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1、轉基因番茄研究進展摘要：利用轉基因技術培育，已經(jīng)獲得延熟、抗病、抗蟲、抗逆、抗除草劑和品質改良的轉基因番茄，并主要介紹轉基因技術在這些方面的研究成果和研究進展，此外簡單介紹了轉基因番茄的優(yōu)勢及其展望。關鍵詞：轉基因番茄進展番茄(Lycopersiconeseulentem?M/7)是茄科(Solanaceae)番茄屬(Lycopersicon)的一年生或多年生植物，是世界上垂耍的蔬菜作物Z—。番茄需求量大，種植廣泛，同時對其的遺傳理論研究較為深入，番茄已經(jīng)成為蔬菜基因工程研究的模式植物之一，且在1994年成為壯界上第一例商品化生產(chǎn)的轉
2、基因作物——轉基因延熟番F(xiàn)lavr?SavrTM,其由美國Calgene公司培育成功并獲準進入市場。其厲幾年利用轉基因技術培育出抗病蟲害、抗除草劑、抗逆和高品質的優(yōu)良番茄晶種。番茄的基因轉化技術主要采用農桿菌介導的基因轉化方法。此外，黃永芬等⑴利用花粉管導入法進行番茄的基因轉化，將整合了抗凍蛋白基因的Ti質粒直接注入番茄子房或花粉管中進行轉化獲得了抗凍番茄。1.轉基因番茄研究進展1.1延熟轉基因番茄目前利用基因轉化技術延熟番茄有兩種方法，一是抑制細胞壁的降解，二是抑制乙烯的合成，在防止其腐爛方面取得了較好的效果。1.1.1抑制番茄細胞
3、壁降解的研究細胞壁水解酶對果實的成熟有促進作用，通過抑制阻止細胞壁水解酶活性，可抑制果實細胞壁的降解，延緩成熟與衰老。主要包括兩類酶，一類是多聚半乳糖醛酸酶(PG),可將細胞壁中的多聚半乳糖昔降解為低聚半乳糖昔，在果實成熟過程中，PG的mRNA水平可提高100倍。葉志彪等〔2］將PG基因的Hindfi片段反向克隆在植物轉化載體Bin19的花椰菜病毒(CaMV)的35S啟動子和3端非翻譯區(qū)(nos)終止子之間，經(jīng)農桿菌與番茄無菌苗子葉外植體共培養(yǎng)，獲得轉化植株，這種轉反義PG基因的番茄果實中，PGmRNA水平及PG酶活性在果實成熟階段明
4、顯降低。另一類是果膠甲脂酶（PE）,可將細胞壁屮的果膠去甲基，使細胞壁軟化，并減少果實屮的可溶性固形物含量另一類是果膠甲酯酶（PE）⑶。采用PE反義基因法（反義RNA技術）也可使番茄果實延遲成熟⑷。1.1.2抑制番茄乙烯合成的研究乙烯是植物的內源激素，其功能之一是催化果實的成熟。若想降低乙烯合成量可通過降低乙烯的前體ACC合成酶和ACC氧化酶在番茄果實屮的水平或活性。Oller等⑸將ACC合成酶的基因LE-ACC反向插入載體后轉化番茄，乙烯合成降低了99.5%oXiong等⑹通過抑制不同的RNA,得到了延熟長達120d的番茄。葉志彪⑺
5、等將乙烯合成酶反義基因導入到番茄屮，創(chuàng)建了轉基因耐貯藏番茄材料，并結合常規(guī)育種選育出耐貯藏雜交番茄——華番1號。仇潤祥等⑻構建了ACC合成晦LE-ACC的反義基因——核酶嵌合DNA的重組質粒PREI,轉基因番茄也表現(xiàn)出了抑制ACCmRNA的表達。1.2抗病抗蟲轉基因番茄1.2.1抗病毒轉基因番茄的研究煙草花葉病毒（TMV）、黃瓜花葉病毒（CMV）、黃化卷葉病毒（TYLCV）、苜?；ㄈ~病毒（AIMV）和番茄斑萎病毒（TSWV）等是危害番茄的主要病毒，造成大量的減產(chǎn)。目前主要采用轉病毒外殼蛋白（CP）基因的方法獲得抗病毒植株。Abel等〔
6、9】首次將煙草花葉病毒（TMV）外殼蛋白（CP）基因轉入煙草和番茄培育岀能穩(wěn)定遺傳的抗病毒植株。Turner等用苜?；ㄈ~病毒（AlfalfaMosaicVirus,AIMV）外殼蛋口基因序列轉化的番茄植株作試驗，英自交后代對AIMV感染表現(xiàn)高水平的保護抗性［⑼。姜國勇等雙抗表達載體的構建及番茄的轉化鑒定，利用天然花粉蛋白基因（TCS）和GUS基因偶聯(lián)，通過農桿菌介導，獲得了TCS-GUS基因雙雙表達的再生植株，轉基因植株對TMV和CMV均表現(xiàn)出較高的抗性。1987年，Harris。n等首次將CMV的satRNA的cDNA轉入番茄，獲得
7、了卅界上第一株抗CMV的轉基因番茄。Gal-On等將CMV的satRNA和復制酶（replicase）基因導入番茄，也獲得了抗CMV的轉基因番茄⑴】。2007年，Takenaka等通過設計出一種六指的鋅指蛋口，比蛋口具更高親和力，可以阻止黃化1山葉病毒的蛋白與復制起始位點的結合，也能抑制的復制，但并未進行轉入植物的驗證實驗。冃前，病毒外殼蛋白基因、衛(wèi)星RNA基因、反義RNA基因等都是獲得抗病毒番茄的候選基因。此外，人們還試圖從病毒蛋白基因、核酸裂解酶基因、病毒復制基因等方面尋找更好的抗病毒新途徑。1.2.2抗真菌.細菌轉基因番茄的研究
8、晚疫病和枯萎病是常見的植物被真菌、細菌感染后所得的疾病。番茄抗真菌、細菌病轉基因主要是利用植物兒丁質酶基因轉化番茄卩役Thomzik等〔⑴將兩個來源于葡萄的合成1,2?二苯乙烯的酶基因Vst1和Vst2導入番茄中，Z后再
