來源;該項目來源于國家煙草專賣局文件國煙科〔2013〕115號《國家煙草專賣局關于印發(fā)2013年度煙草行業(yè)標準制修訂項目計劃的通知》。1.2項目承擔單位、協(xié)作單位及主要分工;該項目牽頭單位為國家煙草栽培生理生化研究基地,協(xié)作單位包括中國煙草白肋煙試驗站、四川省煙草公司、云南省煙草公司大理州公司和云南省煙草農業(yè)研究院。各單位任務分工如下:序號單位名稱項目聯(lián)系人任務分工1國家煙草栽培生理生化研究基地史宏志主持該標準項目,制定方案,項目實施,

2、起草標準2中國煙草白肋煙試驗站李進平項目實施,標準驗證,標準應用3四川省煙草公司楊興有項目實施,標準驗證,標準應用4云南省煙草公司大理州公司徐發(fā)華項目實施,標準驗證,標準應用5云南省煙草農業(yè)科學研究院雷麗萍項目實施,標準驗證,標準應用1.3主要工作過程(起草、試驗驗證、征求意見、送審、報批等環(huán)節(jié)及項目研討會等內容);該項目任務下達后,按照合同約定,制定了項目實施方案。各承擔單位積極開展了研究工作。國家煙草栽培生理生化研究基地初步起草了白肋煙煙堿轉化株鑒定標準,并與四川省煙草公司和云南省煙草公司大理州

3、公司聯(lián)合進行標準的試驗和驗證,通過在大田設置田間試驗比較不同鑒別標準對降低后代群體煙堿轉化株和煙草特有亞硝胺含量的效果,取得預期結果,證實了該標準的科學性和有效性。中國煙草白肋煙試驗站和云南省煙草農業(yè)研究院也采用該標準對所選育的白肋煙品種進行驗證,取得了較好的應用效果。在試驗驗證的基礎上,我們對標準草案進行了修改,以使標準更具操作性和實用性。下一步,計劃將標準草案在更廣的范圍內征求意見。1.4標準主要起草人及其所做的工作等。標準起草人為史宏志、楊興有、李進平、徐發(fā)華、雷麗萍、楊惠娟、楊永霞、劉國順、

4、覃克炳、孫軍偉、陳志華、李宗平、靳冬梅。其中史宏志、楊興有、徐發(fā)華、李進平、雷麗萍、楊惠娟、楊永霞、劉國順主要進行標準的研究方案制定、試驗研究及標準驗證,其他人員主要進行了標準的驗證和應用工作。2相關領域的國、內外標準研究和制修訂情況白肋煙是生產混合型卷煙的重要原料,但白肋煙普遍存在煙堿向降煙堿轉化問題,國內外圍繞煙堿轉化問題開展了系統(tǒng)研究。(一)美國自上世紀末開始進行煙堿轉化研究,主要包括不同品種轉化株的比例和分布,轉化株的早期誘導和鑒別方法,白肋煙品種煙堿轉化性狀的改良,生產低煙堿品種種子(LC

5、),煙堿轉化基因的調控等。Bush等和史宏志等的研究表明,美國白肋煙品種一般在群體中含有15-20%的轉化株,其中約一半轉化株的煙堿轉化率在20%以上。煙堿轉化主要發(fā)生在調制過程的前3個星期,變黃末期后變化較小。煙堿轉化由顯性基因控制,白肋煙煙葉衰老過程中的煙堿轉化是細胞色素P450類的CYP82E4基因顯性表達的結果,轉化基因編碼形成煙堿去甲基酶,其催化煙堿向降煙堿的轉化。(二)2004年我們在國家煙草專賣局立項開展“煙草煙堿轉化及生物堿優(yōu)化技術研究”,2007年在四川省煙草公司立項開展“四川優(yōu)質

6、白肋煙生產理論與技術研究與應用研究”,2009年在云南省煙草公司立項開展“云南賓川優(yōu)質白肋煙技術開發(fā)與應用研究”。經過近些來的系統(tǒng)研究,明確了我國不同產區(qū)、不同品種存在的煙堿轉化問題,煙堿轉化株早期誘導和鑒別技術,煙堿轉化性狀遺傳變異規(guī)律,對我國主要白肋煙品種鄂煙一號、達白一號、達白二號等進行了系統(tǒng)改良,培育出了相應的改良雜交種,取得了顯著的增質減害效果。(三)為了從煙草群體中有效地鑒別和去除轉化株,我們研究發(fā)明了采用2-氯乙基磷酸處理或碳酸氫鈉處理方法誘導轉化株的煙堿轉化性狀在開花前表達的方法。煙

7、葉處理后晾制的溫度對轉化株的煙堿轉化有較大的影響,在35-3VC時為最佳。乙烯利和碳酸氫鈉的濃度對誘導轉化株煙堿轉化的效果有很大影響,試驗表明乙烯利的處理濃度以0?3%為宜,碳酸氫鈉對煙草早期幼葉以0.8%最為適宜,對煙株生長中期煙葉以1%最適。通過誘導可使轉化株的轉化性狀充分表達,再通過分析測定生物堿的組成和含量,計算煙堿轉化率。(四)在單株選擇過程中,需要對轉化株的判別制定標準,以科有效鑒別轉化株和非轉化株。2003年以前,國際上一般把煙堿轉化率(降煙堿含量占降煙堿和煙堿含量之和的百分率)大于5

8、%作為轉化株的標準,近些年來美國已降低到了3%,但仍沒有科學依據(jù),主要是根據(jù)經驗判斷。我國目前上缺乏育種和制種過程中轉化株的鑒別標準,在實際操作中一般按煙堿轉化率大于3%或5%作為判別轉化株的標準,由于缺乏科學性,一些轉化株不能有效鑒別,制定嚴格和科學的標準十分必要。3標準編制原則及主要內容確定的依據(jù)3.1標準適用范圍;本標準規(guī)定了白肋煙煙堿轉化株的早期鑒定規(guī)程和確定轉化株的標準。本標準適用于白肋煙育種和制種過程中,在煙株開花前對煙堿轉化株進行鑒別,以有效去除煙堿轉化

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