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1、漳州水仙組培快繁技術(shù)探究摘要以漳州水仙的鱗莖營養(yǎng)器官作為外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)，結(jié)果表明：誘導(dǎo)芽的最佳培養(yǎng)基為MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.1mg/L,最佳繼代培養(yǎng)基為MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.5mg/L,最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA0.1mg/L+IBA0.1mg/L,生根率達(dá)90%以上。關(guān)鍵詞漳州水仙；組織培養(yǎng)；快速繁殖中圖分類號(hào)S682.2+1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)1007-5739(2012)20-0163-01水仙(Narcissustazetavaichimensis)為石蒜科水仙屬植物
2、，有超過30個(gè)種以及數(shù)以百計(jì)的變種和品種，漳州水仙(NarcissustazettaL.var.ChinesisRoem)已有400多年的歷史，為我國十大傳統(tǒng)名花之一。因球大，花多、素雅清香，姿美、香濃又能雕刻成瑰麗多姿的優(yōu)美藝術(shù)造型等譽(yù)滿中外，為漳州市的一大特產(chǎn)[1-3]o水仙分球繁殖率較低，且易產(chǎn)生退化，大面積栽培種苗數(shù)量無法得到滿足[4-6]o因此，該研究以漳州水仙的鱗莖作為外植體，探討了不同培養(yǎng)基配方、不同培養(yǎng)條件對(duì)其鱗莖誘導(dǎo)、增殖、生根情況的影響，建立了一套快繁體系，為水仙的快速工廠化生產(chǎn)提供了技術(shù)依據(jù)。1材料與
3、方法1?1試驗(yàn)材料供試漳州水仙鱗球莖由福建省農(nóng)科院甘蔗研究所花卉室提供。1.2試驗(yàn)方法1.2.1外植體的低溫預(yù)處理。準(zhǔn)備用于培養(yǎng)的鱗莖，放在溫度控制在49的冰箱低溫預(yù)處理1個(gè)月，然后取出置于培養(yǎng)基中進(jìn)行組織培養(yǎng)。試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，應(yīng)用這一方法對(duì)提高外植體鱗莖切塊的成活率和小鱗莖的誘導(dǎo)形成率有極顯著的效果［7］。1.2.2芽的誘導(dǎo)。將低溫處理過的鱗莖鱗片作為外植體。取健壯無病的鱗莖，用自來水沖洗干凈，去掉外層鱗片,一層層剝離內(nèi)層鱗片。在超凈工作臺(tái)上先用75%酒精消毒30s,再用0.1%升汞消毒8min,無菌水沖洗4?5次。消毒好
4、的帶鱗莖盤的鱗莖片切成1.0cmX1.5cm大小的塊體，分別接種于4種激素組合的培養(yǎng)基上進(jìn)行小鱗莖的誘導(dǎo)和分化（每瓶2個(gè)外植體）。培養(yǎng)基附加蔗糖3.0%,瓊脂0.7%。1.2.3培養(yǎng)條件。以MS為基本培養(yǎng)基，附加不同種類和質(zhì)量濃度的激素，pH值5.8,光照2000lx,光照時(shí)間每日12h,溫度為（20±1）°Co2結(jié)果與分析2.1不同激素水平對(duì)芽誘導(dǎo)的影響將滅菌處理的外植體接種到不同激素水平的培養(yǎng)基上進(jìn)行起始培養(yǎng)，7d后外植體開始膨大，25d后芽苗萌發(fā)生長(zhǎng)，結(jié)果見表1?？梢钥闯?，用不同濃度的6-BA進(jìn)行處理，其誘導(dǎo)率有明顯
5、差異，隨著激素濃度的增加，水仙鱗莖盤誘導(dǎo)小芽數(shù)也隨之增加，其中以MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.1mg/L的誘導(dǎo)效果最好。2.2鱗莖芽的繼代增殖培養(yǎng)把分化后的鱗莖縱向切割，接種到不同濃度6-BA處理的培養(yǎng)基上30d后調(diào)查，結(jié)果見表2?？梢钥闯?，以MS+6-BA3mg/L+NAA0.5mg/L激素組合為較適配方，增殖系數(shù)3.6。2.3不同種類生長(zhǎng)素對(duì)芽苗生根的影響將高3cm以上的鱗莖苗芽，分切轉(zhuǎn)接于不同的誘導(dǎo)生根培養(yǎng)基上，20d后統(tǒng)計(jì)調(diào)查結(jié)果見表3。可以看出，芽苗在5種培養(yǎng)基上均能生根，而以1/2MS+NAA0.1m
6、g/L+IBA0.1mg/L組合的表現(xiàn)最佳，生根率達(dá)到90%。2.4煉苗與移栽將已生根的植株移出培養(yǎng)室，先放在散射光下煉苗4?5d,然后洗去培養(yǎng)基，移栽于泥炭土中，保持溫度在25￡以下，濕度在85%以上，并注意覆蓋遮陽網(wǎng)，成活率可達(dá)90%以上。3結(jié)論與討論(1)在水仙組培中發(fā)現(xiàn)，隨著繼代次數(shù)的增多，個(gè)別組培鱗莖芽出現(xiàn)玻璃苗，這種苗不能繼續(xù)擴(kuò)繁只能棄去。出現(xiàn)這一現(xiàn)象可能與培養(yǎng)基種類、光照強(qiáng)度、溫度等有較大的關(guān)系，水仙為喜光性植物，試驗(yàn)條件中的光照無法滿足其對(duì)光的需求，如何克服玻璃化現(xiàn)象，有待進(jìn)一步探索。(1)帶鱗莖盤的莖塊是
7、水仙組培取材的最適部位［1］,該試驗(yàn)也進(jìn)一步驗(yàn)證了這一結(jié)論，在繼代增殖擴(kuò)繁中，MS+6-BA3mg/L+NAA0.5mg/L是較好的配方組合。(2)該試驗(yàn)的生根率雖達(dá)90%,但發(fā)根數(shù)較少，一般只有2條左右，篩選一個(gè)較適合水仙生根的最佳配方，是保證水仙組培移植成活的關(guān)鍵之一。4參考文獻(xiàn)［1］王俐，楊德，龍春林?中國水仙的離體培養(yǎng)及植株再生［J］?云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2004,19(5)：616-618.［2］李招文，唐道一?水仙組織培養(yǎng)的研究［J］?藝學(xué)報(bào)，1982,9(4)：65-68.：3］周威，張正偉，李云飛，等.2個(gè)水
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