鉆石玫瑰組培快繁技術(shù)研究

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1、摘要:組培快繁技術(shù)研究結(jié)果表明:適宜鉆石玫瑰離體芽誘導(dǎo)分化的培養(yǎng)基為MS+6-BA0.50mg/L+NAAO.10?0.20mg/L;適宜叢生芽繼代增殖的培養(yǎng)基為MS+6-BA1.OOmg/L+NAAO.10?0.20mg/L;適立試管苗生根的培養(yǎng)基為l/2MS+NAA().l()mg/L,其生根率達(dá)90%。關(guān)鍵詞:鉆石玫瑰;組培快繁;培養(yǎng)基;誘導(dǎo)分化鉆石玫瑰(Rosasp.),薔薇科薔薇屬多年生花卉,為微型月季的-?種,因英花枝短小,花朵如豆扣般人小,故美其名㈠“鉆石玫瑰”或“袖珍玫瑰覽鉆石玫瑰除具有一般月季花

2、容秀美、芳香馥郁、四季常開等特點(diǎn)外,還具有分枝多、株型矮小緊湊、耐寒、耐熱、適應(yīng)性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),是現(xiàn)代城市綠化不可替代的材料,深受人們的喜愛[1]。冃前鉆石玫瑰主要靠打?插繁殖,繁殖率低、速度慢,.「L后代出現(xiàn)品質(zhì)降低現(xiàn)象,遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場的需求。為此,我們開展了鉆石玫瑰組培快繁技術(shù)研究,擬用工廠化育苗措施解決常規(guī)生產(chǎn)所面臨的問題。1材料與方法L1外植體的建立供試材料采自重慶市園林綠化科學(xué)研究所品種圃從北京引進(jìn)己栽培馴化2年的鉆石玫瑰品種“紫色時(shí)代”當(dāng)年生植株。剪取優(yōu)良健壯株當(dāng)年生枝條中段帯側(cè)芽的未木質(zhì)化或半木質(zhì)化莖

3、段,用毛刷蘸肥皂水輕輕刷洗后流水沖洗1?2h,再剪成1.0?1.5cm左右?guī)б秆康那o段;超凈臺上將莖段先用70%酒精溶液浸泡30s,無菌水沖洗2?3次,再置于().1%升汞溶液中消毒9?12niin,然后用無菌水沖洗3?4次,以備接種。12離體芽的誘導(dǎo)培養(yǎng)將無菌莖段接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基上誘導(dǎo)萌芽。誘導(dǎo)培養(yǎng)基以MS為基本培養(yǎng)基,附加不同濃度的細(xì)胞分裂素6-BA和生長素NAA,共組成5種培養(yǎng)基:MS+6-BA().3()mg/L+NAAO.10mg/L,MS+6-BA().5()mg/L+NAA().10mg/L,MS+

4、6-BA().5()mg/L+NAA0.20mg/L,MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.20mg/L,MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.10mg/Lo每種培養(yǎng)基均接種20個(gè)離體芽,培養(yǎng)6周后統(tǒng)計(jì)芽誘導(dǎo)分化率(見表1)。1.3叢生芽的繼代增殖培養(yǎng)將誘導(dǎo)培養(yǎng)基上已萌發(fā)的嫩芽切下轉(zhuǎn)接到4種繼代培養(yǎng)基屮繼代增殖。繼代培養(yǎng)基分別MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.10mg/L,MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L,MS+6-BA1.00mg/L+NAA0.20mg/L,MS+6?BA2

5、.00mg/L+NAA0.20mg/L。每種培養(yǎng)基接種30個(gè)嫩芽,接種時(shí)單芽莖段長().5?1.0cm左右,培養(yǎng)3周后統(tǒng)計(jì)叢生芽的數(shù)蜃以及高于2cm的芽數(shù)(見表2)。1.4試管苗的生根培養(yǎng)選取繼代培養(yǎng)屮牛長健壯的從生芽,剪成1.2?1.5cm長的單芽莖段,轉(zhuǎn)接到牛根培養(yǎng)基上。培養(yǎng)基配方為:l/2MS+NAA0.10mg/L,l/2MS+IBA0.1mg/L,l/2MS+NAA0.20mg/L,l/2MS+IBA0.20mg/L,l/2MS+NAA0.50mg/L,l/2MS+IBA0.50mg/Lc每種培養(yǎng)基接種

6、30個(gè)莖段,接種15天后統(tǒng)計(jì)幼苗生根情況(見表3)。以上MS培養(yǎng)基中的白砂糖濃度均為3().()g/L,1/2MS培養(yǎng)基中白砂糖濃度為20.0g/L,瓊脂均為3.5g/L,pH5.8,培養(yǎng)室溫度23(±2)°C,光照強(qiáng)度2000?2500Lx,光照時(shí)I'可10?12h/d。2結(jié)果與分析2.1離體芽的誘導(dǎo)結(jié)果鉆石玫瑰離體芽的誘導(dǎo)較慢,接種4周后離體芽才開始萌動,但芽萌動后的生長情況因培養(yǎng)基內(nèi)激素濃度的不同而不同。由表1可知,MS+6-BA0.30mg+NAA0.10mg/L培養(yǎng)基從生芽少,由于6-BA濃度太低芽分化

7、相對較差,分化率為70%,但從牛芽在培養(yǎng)基屮牛長健壯;在MS+6-BA1.OOmg/L+NAA0.20mg/L培養(yǎng)基上,叢牛:芽相對較少,芽分化率為105%,且叢牛芽綸長細(xì)弱,說明該培養(yǎng)基中6-BA和NAA濃度配比不當(dāng);在MS+6-BA2.00mg/L+NAA0.1Omg/L培養(yǎng)由于6-BA濃度過高,離體芽萌動后僅產(chǎn)生愈傷組織,未分化出叢生芽;MS+6-BA0.50mg/L+NAAO.1Omg/L和MS+6-BA0.50mg/L+NAA0.20mg/L兩種培養(yǎng)基上,20個(gè)離休芽分化出的從牛芽分別為49個(gè)和39個(gè),

8、分化率分別達(dá)245%和195%,且從牛芽牛長健壯。重復(fù)試驗(yàn),篩選出適宜離體芽誘導(dǎo)的培養(yǎng)基為MS+6-BA().5()mg/L+NAAO.10?().2()mg/L。2.2從生芽的繼代增殖結(jié)果從表2可以看出,鉆石玫瑰在所采用的4種繼代增殖培養(yǎng)基上培養(yǎng)3周后,芽的增殖倍數(shù)和人于2cm芽的比率存在差異。其中:MS+6-BA1.()()mg/L+NAA().l()mg/L和MS+

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